血清IL-17A、TGF-β對高級別CIN患者術后復發的預測價值

徐琦

北京市西城區婦幼保健院,北京 100054

宮頸上皮內瘤變(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)為宮頸癌前病變,若不能及時有效治療,可發展為原位癌[1]。宮頸錐切術因創傷小,廣泛應用于高級別CIN患者中,但術后仍存在復發風險[2]。研究指出,CIN患者術后復發可能導致宮頸癌風險增加[2]。因此,尋找可預測高級別CIN患者術后復發的相關指標十分必要。轉化生長因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)可調節細胞的增殖、分化,抑制免疫功能,促進血管生成,在組織損傷、修復及重塑過程中有重要作用[3]。研究指出,在CIN患者及宮頸癌患者中TGF-β表達明顯上升[4]。白細胞介素(interleukin,IL)-17A是一種炎癥細胞因子,在多種惡性腫瘤的發生發展中起著重要的作用,與宮頸癌發生、發展密切相關[5]。本文分析血清IL-17A、TGF-β對高級別CIN患者術后復發的預測價值。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取2019年1月—2020年6月本院收治的高級別CIN患者223例,年齡24～63歲,平均(31.10±3.52)歲;病程1～5年,平均(3.08±0.98)年。本研究符合《赫爾辛基宣言》并經醫院醫學倫理委員會批準,所有患者均簽署知情同意書。

納入標準:①符合《婦產科學》[6]中關于高級別CIN的診斷標準,且經薄層液基細胞學、宮頸活組織病理學檢查確診;②均首次接受宮頸錐切術治療。排除標準:①有既往宮腔手術史;②合并心腦血管疾病;③合并嚴重臟器功能損傷;④身體其他部位癌變或腫瘤;⑤妊娠期、哺乳期女性;⑥合并免疫缺陷綜合征;⑦合并各種急慢性感染性疾病;⑧合并陰道上皮內瘤變。

1.2 術后復發評估及分組方法

術后每3個月對患者進行1次細胞學檢查,至術后1年時經病理學檢查統計所有患者術后復發情況,根據結果分為復發組與未復發組。

1.3 資料收集

收集兩組患者資料,包括年齡、產次、月經狀況(絕經、未絕經)、是否累及腺體、錐切方式[宮頸冷刀錐切術(cold knife conization,CKC)、宮頸環形電切除術(loop electrosurgical excision of cervix,LEEP)]、切緣狀態(陰性、陽性)。

1.4 IL-17A、鱗狀上皮細胞癌抗原、TGF-β水平測定

取患者術前空腹靜脈血5 mL,3 000 r/min離心10 min,離心半徑為15 cm,分離上層血清,采用酶聯免疫吸附法測定IL-17A、鱗狀上皮細胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCC)水平,采用免疫發光法測定TGF-β水平。

1.5 Hr-HPV病毒載量檢測

術前,采用無菌宮頸刷在宮頸表面順時針刷5圈,將宮頸刷置于含有0.9%無菌氯化鈉溶液的EP管中,適當搖動后,收集1 mL樣本,低溫13 000 r/min離心10 min,去上清,加入50 μL細胞裂解液于100 ℃金屬浴10 min,低溫13 000 r/min離心10 min保留上清,采用第二代雜交捕獲法檢測13種高危型HPV,HPV≥1.0 ng/L為陽性。

1.6 統計學處理法

采用SPSS 25.0軟件進行數據處理。計數資料采用χ2檢驗,計量資料采用獨立樣本t檢驗。Logistic回歸分析血清IL-17A、TGF-β水平與高級別CIN患者術后復發的關系。繪制ROC,并計算曲線下面積(area under the curve,AUC)值,檢驗血清IL-17A、TGF-β預測高級別CIN患者術后復發的價值。AUC值>0.9為預測性能較高,0.71～0.90為預測性能一般,0.5～0.7為預測性能較低,<0.5為預測性能無。采用R4.1.0統計軟件和“rmda”軟件包,以凈受益率為縱坐標,高風險閾值為橫坐標,繪制決策曲線,分析聯合血清IL-17A、TGF-β水平的預測模型預測高級別CIN患者術后復發的價值。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 復發組與未復發組患者資料比較

