血清IgG、IgE聯合檢測在成人食物過敏原篩查中的應用*

程世亮,李 萌,吳 冰,楊麗超,黃 勇,張艷麗

山東大學附屬山東省立第三醫院檢驗科,山東濟南 250031

在過去的二三十年中,食物過敏在全球許多地區的流行率呈上升趨勢,已成為一個全球性公共健康問題,尤其是在工業化國家[1]。食物過敏被認為是繼由過敏性呼吸道疾病引發的“第一波”過敏性流行病之后的“第二波”過敏性流行病,僅在美國,食物過敏就影響到大約8%的兒童和2%～3%的成年人[2]。過敏性疾病發病率不斷地增加,以及病情反復發作將嚴重影響患者的生活水平和工作質量,因此需要臨床制訂更好的預防、診斷和治療策略[3]。低成本、準確、快速且對消費者友好的食品過敏原篩查檢測解決方案將有助于降低發病風險及早期治療,并為患者提供更大的食品安全保證。免疫球蛋白E(IgE)介導的過敏或超敏反應通常定義為由于免疫系統的外周耐受性受損或未經訓練而發生的不必要的嚴重癥狀性免疫反應[4]。免疫球蛋白G(IgG)參與多種免疫防御機制,包括毒素中和、抗體依賴性細胞介導的細胞毒性、吞噬作用和細胞因子產生[5]。IgE、IgG均是過敏反應中的重要抗體,因此本研究以226例成人過敏性疾病患者為研究對象,檢測患者血清IgE、IgG水平,探討二者聯合檢測在成人常見食物過敏原篩查中的應用價值,現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2020年2月至2022年6月于本院就診的226例成人過敏性疾病患者作為研究對象。年齡18～72歲,平均(50.24±12.65)歲,其中<50歲132例,≥50歲94例;男108例,女118例。觀察記錄患者吸煙史、體重指數(BMI)、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、胃腸道疾病(急慢性胃炎、消化性潰瘍、急慢性闌尾炎等)發生情況。本研究符合倫理標準,經本院醫學倫理委員會批準,研究對象本人或家屬知情并自愿簽署研究同意書。納入標準:(1)符合劉光輝[6]編著的《過敏性疾病診療指南》;(2)病程>6周;(3)患者依從性較高,均嚴格按照醫囑接受常規治療。排除標準:(1)先天性器官發育不良、嚴重心腦血管疾病者;(2)伴有惡性腫瘤或血液系統疾病者;(3)伴有寄生蟲、病毒等嚴重感染者;(4)入組3個月前有手術或重大外傷史者。

1.2方法 所有患者均采集空腹外周靜脈血10 mL,3 000 r/min離心15 min(離心半徑:18 cm),取上清,均采用化學發光免疫分析法檢測患者12種常見食物過敏原對應的血清IgG、IgE。血清IgG、IgE檢測的具體步驟:用食物過敏原的提取物制作包被板,分別采用鼠抗人IgG、IgE包被標準孔;在標準測定孔中分別加入100 μL的標準IgG、IgE,在食物過敏原制備的包被板中加入100 μL患者血清(稀釋比為1∶100),室溫振蕩15 s,35 ℃反應1 h,磷酸鹽緩沖液(PBS)洗板3次;分別加入鼠抗人IgG、IgE抗體,室溫振蕩15 s,35 ℃反應1 h,PBS洗板3次;加入100 μL發光液(將A液魯米諾和B液過氧化脲于使用前等體積混合),避光條件下反應5 min,采用化學發光免疫分析儀檢測發光值,再將IgG、IgE發光值與濃度進行線性擬合。陽性判斷標準:當IgG<50 U/mL時為陰性,IgG≥50 U/mL時為陽性;當IgE<100 U/mL時為陰性,IgG≥100 U/mL時為陽性。試劑盒均購自美國Bio-Rad公司(批號:6J0219、6K0377)。操作步驟均嚴格按使用說明進行。

2 結 果

2.1血清IgG、IgE診斷常見食物過敏原的陽性率比較 常見食物過敏原中,引起226例過敏性疾病患者血清IgE升高最常見的為蝦、魚、蟹、牛奶,引起血清IgG升高最常見的為雞蛋、牛奶、大豆;雞蛋、小麥血清IgE陽性率顯著低于血清IgG陽性率,蝦、魚、蟹血清IgE陽性率顯著高于血清IgG陽性率,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 血清IgG、IgE診斷過敏性疾病患者常見食物過敏原的陽性率比較[n(%)]

2.2不同年齡段(<50歲與≥50歲)過敏性疾病患者臨床資料比較 <50歲與≥50歲患者性別、吸煙史、BMI、SBP、DBP、TC、TG、HDL-C、LDL-C比較,差異無統計學意義(P>0.05),而≥50歲患者胃腸道疾病發生率顯著高于<50歲患者,差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同年齡段過敏性疾病患者臨床資料比較[n(%)或

