異常糖鏈糖蛋白聯合血清腫瘤標志物對非小細胞肺癌的早期診斷價值

薛漓，丁好，石婧奇

非小細胞肺癌（NSCLC）一般是由肺泡上皮或支氣管黏膜上皮細胞異常增殖后誘發的惡性癌變，在肺癌中占比超過80%，嚴重威脅患者的生命安全［1-2］。目前臨床治療NSCLC 早期患者可通過手術切除病灶，有效延長其生存周期，甚至治愈［3-4］。但由于NSCLC 早期并不具備特有的臨床典型特征，且NSCLC 早期誘發的呼吸系統癥狀極易與肺結核、肺纖維瘤等良性病變混淆，因此提高NSCLC 早期篩選率成為目前改善患者預后的重要研究方向［5-6］。相關研究表明，異常糖鏈糖蛋白（TAP）可在一定程度上反映腫瘤細胞新陳代謝水平［7］。神經元特異性烯醇化酶（NSE）、細胞角蛋白19 片段（CYFRA21-1）、癌胚抗原（CEA）、糖類抗原125（CA125）等血清腫瘤標志物均在NSCLC 患者中檢測異常［8-9］。基于此，為進一步提高NSCLC 患者的早期檢出率，筆者選取NSCLC 患者進行研究，以分析TAP 聯合血清腫瘤標志物對NSCLC 的早期診斷價值，為后續研究提供數據參考。

1 資料與方法

1.1 研究資料

回顧性分析南通市中醫院2019 年1 月至2021 年10 月收治的80 例NSCLC 患者的病歷資料，為NSCLC 組，年齡48～79 歲［（61.54 ± 3.09）歲］；女34 例，男46 例；病理組織分型中鱗癌33 例，腺癌42 例，鱗腺癌及其他5 例；TNM［T（腫瘤原發灶的情況，tumor），N（區域淋巴結受累情況，node），M（遠處轉移，metastasis）］分期中Ⅰ期7 例，Ⅱ期26 例，Ⅲ期34 例，Ⅳ期13 例。納入標準：（1）均符合《中華醫學會肺癌臨床診療指南（2019 版）》［10］中NSCLC 的臨床診斷，且經病理學及影像學等檢查確診；（2）均為首次確診；（3）卡氏評分（KPS）＞60 分；（4）年齡≥18 歲；（5）臨床資料完整。排除標準：（1）合并其他組織或器官惡性癌變；（2）合并心腦血管疾病；（3）肝腎功能嚴重損傷；（4）精神病或嚴重意識障礙；（5）哺乳或妊娠期女性；（6）預計生存期＜6 個月。另選取與NSCLC 組性別、年齡匹配的同期住院的80 例肺部良性病變患者的病歷資料進行對照，年齡18～79 歲［（61.79 ± 3.14）歲］，女31 例，男49 例，均為肺部炎癥患者。患者及其家屬簽署知情同意書，本研究經醫學倫理委員會審批（20220328）。

1.2 方法

1.2.1 病例資料 收集并整理所有受試者的臨床基礎資料，包括性別、年齡、體重指數（BMI）、文化程度、飲酒史、吸煙史、基礎疾病（糖尿病、高血脂、高血壓等）、職業。

1.2.2 血清腫瘤標志物檢測方法 于患者入院第2 天清晨采集其空腹外周靜脈血3～4 ml，離心3 000 r/min（離心半徑13.5 cm）10 min 后取上清，分別采用酶聯免疫法檢測血清NSE（正常值參考范圍：0～17.5 μg/L）、CYFRA21-1（正常值參考范圍：0～3.3 μg/L），雙圄體墉心法檢測CEA（正常值參考范圍：0～5.0 μg/L），酶聯免疫法檢測CA125（正常值參考范圍：0～35.0 μg/L）水平。NSE、CYFRA21-1 試劑盒購自廣州奧瑞達生物科技有限公司，CEA試劑盒購自上海一研生物科技有限公司，CA125 試劑盒購自艾美捷科技有限公司。

1.2.3 TAP 檢測方法 于患者入院第2 天清晨采血，取采集的血液樣本涂片、風干，滴加TAP 檢測試劑后干燥，制得TAP 血液標本，顯微鏡下觀察TAP凝聚物變化，并通過捷達科技病理信息管理系統檢測凝聚物生長面積。

1.2.4 其他實驗室常規指標檢測方法 于患者入院第2 天清晨采血，邁瑞BC-5390CRP 檢測WBC，離子選擇電極法檢測K+、Ca2+、肌氨酸氧化酶法檢測Scr 水平。

