新生兒壞死性小腸結腸炎患兒血清PAF、IL-17的表達及其與臨床預后的關系*

趙緒穩 張同強 王金虎 楊福江 杜曉斌 馬 林 胡 博

天津市兒童醫院(天津大學兒童醫院) 300074

壞死性小腸結腸炎(Necrotizing enterocolitis,NEC)是多種因素引起的腸黏膜缺血缺氧性損傷所致小腸及結腸局部或彌漫性壞死疾病,該病主要發生在新生兒群體[1]。新生兒NEC在發病早期一般無典型的癥狀表現,但是進一步發展可引起腸穿孔及腹膜炎等嚴重并發癥,對新生兒的智力發育造成不良影響,甚至造成患兒死亡,所以對NEC早期診斷及評估有重要的意義[2]。血小板活化因子(Platelet activating factor,PAF)由機體上皮細胞、巨噬細胞、血小板等多種細胞產生,促進血小板聚集及釋放氧自由基、血管的擴張以及增加血管通透性,此外也參與胃腸黏膜損傷以及血栓形成的炎癥反應疾病過程[3]。白細胞介素-17(Interleukin-17,IL-17)是T細胞來源細胞因子,能刺激上皮細胞、內皮細胞、成纖維細胞等,起到致炎的作用。目前,關于PAF與IL-17在新生兒NEC的診斷以及預后評估價值的研究報道較少。本文通過回顧性分析的方式,檢測新生兒NEC血清PAF、IL-17表達水平,探討其在患兒臨床診斷及預后預測中的價值,現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2020年1月—2022年1月醫院新生兒科收治的120例新生兒NEC患兒為實驗組,實驗組患兒納入標準：符合《實用新生兒學》[4]對于NEC的相關診斷標準,均是新生兒病患;無先天性代謝性疾病;患兒臨床資料完整并在納入研究前未用其他方法治療者;患兒家屬知情同意并且簽署同意書。排除標準：消化道畸形的患兒及合并感染的患兒;圍生期缺血疾病的患兒;合并其他感染性疾病的患兒;中途放棄治療出院的患兒。實驗組患兒男71例,女49例;胎齡34～41周,平均胎齡(37.82±1.22)周;早產兒70例,足月兒50例;Bell標準分級：Ⅰ期34例,Ⅱ期62例,Ⅲ期24例。同時選擇在醫院正常出生的105例健康新生兒為對照組。對照組患兒男65例,女40例;胎齡34～41周,平均胎齡(38.01±1.25)周;早產兒58例,足月兒47例。兩組新生兒在性別、年齡資料對比差異無統計學意義(P>0.05)。本次研究經醫院醫學倫理委員會批準同意。

1.2 方法

1.2.1 血清標本檢測：采集新生兒足底靜脈血4ml作為血液標本,注入血液試管中保存,血樣標本置于離心機以3 000r/min速度持續離心15min分離血清,將血清標本置于-80℃低溫下保存待檢。應用雙抗夾心酶聯免疫吸附法測定血清PAF水平,應用酶聯免疫吸附法檢測血清IL-17水平,相關檢測操作均嚴格參照試劑盒說明書進行。

1.2.2 Bell標準分級：Ⅰ期：表現為全身非特異性癥狀以及胃腸道表現,經腹X線檢查顯示腸間隙增寬,腸壁增厚但無腸壁積氣。Ⅱ期：除了Ⅰ期典型征象,還可見腸鳴音消失以及腹痛加重,經X線檢查見腸擴張、腸梗阻,腸壁積氣征或者合并門靜脈積氣表現。Ⅲ期：全身出現進行性惡化情況,表現心動過緩、嚴重呼吸暫停、酸中毒以及彌散型的血管內凝血表現,多伴腹膜炎體征,經X線檢查常見腸穿孔。分析不同分期患兒PAF、IL-17的血清水平。

1.2.3 預后結局：新生兒出生后60d,記錄患兒的生存情況,對實驗組患兒預后情況進行評價,預后良好：患兒獲得全腸道營養支持,或者雖然未達到全腸道營養供應,但是患兒生命體征穩定,出院后的情況良好;預后不良：新生兒在60d死亡。分析PAF、IL-17的血清水平對NEC患兒不良預后的預測價值。