2.3不同年齡段(<50歲與≥50歲)過敏性疾病患者血清IgG陽性率比較 常見食物過敏原中,不同年齡段患者對雞蛋,魚,小麥,玉米,牛、羊、豬肉,花生,杧果,蘑菇的血清IgG陽性率差異無統計學意義(P>0.05),而≥50歲過敏性疾病患者牛奶、大豆、蝦、蟹的血清IgG陽性率顯著高于<50歲患者,差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 不同年齡段過敏性疾病患者血清IgG陽性率比較[n(%)]

2.4不同年齡段(<50歲與≥50歲)過敏性疾病患者血清IgE陽性率比較 常見食物過敏原中,不同年齡段患者對雞蛋,蝦,魚,小麥,玉米,牛、羊、豬肉,花生,杧果,蘑菇的血清IgE陽性率差異無統計學意義(P>0.05),而≥50歲過敏性疾病患者對牛奶、大豆、蟹的血清IgG陽性率顯著高于<50歲患者,差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 不同年齡段過敏性疾病患者血清IgE陽性率比較[n(%)]

3 討 論

過敏性疾病是機體對某些抗原產生初次應答,再次接觸此抗原后產生相應過敏抗體,吸附于皮膚、消化道中的嗜酸性粒細胞表面,使機體處于一種致敏狀態,進而發生的一種特異性免疫反應疾病[7-9]。找到引起過敏反應的物質(即過敏原)并避免攝入是預防食物相關過敏性疾病發生的重要措施。過去幾十年,食物過敏原因和機制探索已取得較大進展,早期指南建議在妊娠和哺乳期間應避免常見的食物過敏原,并避免在1～3歲的兒童中引入過敏性食物[10]。

食物過敏是對特定食物抗原的超敏反應,根據攝入食物到出現臨床表現所用時間不同(2 h內或2 h后)可分為IgE和非IgE介導的食物過敏[11-12]。IgE參與Ⅰ型變態反應,其食物致敏過程包括食物過敏原暴露、IgE介導、肥大細胞活動度增加等,IgE介導的過敏反應通常為速發型過敏反應[13]。研究顯示,血清總IgE水平升高可提示Ⅰ型過敏反應的可能性較大,但其并非是判定過敏狀態的可靠指標[14]。本研究226例過敏性疾病患者中,引起血清IgE升高最常見的食物為蝦、魚、蟹、牛奶,陽性率分別為66.37%、45.58%、41.59%、39.82%。IgG參與介導的過敏反應通常為遲發型過敏反應,患者一般在24 h或幾天后才發病,當患者對某些食物發生過敏時,會出現食物消化不完全的情況,無法完全消化的大分子食物進入血管后使得IgG抗體增加,與食物顆粒進一步形成免疫復合物,引發血管及組織炎癥,最終表現為全身各系統疾病[15-16]。本研究226例過敏性疾病患者中,引起血清IgG升高最常見的食物為雞蛋、牛奶、大豆,陽性率分別為78.76%、44.69%、34.96%。本研究結果顯示,不同食物過敏原血清IgG、IgE檢測陽性率不盡相同,雞蛋、小麥的IgE陽性率顯著低于IgG陽性率,而蝦、魚、蟹IgE陽性率顯著高于IgG陽性率,差異均有統計學意義(P<0.05)。李泉等[17]研究在篩查兒童食物過敏原時同樣發現,雞蛋IgE陽性率低于IgG陽性率,蟹、蝦、魚IgE陽性率高于IgG陽性率。這提示臨床中血清IgE或IgG單一檢測結果無法直接判定食物是否為過敏原,如雞蛋,在IgG的檢測中陽性率較高,而在IgE的檢測中陽性率相對較低。分析其可能是由于不同食物過敏原引發的過敏反應不同,即可能會引發遲發型或速發型過敏反應,或同時引發2種不同的過敏反應。上述研究結果提示在食物過敏原的篩查診斷中,應聯合檢測血清IgG、IgE,以提高篩查準確率。

本研究結果表明,血清IgG陽性率在過敏原牛奶、大豆、蝦、蟹中存在年齡差異,IgE陽性率在過敏原牛奶、大豆、蟹中存在年齡差異。造成≥50歲過敏性疾病患者牛奶、大豆、蟹等的血清IgG、IgE陽性率較高的可能原因為:隨著年齡的增長,過敏性疾病患者往往胃腸道功能下降,消化道中黏膜通透性增加,使許多食物蛋白質未經分解便被胃腸道黏膜吸收,容易導致食物變態反應等。

綜上所述,不同食物過敏原中IgE陽性率與IgG陽性率存在差異,因此成人食物過敏性原篩查中,IgG抗體檢測可作為IgE的重要輔助篩查指標,二者不能相互替代,聯合檢測血清IgE、IgG可有效篩查食物性過敏原引起的過敏性疾病。然而,因研究條件限制,本研究選取的食物過敏原種類及研究群體均較少,在今后的研究中將進一步擴大樣本量并增加食物過敏原種類進行分析,為臨床中采用IgE、IgG篩查食物過敏原提供更可靠的依據。