石斛的組織培養技術及移栽探析

郭逸榴

摘 ? ?要：文章闡述了霍山米斛、天目山鐵皮石斛和井岡山鐵皮石斛3種石斛的組織培養技術和林下栽培技術，建立了

3種石斛優良品種的組培快繁體系，用不同培養基對3種石斛開展腋芽組織對芽的誘導試驗、增殖試驗和生根試驗，并仿效石斛野外生長狀態，用技術手段將石斛苗固定在濕地松等樹皮較厚的大樹上，盡量減少人工干預，使其自然生長，達到仿野生生長效果。

關鍵詞：米斛；石斛；組織培養；移栽

文章編號：1005-2690（2023）05-0001-03 ? ? ? 中國圖書分類號：S682.31 ? ? ? 文獻標志碼：B

石斛是我國名貴的珍稀藥材，在民間有“救命仙草”的美譽，市場需求較大。經查相關資料發現，野生石斛經過多年被采掘，現已非常稀少，1987年被國家列為野生藥材重點二級保護瀕危植物，這與人們日益增長的需求相矛盾。為了響應《 “健康中國2023”規劃綱要》，解決市場供需矛盾，研究石斛的組織培養技術及移栽方式至關重要。

1 試驗目的

從安徽省霍山、浙江省天目山、江西省井岡山分別引進藥效最佳的霍山米斛、抗寒能力較強的天目山鐵皮石斛和井岡山本土野生鐵皮石斛3個主要石斛品種進行組織培養快繁研究，建立3個石斛優良品種的組培快繁體系。在此基礎上仿效石斛野外生長狀態，用人工方式模擬野生石斛的生長環境，培育出無論形狀還是品質都十分接近野生石斛的種植石斛[1]。歐成軍（2020）[2]通過對比2種栽培模式發現，林下仿野生種植模式較棚內仿野生種植模式成活率高。本試驗用技術手段將石斛苗固定在濕地松等樹皮較厚的大樹上，盡量減少人工干預，使其自然生長，達到仿野生生長效果。

霍山米斛是中國國家地理標志產品，主產于大別山區的安徽省霍山縣，多生長在云霧繚繞的懸崖峭壁石縫隙間和參天古樹上。霍山米斛能大幅度提高人體內SOD（延緩衰老的主要物質）水平，有極高的藥用價值。

天目山鐵皮石斛產于浙江省天目山，生長于海拔1 400 m左右的山地半陰濕巖石上，喜溫暖濕潤氣候和半陰半陽的環境，屬較耐寒石斛品種。該品種被列為中華九大仙草之首，藥用價值極高。

井岡山野生鐵皮石斛產于江西省井岡山深山，是江西省本土野生石斛品種，種源較稀有，生長于海拔1 600 m左右的山地半陰濕巖石上。經過長期的適應和自然選擇，鐵皮石斛在遺傳上形成了獨特的生命活動機制和生物活性成分。

2 材料與方法

預處理材料時，用接種刀割取健壯、無病蟲害的枝條，去葉后用自來水沖洗表面灰塵，在超菌臺上去除枝條上表皮，取節，每段節保留1個3～5 cm的芽點，放入玻璃瓶中用無菌水沖洗10 min。

消毒外植體時，準備75%乙醇、0.1%升汞和無菌水。用75%乙醇消毒后，再用無菌水在振蕩器中洗3次，0.1%升汞消毒后用無菌水在振蕩器中洗5次，之后把節段分為嫩、中、老3種，分別用升汞消毒6 min、8 min和10 min。

2.1 腋芽的生長試驗

將消毒后3 cm左右的莖段濾凈后接種至基本培養基MS中培養，如圖1所示。試驗品為3個品種各20個莖段，試驗過程中并未發現異常，消毒過的腋芽均正常生長，因此腋芽生長選用MS培養基。

2.2 愈傷組織和芽的誘導

將高約1.5 cm的腋芽為1個增殖單位，接種至誘導愈傷組織和芽培養基中。試驗品為3個品種各15個增殖單位。

從表1可以看出，天目山鐵皮石斛和井岡山鐵皮石斛用MBA 1.5/0.3效果更好，出芽較多，無變異。MBA 2/0.1基部雖膨大明顯，但出現玻璃化情況不可逆轉，MBA 1.5/0.1和1/2 MBA 2.0雖無玻璃化情況，但出芽沒有MBA 1.5/0.3多，1/2 MBA 2.0出芽質量不高?；羯矫柞褂肕BA 1.5/0.1效果最佳，出芽多、芽型正常，相較于鐵皮石斛而言，米斛更適合用激素稍低的培養基。

2.3 芽的增殖

將誘導出的芽團轉入增殖培養基中，每4～5個芽組成一個團塊，每30 d為一個續代，每次激素濃度視芽的情況降低或增加，保證芽的增殖率，維持較高的品質。

從表2可以看出，天目山鐵皮石斛和井岡山鐵皮石斛情況一樣，用MBN 3/0.2效果最好，芽較多、質量好，生長明顯，苗高且粗壯，葉片顏色正常，增殖率高。MBN 4/0.2芽多，但后期會出現玻璃化，葉片發黃，可能是激素太高，1代或2代后轉用MBN 2/0.2葉片幾乎沒有發黃情況，株形較好，葉形正常。MBN 1/0.2和MBA 2/0.2雖葉片無發黃，苗粗壯，但芽稍少，增殖率不高?；羯矫柞肕BN 2/0.2效果最佳，芽多，增殖率高，苗粗壯株形好。MBN 4/0.2和MBN 3/0.2分別為玻璃化情況較多和葉片發黃較多。MBN 1/0.2和MBA 2/0.2芽稍少，增殖率低，長高不明顯。

