急性期抑郁癥患者外周血S100A8、S100A9、Treg細胞水平與抗抑郁藥療效的關聯性

王繼軒, 張 恩, 夏 仲

(蕪湖市第四人民醫院1精神科, 2醫務科, 安徽 蕪湖 241002)

抑郁癥是一種常見的精神疾病,會導致患者持續性的抑郁情緒、思維障礙,嚴重者會產生自殺念頭與行為[1]。根據WHO報道顯示,到2030年抑郁癥將成為影響全球人類健康的重要疾病,對經濟和社會造成嚴重負擔[2]。當前臨床使用的抗抑郁藥劑量大、療效低、副作用多,對患者造成心理與經濟負擔,探索新的抑郁癥診斷與治療的生物標志物對臨床治療有重要現實意義。S100鈣結合蛋白A8(S100 calcium binding protein A8,S100A8)與S100鈣結合蛋白A9(S100 calcium binding protein A9,S100A9)是S100蛋白家族的重要成員,在急性炎癥中研究廣泛,能夠作為急性中耳炎的有效診斷指標[3]。最新研究表明,抑郁癥產生可能與炎癥激活有關,急性炎癥反應可能會導致抑郁樣行為與癥狀出現[4]。此外也有研究顯示,S100A8和S100A9能夠作為系統性紅斑狼瘡的炎性標志物,且S100A8和S100A9在合并抑郁和認知障礙的系統性紅斑狼瘡患者中表達更強[5]。調節性T細胞(Regulatory T cells,Treg)是一類具有顯著免疫抑制作用的,以表達Foxp3、CD25、CD4為細胞表型特征的T細胞亞群,具有調節機體免疫穩態及抗炎的作用[6]。本研究采用ELISA和流式細胞術對抑郁癥患者S100A8、S100A9、Treg細胞與治療效果的關系進行探討,為急性期抑郁癥的臨床治療提供新的生物標志物。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2019年7月-2020年7月在蕪湖市第四人民醫院精神科收治的51例抑郁癥患者為研究組,其中男性28例,女性23例,患者年齡22～41歲,平均年齡30.15歲。納入標準:(1)符合中國精神障礙分類方案與診斷標準[7]中關于抑郁障礙的診斷標準;(2)由兩位中高級精神科醫生根據病史、表現癥狀、體格檢查、國際神經精神科簡式訪談問卷證實診斷;(3)17項漢密爾頓抑郁量表(HAMD-17)[8]總分>17分;(4)本次病情發作未經藥物治療(連續服用某種抗抑郁藥物≥6周)。排除標準:(1)有其他精神病史;(2)有藥物濫用史;(3)妊娠期或哺乳期婦女;(4)合并有其他嚴重軀體性疾病;(5)有嚴重自殺傾向,HAMD-17自殺條目中評分≥3分。選取同期34例體檢健康志愿者為對照組,其中男性14例,女性20例,患者年齡20～40歲,平均年齡29.34歲。抑郁自評量表得分<53分,臨床訪談無精神類疾病,無精神疾病家族史。本研究通過蕪湖市第四人民醫院醫學倫理委員會批準,兩組受試者或監護人均簽署知情同意書。

1.2 儀器與試劑S100A8和S100A9 ELISA檢測試劑盒(武漢優爾生商貿有限公司,USCN);IL-6酶聯免疫吸附試劑盒(上海原鑫生物科技有限公司,YX-EIL6A);IL-10酶聯免疫吸附試劑盒(上海原鑫生物科技有限公司,YX-E10155);酶標儀(美國BioTech公司)。

1.3 治療及分組方法研究組患者入組后接受傳統抗抑郁藥物治療,藥物選擇艾司西酞普蘭,起始劑量為5 mg/d,2周內加至最大劑量10～20 mg/d 治療12周[9]。治療周期結束后進行HAMD-17評分,計算治療前后HAMD-17減分率,減分率≥50%的患者歸為治療應答組,<50%的患者歸為治療無應答組。

1.4 指標的測定

1.4.1 在抑郁癥小鼠中表達上調基因的篩選 采用美國國立生物技術信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)的GEO版塊(https://www.ncbi.nlm.nih.gov)檢索抑郁癥基因表達芯片GSE151807,該數據芯片中包含正常小鼠與抑郁癥模型小鼠腦部各組織(杏仁核、前額葉皮層、大腦皮質)的基因表達數據,利用GEO2R在線完成差異表達分析,篩選在抑郁癥中表達上調的基因,條件為logFC≥2,adj.P.Val<0.05。

1.4.2 S100A8、S100A9、IL-6、IL-10指標的測定 于治療前及治療結束后收集3 mL受試者晨起空腹肘部靜脈血離心提取血清進行S100A8、S100A9、IL-6、IL-10水平檢測。嚴格按照試劑盒說明書操作,采用酶聯免疫吸附試驗法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測血清S100A8、S100A9、IL-6、IL-10水平。