1.3 統計學處理

采用SPSS 26.0 統計學軟件進行數據分析。計量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗。計數資料以例數和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。Logistic 多因素回歸分析NSCLC 發病的影響因素，受試者操作特征（ROC）曲線判定血清腫瘤標志物及TAP 對NSCLC 的單一及聯合診斷效能。P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 NSCLC 組與良性病變組患者的血清腫瘤標志物及TAP 水平比較

NSCLC 組患者TAP、NSE、CYFRA21-1、CEA、CA125 水平均高于良性病變組（P＜0.05）。見表1。

表1 NSCLC 組與良性病變組患者的血清腫瘤標志物及TAP 水平比較（± s，每組n=80）

表1 NSCLC 組與良性病變組患者的血清腫瘤標志物及TAP 水平比較（± s，每組n=80）

注：NSCLC 為非小細胞肺癌，TAP 為異常糖鏈糖蛋白，NSE 為神經元特異性烯醇化酶，CYFRA21-1 為細胞角蛋白19 片段，CEA 為癌胚抗原，CA125 為糖類抗原125

組別NSCLC 組良性病變組t 值P 值TAP（μm2）182.53 ± 31.02 80.49 ± 16.34 26.031＜0.001 NSE（μg/L）27.13 ± 2.95 14.24 ± 1.18 36.287＜0.001 CYFRA21-1（μg/L）14.21 ± 2.73 3.27 ± 1.94 29.297＜0.001 CEA（μg/L）17.01 ± 3.49 4.04 ± 2.59 26.693＜0.001 CA125（μg/L）36.29 ± 17.24 17.79 ± 5.03 9.214＜0.001

2.2 影響NSCLC 發病的單因素分析

NSCLC 組與良性病變組患者性別、年齡、BMI、糖尿病史、高血脂史、高血壓史、文化程度、飲酒史及血液WBC、Scr、Ca2+、K+水平比較差異均無統計學意義（P＞0.05）。NSCLC 組吸煙史及從事高油煙或高密度粉塵等相關工作職業所占比例均高于良性病變組（P＜0.05）。見表2。

表2 影響NSCLC 發病的單因素分析（每組n=80）

2.3 影響NSCLC 發病的多因素分析

以發生NSCLC 為因變量（是=1，否=0），2 組存在差異的相關因素為自變量進行賦值，賦值內容見表3。Logistic 多因素回歸分析結果顯示，吸煙史、從事高油煙或高密度粉塵等相關工作及血液TAP、NSE、CYFRA21-1、CEA、CA125 水 平 升 高 均 為NSCLC 發病的影響因素（P＜0.05）。見表4。

表3 自變量賦值

表4 影響NSCLC 發病的多因素分析

2.4 血清腫瘤標志物及TAP 對NSCLC 的診斷效能

ROC 分析顯示，TAP、NSE、CYFRA21-1、CEA、CA125 單一診斷NSCLC Ⅰ～Ⅳ期患者的靈敏度中TAP、NSE 診斷效能較高。見表5。TAP 聯合NSE診斷NSCLC I～Ⅳ期患者的AUC 分別為0.642、0.679、0.774、0.791，4 項血清標志物及TAP 聯合診斷NSCLC 的AUC 分別為0.649、0.683、0.785、0.794。見表6。

表5 血清腫瘤標志物及TAP 對NSCLC 的ROC 診斷

表6 血清腫瘤標志物及TAP 對NSCLC 的聯合診斷分析

3 討論

NSCLC 作為臨床中常見的呼吸系統惡性病變，誘發因素較多，且致病機制復雜，目前臨床中缺乏對NSCLC 中晚期治愈方案，因此提高NSCLC 的早期篩選并且通過手術切除癌變病灶成為有效延長NSCLC 患者生存期的主要研究方向［11-12］。目前，NSCLC 的臨床檢查方法主要包括支氣管鏡檢查、CT或核磁共振（MRI）影像檢查、基因檢測、腫瘤標志物檢測及病理學檢查等多種篩查方案。其中多數學者均認同，病理學檢查是NSCLC 臨床診斷的金標準。但由于病理活檢對患者機體創傷性較高，以致于部分患者配合積極性低，且病理組織活檢培養耗時較長，從而導致部分患者病情持續進展，預后不良［13-14］。而腫瘤標志物檢測作為腫瘤醫學不斷發展的產物，可通過對患者特異性血液指標檢測，提高組織或細胞惡性病變的早期篩查，具有優越的臨床應用效果［15-16］。

