腦膜瘤FASN、HER-2的表達與術后復發的關系

周 龍 田仁富 潘 軻

腦膜瘤是顱內常見的腫瘤，絕大多數為良性，WHO分級1級，手術全切除腫瘤效果良好[1]；而WHO分級2～3 級腦膜瘤（包括非典型腦膜瘤、間變性腦膜瘤），術后復發率顯著高于WHO分級1級腦膜瘤，病死率也更高，尤其是WHO分級3級腦膜瘤[2，3]。脂肪酸合成酶（fatty acid synthase，FASN）為影響細胞脂類代謝的多功能酶，可催化碳水化合物合成脂肪酸，為腫瘤細胞提供能量，促進腫瘤細胞增殖，加速腫瘤生長[4]。人表皮生長因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，HER-2）屬于4種酪氨酸激酶受體蛋白家族之一，主要表達于胚胎發育期，在腫瘤細胞的增殖、分化中具有重要作用，并可通過促進新生血管形成，為腫瘤細胞提供營養，進而促進腫瘤進展[5]。本文探討腦膜瘤組織FASN、HER-2 的表達及其與術后復發的關系。

1 資料與方法

1.1 病例選擇標準納入標準：①腦膜瘤符合《外科學（第8 版）》[6]中診斷標準；②初次確診并接受手術治療；③WHO 分級2～3級[7]。排除標準：①術前接受過腦膜瘤相關治療；②合并其他中樞神經系統腫瘤；③存在凝血功能障礙或血糖控制不穩定；④合并嚴重肝腎功能異常或心肺功能不全；⑤存在嚴重感染或感染急性期；⑥既往顱內手術史；⑦腦膜瘤位于重要功能區，術后可能發生嚴重肢體功能障礙。

1.2 研究對象2017年9月至2020年9月收治符合標準的腦膜瘤121 例，其中男47 例，女74 例；年齡39～60 歲，平均（51.14±3.71）歲；矢狀竇旁31 例，大腦凸面51 例，蝶骨區23 例，其他部位16 例；WHO 分級2級84例，3級37例。

1.3 手術方法全麻下行腦膜瘤切除術。術前根據影像學檢查明確腫瘤位置后，取合適體位，選擇合適的手術入路。術中翻開皮瓣后游離骨瓣，將硬腦膜懸吊在骨窗邊緣；剪開腦膜后，使用超聲刀、雙極電凝切除腫瘤；徹底止血后修補硬腦膜。

1.4 復發判斷標準術后隨訪1 年，期間每3 個月門診復診1 次，每個月電話回訪1 次，復查MRI、CT 等明確腫瘤復發情況。

1.5 免疫組化染色取術中切除的腦膜瘤組織標本，使用10%甲醛液固定后常規石蠟包埋切片；脫蠟、水化進行組織抗原修復，加入內源性過氧化酶阻斷劑室溫孵育10 min；PBS 沖洗3 次，3 min/次；滴加一抗室溫孵育60 min；PBS 沖洗4 次，3 min/次；滴加增強劑室溫孵育20 min；PBS 沖洗3 次，3 min/次；滴加酶標羊抗鼠/兔免疫球蛋白G 聚合物室溫孵育30 min；PBS沖洗3次，3 min/次；加入DAB顯色，顯微鏡下觀察充分顯色后使用自來水沖洗10 min，加入蘇木素復染，使用95%酒精脫水，室溫風干中性樹膠封片。結果判定：①Ki-67 指數：選取10 個高倍視野，計算每個視野100個細胞Ki-67的陽性細胞占比，并取平均值作為Ki-67 指數，以百分率表達。②FASN表達判定：染色強度（0分為無染色，1分為淡黃色，2分為棕黃色，3 分為褐黃色）與陽性細胞率（<50%為1 分，50%～75%為2 分，>75%為3 分）乘積≤1 分為陰性（-），2分為弱陽性（+），3～4分為中等陽性（2+），5～6 分為強陽性（3+）。③HER-2 表達判定：細胞無染色或染色細胞≤10%為陰性（-）；細胞染色>10%、呈不完整的微弱細胞膜染色為弱陽性（+）；細胞染色>10%、呈不完整的中等強度細胞膜染色，或腫瘤染色<10%、腫瘤呈完整的細胞膜染色為中等陽性（2+）；細胞染色>10%，呈完整的強度細胞膜染色為強陽性（3+）。

1.6 血清檢測入院時，采用酶聯免疫吸附試驗法測定血清腫瘤特異性生長因子（Tumor Supplied Group of Factors，TSGF）水平，試劑盒購自廣州科方生物技術股份有限公司。