2 結果

2.1 兩組新生兒血清PAF、IL-17水平比較 同對照組的患兒比較,實驗組的患兒血清PAF、IL-17指標水平明顯更高(P<0.05),見表1。

表1 兩組新生兒血清PAF、IL-17水平比較

2.2 實驗組不同Bell分期者血清PAF、IL-17水平 隨著Bell分期的不斷增加,血清PAF、IL-17水平也逐漸升高,Ⅲ期>Ⅱ期>Ⅰ期,兩兩資料比較,差異具有統計學意義(P<0.05),見表2。

表2 不同Bell分期者血清PAF、IL-17水平比較

2.3 血清PAF、IL-17對新生兒NEC的診斷價值 新生兒NEC的臨床診斷,PAF、IL-17單項檢測,在診斷靈敏度、特異性、準確度無明顯的差異,而PAF、IL-17聯合,診斷的靈敏度、特異度、準確度分別為85.36%、85.85%、86.85%,聯合指標的診斷靈敏度與準確度均高于單項檢測,見表3。

表3 血清PAF、IL-17對新生兒NEC的診斷價值分析

2.4 血清PSF-IL-17對預測新生兒NEC不良預后的價值 對患兒的預后進行隨訪,隨訪顯示在實驗組的NEC患兒中,7例患兒在60d存在病死情況,血清PAF、IL-17水平預測新生兒NEC預后不良的AUC面積分別為0.681(0.602～0.753)、0.704(0.626～0.771)。血清PAF≥64.21μg/L預測新生兒NE患兒60d的病死情況,預測的靈敏度、特異度分別是64.25%、94.13%;血清IL-17≥20.81ng/L預測新生兒NEC 60d病死率的靈敏度、特異度分別是74.16%、89.26%。

3 討論

多項研究顯示病原微生物感染以及炎癥反應為新生兒NEC發病的主要原因,多種白細胞介素、白三烯與PAF等炎癥介質參與到新生兒NEC的發生及發展過程[5]。PAF主要是內毒素和細胞因子誘導生成的磷脂介質,這一介質作用主要能提升血管通透性、促進血小板活化及白細胞凝聚,刺激花生四烯酸釋放,對于心臟存在負性激勵的作用[6]。血小板活化因子存在廣泛致血小板聚集作用,可使中性粒細胞聚集以及增加血管通透性。楊紅等[7]的研究中,分析NEC的早產兒在PAF水平的差異,通過ELISA法檢測結果顯示,早產兒NEC的PAF濃度明顯高于健康足月兒血液中PAF的濃度,證實早產兒NEC發病,血液中PAF濃度增高,并且反映了PAF在病理情況下參與到NEC的發病中。孫子梅等[8]研究結果顯示同對照組的大鼠比較,NEC模型組大鼠腸組織PAF水平升高。這些研究證實了PAF在NEC的發生發展中起到一定的作用。本文結果顯示,實驗組的患兒在血清PAF水平顯著高于對照組,同時實驗組患兒隨著Bell分期的增加,血清PAF水平也升高,差異顯著,證實PAF對于早期診斷新生兒NEC有積極作用。PAF作為可促進血管擴張及參與胃腸黏膜損傷的物質,PAF通過缺氧及內毒素協同作用誘發腸壞死,此外PAF可引發腸上皮細胞中EE-鈣粘連素絡氨酸磷酸化,增加腸黏膜通透性,促進細菌內毒素進入腸上皮細胞,導致炎癥介質失控性分泌,進而誘發NEC[9]。IL-17是重要的細胞因子,在宿主防御、自身免疫疾病發病以及腫瘤中起到重要作用,相關研究也漸漸成為醫學、免疫學研究熱點內容,IL-17可推動自身免疫性疾病的炎癥病變,這些細胞因子同新生兒NEC發病存在一定的聯系[10]。本文顯示,實驗組IL-17水平高于對照組,并且隨著Bell分期的增加,IL-17水平升高。

本文中,PAF、IL-17聯合檢測在診斷新生兒NEC的敏感度與準確度方面高于單項監測,AUC值為0.821。此外新生兒NEC若是處理不及時也可出現不良預后情況,主要不良預后為死亡,本次納入實驗組的120例患兒,出生后60d的病死例數7例,血清PAF、IL-17對于預測新生兒NEC患兒60d病死率,敏感度分別為64.25%、74.16%,特異度則是分別為94.13%、89.26%,提示檢測血清PAF與IL-17對于新生兒NEC預后的預測有一定的價值,為臨床預防提供科學參考借鑒。

綜上所述,血清PAF、IL-17檢測在新生兒NEC的診斷以及預后評估中有積極作用,并能預測患兒病情嚴重程度,可作為患兒診療及干預的重要參照指標。