223例高級別CIN患者經宮頸錐切術后1年復發19例,復發率為8.52%。復發組血清IL-17A、TGF-β水平高于未復發組(P<0.05;表1)。

表1 復發組與未復發組患者資料比較

2.2 Logistic回歸分析結果

將高級別CIN患者術后復發情況作為因變量(1=復發,0=未復發),將基線資料比較差異有統計學意義的變量作為自變量,逐個納入作Logistics回歸分析,后將P條件放寬至<0.2,納入符合條件的變量(IL-17A、TGF-β)作為自變量(均為連續變量),建立多元回歸模型。結果顯示,高級別CIN患者術前高水平血清IL-17A、TGF-β可能是患者術后復發的危險因素(P<0.05;表2)。

表2 Logistic回歸分析結果

2.3 血清IL-17A、TGF-β預測高級別CIN患者術后復發的ROC曲線

將高級別CIN患者術后復發情況作為狀態變量(1=復發,0=未復發),將術前血清IL-17A、TGF-β水平作為檢驗變量,繪制ROC曲線,結果顯示,術前血清IL-17A、TGF-β水平預測高級別CIN患者術后復發風險的AUC均>0.80,預測價值理想(圖1、表3)。

圖1 血清IL-17A、TGF-β預測高級別CIN患者術后復發的ROC曲線圖

表3 血清IL-17A、TGF-β預測高級別CIN患者術后復發ROC結果分析

2.4 血清IL-17A、TGF-β預測高級別CIN患者術后復發的決策曲線

結果顯示,當閾概率為0～0.31或0.62～1時,凈受益率≥0;血清IL-17A與TGF-β聯合預測高級別CIN患者術后復發的凈獲益率優于單獨預測(圖2)。

圖2 血清IL-17A、TGF-β預測高級別CIN患者術后復發的決策曲線圖

3 討 論

董學彩等[7]研究顯示,60例行宮頸錐切術的CIN患者術后2年內有6例復發,復發率為10%。本文223例患者經宮頸錐切術后1年復發19例,復發率為8.52%,與上述結論相似,提示高級別CIN患者術后有較高的復發風險。研究指出,術后復發會增加再次手術時的負擔及宮頸癌發生風險,且會影響患者心理,不利于預后[8]。

研究指出,免疫功能紊亂在CIN的發生、發展過程中有重要作用[9]。Th17為重要炎癥細胞,在機體防御反應和自身免疫性疾病中有重要臨床意義,且與多種感染性、免疫性疾病密切相關[10]。IL-17A是Th17分泌的主要炎癥介質,有趨化中性粒細胞生理效能的作用,還可促使細胞釋放炎癥因子,促進細胞的增殖[11]。研究指出,CIN、宮頸癌患者IL-17A水平顯著高于健康人群[12]。TGF-β是一類調節細胞生長和分化的細胞因子,在細胞的分化、增殖、血管生成中可起到重要作用[13]。當細胞異常增生或惡變時,TGF-β信號通路的組成部分發生改變,通過抑制腫瘤免疫應答、增加細胞外基質數量,從而促進腫瘤血管生成[14]。研究指出,TGF-β在CIN和宮頸癌患者中呈異常過表達[15]。本文結果顯示,復發組血清IL-17A、TGF-β水平高于未復發組,說明術前血清高水平IL-17A、TGF-β與術后復發有關。文獻[16]報道,IL-17A可促進腫瘤壞死因子α、IL-6等導致炎性反應的發生,且隨著CIN級別的升高而加重。術前血清IL-17A過表達進一步釋放炎癥因子,促進細胞增殖,影響宮頸錐切術治療效果,增加術后復發風險[17]。而TGF-β可調節細胞生長、分化及血管形成,參與機體抗腫瘤免疫等,且與CIN的發生發展密切相關[18]。若術前血清TGF-β異常過表達可通過自分泌方式調節細胞生長,增加細胞外基質的產生,為腫瘤的生長和發展提供更好的環境,增加術后復發風險[19]。

為進一步證實血清IL-17A、TGF-β水平與高級別CIN患者術后復發的關系,本文Logistic回歸分析、ROC曲線及決策曲線結果顯示,聯合血清IL-17A、TGF-β水平預測高級別CIN患者術后復發的凈受益率優于單純血清IL-17A或TGF-β。

綜上所述,血清IL-17A、TGF-β水平與高級別CIN患者術后復發有關,且具有一定價值,聯合預測凈受益率更高。