1.7 統計學分析采用SPSS 25.0軟件處理；正態分布計量資料以±s表示，采用t檢驗和方差分析；計數資料用χ2檢驗；等級資料用秩和檢驗和Kruskal-Wallis H檢驗；采用多因素Cox比例回歸風險模型分析腦膜瘤術后復發的影響因素；P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 術后復發率術后1年，腫瘤復發52例（43.0%）；未復發69例。

2.2 術后復發的危險因素單因素分析顯示，WHO分級、術前血清TSGF水平、腦膜瘤組織Ki-67指數、腦膜瘤FASN和HER-2表達水平與腦膜瘤術后復發有關（P<0.05；表1）。多因素Cox 回歸分析顯示，術前血清TSGF 水平高以及腦膜瘤組織Ki-67、FASN、HER-2 高表達是腦膜瘤術后復發的獨立危險因素（P<0.05；表2）。

表1 腦膜瘤術后復發危險因素的單因素分析

表2 腦膜瘤術后復發危險因素的多因素logistic回歸分析

3 討論

文獻報道，WHO 分級2～3級腦膜瘤術后復發率在35.70%～51.10%[8，9]。本文121例WHO分級2～3級腦膜瘤術后復發率為43.0%，介于上述文獻報道結果之間。這說明WHO 分級2～3 級腦膜瘤術后復發風險高。本文結果顯示術前血清TSGF 水平高以及腦膜瘤組織Ki-67、FASN、HER-2 高表達的腦膜瘤術后復發風險高。

TSGF 與腫瘤的生長、進展有關，在腫瘤發生早期即被釋放至外周血，尤其是神經系統腫瘤[10]。Ki-67為表達于G0期以外細胞的細胞增殖抗原，是臨床公認的腫瘤細胞增殖活性指標，其表達水平與腫瘤細胞組織分化、增殖密切相關，處于增殖周期細胞越多，則Ki-67 表達水平越高，腫瘤增殖能力越強，術后復發風險越高[11]。因此，TSGF、Ki-67高表達腦膜瘤病人術后應加強隨訪。

FASN 是細胞內合成、轉運脂肪酸的關鍵酶，可催化合成內源性脂肪酸為腫瘤細胞的增殖提供能力，是腫瘤細胞生存及惡性變的重要條件[12]。正常情況下，HER-2 在人體胚胎、腺上皮等部位呈低表達，而在子宮內膜癌、前列腺癌、乳腺癌等多種惡性腫瘤中過表達，與腫瘤細胞的增殖、侵襲密切相關[13]。本文結果顯示腦膜瘤術后復發可能受腦膜瘤組織FASN、HER-2 高表達的影響。分析原因：FASN高表達可通過β-氧化過程提供蛋白質脂質修飾，促使脂肪酸合成，為腫瘤細胞提供能量，促使腦膜瘤術后復發[14]；同時，FASN 還能激活酪氨酸激酶生長因子受體，并與其形成自動調節的回路，促進腫瘤發生惡性生物行為，導致腦膜瘤術后復發[15]。Duan 等[16]研究表明，胃癌組織FASN 表達與病人臨床分期、胃壁浸潤及淋巴結、遠處轉移均存在密切關系，進一步說明FASN表達與腫瘤進展有關。HER-2表達升高可結合酪氨酸激酶受體蛋白家族中其他成員形成二聚體，促使有絲分裂活化蛋白激酶激活，通過JAK、PI3K/AKT 等多種信號傳導通路，促進腫瘤細胞增殖、分化，并抑制腫瘤細胞凋亡，進而增加腦膜瘤術后復發風險[17]。此外，HER-2對PI3K/AKT的調控作用，上調血管內皮細胞生長因子水平，促使血管內皮細胞增殖，導致新生血管形成，為腫瘤細胞提供更多的血流供應，增加腦膜瘤術后復發風險[18]。

本文存在一定局限性：首先，本文為單中心研究，未結合其他地區、中心進行驗證；其次，研究對象如未納入WHO分級Ⅰ級腦膜瘤，可能會對研究結果產生一定偏倚；此外，本文納入的樣本量相對較少，而腦膜瘤組織FASN、HER-2表達預測術后復發的意義有待大樣本多中心研究進行進一步驗證。

總之，腦膜瘤術后復發與腦膜瘤組織FASN、HER-2 表達有關。FASN、HER-2 高表達的腦膜瘤病人術后應密切隨訪。