1.5 統計學處理采用SPSS23.0統計學軟件進行數據分析,計量資料以均數±標準差表示,兩組數據比較計量資料使用Student′st檢驗,計數資料以例(%)表示,采用χ2檢驗。采用受試者工作特征曲線(Receiver operating characteristic curve,ROC曲線)分析S100A8、S100A9水平、Treg細胞對診斷抑郁癥及分析治療效果的敏感性,經Logistic回歸分析探討影響抑郁癥患者治療效果的臨床指標,以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 生信分析結果對GEO數據庫中名為GSE151807的數據芯片進行分析,該數據芯片中包含正常小鼠與抑郁癥模型小鼠腦部各組織(杏仁核、前額葉皮層、大腦皮質)的基因表達數據,篩選在抑郁癥模型小鼠腦部組織中表達上調的基因,對腦組織的3個部位上調基因進行交叉分析,在3個部位中,S100A8與S100A9為共同上調表達的基因,見圖1。

圖1 在抑郁癥小鼠腦部杏仁核、前額葉皮層、

2.2 對照組與研究組臨床指標對比與對照組相比,研究組年齡、性別、BMI、IL-6水平、IL-10水平,差異無統計學意義(P均>0.05)。與對照組相比,研究組有患病家族史的比例、血清S100A8水平、S100A9水平、Treg細胞水平顯著升高,差異有統計學意義(P均<0.05),見表1。

表1 對照組與研究組臨床指標對比

2.3 治療應答組與無應答組臨床指標對比治療后30例患者有應答,21例患者無應答。與無應答組相比,應答組年齡、性別、家族史、是否首次發病、總病程和治療前HAMD-17評分差異無統計學意義(P均>0.05)。與無應答組相比,應答組的治療前、后S100A8、S100A9水平、Treg細胞比例及治療后HAMD-17評分顯著降低,差異有統計學意義(P均<0.05),見表2。

表2 治療應答組與無應答組臨床指標對比

2.4 應答組S100A8、S100A9、Treg細胞水平對抗抑郁效果的評估價值應答組治療后S100A8、S100A9、Treg細胞水平降低幅度評估對抑郁的治療效果,ROC曲線分析結果顯示,S100A8、S100A9水平、Treg細胞水平降低幅度對于抑郁的治療效果具有一定評估價值,且三者聯合的評估效能高于各指標單獨評估(P均<0.05),見表3。

表3 S100A8、S100A9水平、Treg細胞(%)敏感性分析

2.5 影響治療效果的多因素分析將治療應答作為因變量,將單因素分析中有統計學意義的變量作為自變量,進行多因素Logistic回歸分析,結果顯示治療前后S100A8、S100A9、Treg細胞水平降低幅度是影響抑郁癥患者治療效果的獨立影響因素(P均<0.05),見表4。

表4 Logistic多因素回歸分析

3 討論

本研究首先對健康對照與抑郁患者進行分析,結果顯示相較于健康對照組,抑郁患者外周血中S100A8、S100A9、Treg細胞水平均顯著升高。S100A8、S100A9在細胞促炎反應中發揮重要作用,可促進白細胞粘附、聚集和遷移及增強局部炎癥微環境[5]。Treg細胞是具有調節炎癥因子功能的CD4 +T淋巴細胞亞群,已被證實是抑郁癥常見的治療靶點[10]。但Treg細胞在抑郁癥中的作用備受爭議,有報道顯示慢性應激所致抑郁大鼠的Treg細胞水平降低,可能影響機體的免疫功能[11],但另有報道顯示抑郁癥患者Treg細胞明顯高于健康對照組[12]。

經典抗抑郁藥療效差、起效遲、副作用多,研究顯示可能與患者精神疾病家族史、發病次數、病程等相關[13],另有研究發現抗抑郁藥療效差也與患者基因遺傳等顯著相關[14]。本研究對患者進行12周抗抑郁治療,治療結束后發現外周血中S100A8、S100A9、Treg細胞水平有所降低,有研究指出經過治療后的大鼠抑郁樣行為減弱,且S100A9表達水平顯著下調,這也與本研究結果相一致[15]。應答組中治療前后血清S100A8、S100A9水平、Treg細胞的降低幅度顯著大于無應答組患者。ROC曲線分析結果顯示血清S100A8、S100A9水平、Treg細胞水平降低幅度對抑郁的治療效果具有一定的評估價值,三者聯合評估效能高于各指標單獨評估。有研究[16]顯示,S100A8、S100A9與多種腫瘤的化療療效有關,可作為預測腫瘤化療療效的標志物。凌園果等[17]的研究表明,S100A8和S100A9在腦膜炎、阿爾茨海默病、癲癇和腦動脈瘤等神經系統疾病中異常表達。S100A8和S100A9水平的升高與神經系統疾病的診斷和預后相關,是神經系統疾病新的生物標志物和治療靶點。此外,有報道稱抑郁癥患者經SSRIs類藥物治療后,外周血Treg細胞水平的降低預示抗抑郁療效較好[18]。本研究對影響抗抑郁治療療效的臨床指標進行采用Logistic回歸分析,結果發現S100A8、S100A9、Treg細胞水平降低幅度是影響抗抑郁治療療效的獨立預測因子,S100A8、S100A9、Treg細胞預測治療應答效果具有較高敏感性。本研究對象均來自同一家醫院,且樣本量較小,選擇偏倚不可避免,后續需進一步擴大樣本量。

綜上所述,本研究發現S100A8、S100A9與抗抑郁治療療效有顯著關聯,并且對受爭議的Treg細胞作進一步驗證,發現以上3個指標的降低均能提示抗抑郁治療療效較好,應用于臨床還需大量樣本進行臨床研究。本研究為臨床治療抑郁癥提供新的靶向分子標志物,為個體化抗抑郁治療奠定基礎。