2.4 根的誘導

挑出培養基里粗壯的單株，放入生根培養基里，15 d后觀察，試驗品為每個品種50個單株，如表3所示。生根培養基分別開展幾種對比試驗，參照MN 0.2，梯度MNA 0.2/0.2、MNA 0.2/0.4、MNI 0.2/0.2、MNI 0.2/0.4、1/2 MNA 0.2/0.2、1/2 MNI 0.2/0.2。綜合分析，MNA 0.2/0.2生根較快較好，13 d左右萌動，35 d左右生根，生根率達到100%，根粗壯呈條狀，移栽成活率高。用1/2MS生根期稍長且相對比較瘦弱，有個別根排列不齊，不利于移栽成活。

2.5 培養條件

試驗過程中觀察生長情況，擴繁培養條件為燈光照射8～10 h/d，溫度為15～20 ℃，如圖2所示。

2.6 種植方法

2.6.1 安裝樹體噴淋系統

對選擇好的部分大樹安裝樹體噴淋系統，具體方法是用1根水管從樹下沿樹干引至約5.5 m高處，水管在高處繞樹1圈并固定好，其下開孔，水管外用遮陽網繞樹1圈綁好，確保緩沖水流形成噴淋效果，既不沖散移植苗，又能灌溉移植苗。

2.6.2 移栽樹體

對需進行仿野生培育移植的樹建立噴淋系統，選用2～3年組培苗，朝樹下倒著繞樹1圈，用細麻繩綁住根部固定住，苗倒著種植方便固定根部且淋水時苗不易被沖散。麻布片不可綁太厚，綁1圈即可，否則遇到連續降水天氣容易積水太多，導致爛根倒苗。之后用能儲水、可降解的麻袋片裹住根部綁牢，無需加其他基質。

移栽前用0.05%甲基硫菌靈噴米斛苗和麻片。每圈移植苗數量視樹的大小而定，與圈苗團間隔約5 cm左右，每圈苗間隔25～30 cm。從采摘難度、成本及安全考慮，最低苗圈離地約2 m，最高苗圈離地約5 m，每棵樹視實際樹況可綁苗4～8圈，如圖3所示。

2.7 移栽管護

石斛喜潤而畏濕、喜干而畏燥，春秋濕養、夏冬干養，壯苗濕養、弱苗干養，北方濕養、南方干養，通風濕養、不通風干養。鐵皮石斛仿野生種植一般選擇春季或秋季移栽，此時溫度為13～24 ℃，適合鐵皮石斛生長[3]。種植石斛后要充分噴淋，將濕度控制在70%左右，特別注意夏季高溫天氣需保持水分充足，應早晚澆水多次，充分淋透，若處于通風條件不好的地區，石斛苗寧干勿濕。

種植人員應選擇郁閉度在70%以上、林地小環境濕度為80%的林地進行仿生種植。不可選擇陽光暴曬下的樹木，否則易造成石斛苗因干旱脫水而死亡，也不可選擇有病蟲害，尤其是白蟻為害的林地和林木，白蟻會啃食包裹石斛苗根部的麻布片、麻繩和石斛苗，導致未附著樹皮內的石斛苗嚴重脫落或死亡。

3 結論與討論

3種石斛快繁培養基的選擇方式如下。腋芽生長可用MS基本培養基，誘導愈傷組織天目山鐵皮石斛和井岡山鐵皮石斛用MBA 1.5/0.3較好，霍山米斛用MBA 1.5/0.1較好；擴繁天目山鐵皮石斛和井岡山鐵皮石斛用MBN 3/0.2較好，霍山米斛用MBA 2/0.2較好，轉代增殖系數達5～7倍；生根3種石斛用MNA 0.2/0.2較好，生根時間較短，生根率達95%以上。

仿生種植石斛的噴淋設施應力求完善，一是可保證石斛苗仿生種植的成活率，二是可降低人工淋水成本。仿生種植時石斛苗根部的麻布片不可裹太厚，1層即可，既可固定好石斛苗，又不會在梅雨季節造成積水。如裹太厚梅雨季節會造成根部積水，導致石斛苗爛根死亡。仿生種植的林地和林木選擇至關重要，要充分考慮林地朝向、林地郁閉度、林地小環境濕度、林地和林木病蟲害情況等，提升石斛仿生種植成活率，增加可采收年份，提高石斛鮮條、石斛鮮花的產量。仿生種植的林木盡量選擇樹皮較厚的品種，以濕地松最佳，其次為樟樹。石斛苗的新根會逐漸長入樹皮內吸收水分并固定在樹上生長，之后可形成野生模式，不用人工管護。

（編輯：王雨荷）

參考文獻：

［1］張丹丹.淺談野生石斛和種植石斛的區別［J］.光明中醫，2020，35（2）：277-279.

［2］歐成軍.石斛屬植物仿野生種植技術［J］.現代農業科技，2020（14）：118-121.

［3］舒杰.鐵皮石斛的應用價值及林下仿野生栽培技術［J］.現代農業科技，2021（24）：61-69.