本研究中NSCLC 組TAP、NSE、CYFRA21-1、CEA、CA125 水平均高于良性病變組，表明NSCLC患者中TAP、NSE 及CYFRA21-1 表達水平較高。其中TAP 主要是糖基化不完全或由新的糖基轉移酶被激活后誘導生成糖基化。當腫瘤細胞侵襲正常細胞時，可介導機體甲胎蛋白、堿性磷酸酶等蛋白多種糖鏈結構改變，且伴隨腫瘤影響新陳代謝程度的加快，此類物質被過度排放至血液并儲存于外周血液［17-18］。劉哲等［19］研究分析表明，檢測腫瘤細胞代謝過程中，排放至外周血中的糖蛋白的糖鏈結構異常水平，對提高腫瘤細胞的陽性檢出率具有積極意義。因此本研究分析TAP 可用于提高NSCLC的診斷效能。NSE 是一類參與糖酵解途徑的烯醇化酶，主要存在于神經內分泌或神經組織中，血清中含量甚微［20］。但相關研究學者發現［21］，NSCLC 患者血清中NSE 表達異常，且對患者的預后表現出較高的預測效能。CYFRA21-1 是形成上皮細胞的結構蛋白之一，在惡性上皮細胞中激活的蛋白酶加速了細胞的降解，使得大量細胞角蛋白釋放入血，其中可溶性片段可與BM19.21 及KS19.1 等單克隆抗體特異性結合，從而生成CYFRA21-1［22］。既往研究顯示，CYFRA21-1 在肺鱗癌中存在高表達［23］。因此，本研究認為CYFRA21-1 可用于輔助診斷NSCLC。CEA 是一種酸性糖蛋白，在胚胎時由胃腸道、肝、胰腺分泌，成年后血清含量極低，在多種惡性腫瘤中均有升高[24]。CA125 高度糖基化，為上皮細胞頂膜上的外來顆粒和感染因子的潤滑屏障，在卵巢癌、消化道惡性腫瘤中表達增加[25]。CEA 和CA125 在既往研究中常為消化道腫瘤的檢測標志物，但研究顯示在早期肺癌患者中二者同樣存在高表達現象［26］，因此本研究認為CEA 和CA125 可用于輔助診斷早期NSCLC。本研究通過Logistic 多因素回歸分析結果顯示，吸煙史、從事高油煙或高密度粉塵等相關工作及血液TAP、NSE 和CYFRA21-1水平升高均為NSCLC 發病的影響因素。研究表明血液TAP、NSE 及CYFRA21-1 水平與NSCLC 關系密切。此外，煙草也是NSCLC 發病的影響因素，有研究分析煙草點燃后可釋放大量亞硝胺及焦油等致癌物，且伴隨煙齡的增加，可導致肺部對亞硝胺及焦油等致癌物的濾過率降低，從而導致肺癌發生率增高［27］。而從事高油煙或高密度粉塵等相關工作的人群，煤炭、油脂等燃燒產生苯并芘等致癌物，并隨著8 μm 以下的微塵被吸入其肺部，提高了肺癌發病率［28］。本研究ROC 分析顯示，TAP 聯合NSE 診斷NSCLC Ⅰ～Ⅳ期患者和TAP、NSE、CYFRA21-1、CEA、CA125 聯合診斷效能相近，臨床實踐中可優先根據TAP、NSE 聯合診斷結果初步判定NSCLC，并根據診斷結果評估后續臨床診斷中是否進行病理取樣，提高臨床診斷效能且節約經濟成本。

綜上所述，TAP 聯合NSE 診斷Ⅰ～Ⅳ期NSCLC 的診斷效能較高，具有廣闊的臨床應用前景。但介于本研究樣本量受限，后續臨床仍需進一步擴大樣本量證實本研究結論，以推動NSCLC 的臨床診斷研究。