基于TLR4/NF-κB信號通路探討肅金方治療感染后咳嗽風(fēng)邪犯肺證臨床效果及機制

馬 真,張曉陽,楊久清,鄧敬華,王玉棟

感染后咳嗽是臨床常見呼吸系統(tǒng)疾病,主要由上呼吸道感染引起,屬于亞急性咳嗽,指急性期感染得到控制后,咳嗽仍可持續(xù)3～8周,且肺部檢查無陽性特征,雖為小恙,卻頗難治愈[1-2]。現(xiàn)感染后咳嗽的致病機制尚未明確,但普遍認(rèn)為與氣道炎癥、氣道黏膜損傷有關(guān)[3-4]。有研究證實,TOLL樣受體4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信號通路的過度表達(dá)可引起炎癥反應(yīng),對感染后咳嗽患者病情診斷具有較高敏感性[5]。目前,西醫(yī)主要使用中樞性鎮(zhèn)咳藥、糖皮質(zhì)激素和抗組胺H1受體拮抗劑等治療感染后咳嗽,但此類藥物長期使用患者易產(chǎn)生耐受性,且不良反應(yīng)較多。中醫(yī)將感染后咳嗽歸為“外感咳嗽”范疇,并認(rèn)為肺為嬌臟,與天氣直接相通,外感風(fēng)邪,伏于肺絡(luò),肺失宣降,則肺氣上逆,故而發(fā)病[6]。鑒于此,本研究在治療上從宣肺化痰、疏風(fēng)散寒、滋陰補氣入手,基于TLR4/NF-κB信號通路深入挖掘我院中醫(yī)師經(jīng)驗用方肅金方治療感染后咳嗽風(fēng)邪犯肺證臨床效果及機制,現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年5月—2022年6月來我院就診符合中西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)[7-8]的感染后咳嗽100例,按治療方案不同將其分為聯(lián)合組和常規(guī)組2組各50例。2組性別、年齡和病程等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),見表1,具有可比性。

表1 2組感染后咳嗽一般資料比較

1.2 治療方法

常規(guī)組采用常規(guī)藥物治療,給予二氧丙嗪片(國藥準(zhǔn)字H14020610,山西國潤制藥有限公司)每次5 mg,每日3次口服;肺力咳膠囊(國藥準(zhǔn)字Z20025240,貴州健興藥業(yè)有限公司)每次0.9 g,每日3次口服。根據(jù)患者臨床癥狀,可適當(dāng)增減藥物劑量。聯(lián)合組采用肅金方聯(lián)合常規(guī)藥物治療。常規(guī)藥物治療方法等同常規(guī)組。肅金方處方組成:蜜枇杷葉20 g,蟬蛻8 g,紫菀10 g,白前15 g,僵蠶10 g,烏梅15 g,前胡20 g,荊芥10 g,蘆根30 g,射干15 g,橘紅10 g,防風(fēng)15 g,牛蒡子10 g,細(xì)辛3 g,五味子10 g,甘草10 g。隨癥加減:咽干加麥冬12 g;痰多加浙貝15 g;咽痛加黃芩20 g;咽癢加木蝴蝶3 g;大便發(fā)干加炒卜子15 g,瓜蔞30 g,枳實10 g。涼水浸泡1 h后,急火煎開,改慢火煎25 min,將濾液濾出,復(fù)加水再煎,二煎混合,分溫再服,每日1劑,緩慢服藥使藥液浸潤咽喉部。2組均連續(xù)治療2周。

1.3 觀察指標(biāo)

治療前、治療1周后和治療2周后評價比較2組中醫(yī)證候積分、咳嗽癥狀積分、生活質(zhì)量和TLR4/NF-κB信號通路相關(guān)指標(biāo)。中醫(yī)證候積分參照《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》[9]中咳嗽的臨床表現(xiàn),將主癥咳嗽、咽干、咽癢按嚴(yán)重程度分別計0、2、4、6分,次癥咳痰按嚴(yán)重程度計0、1、2、3分,分值越高表明相應(yīng)癥狀越嚴(yán)重。咳嗽癥狀積分由患者據(jù)自身24 h的咳嗽癥狀進(jìn)行計分,日間和夜間咳嗽分值范圍均為0～5分,分值越高表明咳嗽越劇烈,總分=日間評分+夜間評分。采用中文版萊徹斯特咳嗽生活質(zhì)量問卷(LCQ)評價患者生活質(zhì)量,該問卷包括心理問題(7項)、生理問題(8項)和社會問題(4項)3個維度,19個評價因子,總分與生活質(zhì)量呈正相關(guān)。抽取2組清晨空腹靜脈血3～5 mL,在4 ℃溫度條件下高速離心15 min(3000 r/min),取上清液,應(yīng)用F.A.M.E.24/30型酶標(biāo)儀(瑞士哈美頓公司)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測TLR4、NF-κB、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)。

治療2周后,評價比較2組臨床效果。參照中醫(yī)癥候積分對2組臨床療效進(jìn)行評價比較。療效指數(shù)=(治療前分?jǐn)?shù)-治療后分?jǐn)?shù))/治療前分?jǐn)?shù)×100%。總有效率=(治愈+顯效+有效)/總例數(shù)×100%[10]。觀察比較2組治療期間不良反應(yīng),包括便秘和口干等。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 中醫(yī)證候積分比較

2組組內(nèi)不同時間咳嗽、咽干、咽癢和咳痰積分總體比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。治療1和2周后,咳嗽、咽干、咽癢和咳痰積分2組均低于治療前,且聯(lián)合組低于常規(guī)組(P<0.05)。見表2。

表2 2組感染后咳嗽不同時間點中醫(yī)證候積分比較分)

2.2 咳嗽癥狀積分和LCQ評分比較

2組組內(nèi)不同時間咳嗽癥狀積分和LCQ評分總體比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。治療1和2周后,咳嗽日間和夜間積分2組均低于治療前,且聯(lián)合組低于常規(guī)組;LCQ評分2組均高于治療前,且聯(lián)合組高于常規(guī)組(P<0.05)。見表3。

表3 2組感染后咳嗽不同時間點咳嗽癥狀積分和LCQ評分比較分)

2.3 TLR4/NF-κB信號通路相關(guān)指標(biāo)比較

2組組內(nèi)不同時間TLR4/NF-κB信號通路相關(guān)指標(biāo)總體比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。治療1和2周后,TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6 2組低于治療前,且聯(lián)合組低于常規(guī)組(P<0.05)。見表4。

表4 2組感染后咳嗽不同時間點TLR4/NF-κB信號通路相關(guān)指標(biāo)比較

2.4 臨床療效比較

治療2周后,總有效率聯(lián)合組高于常規(guī)組(P<0.01),見表5。

表5 2組感染后咳嗽治療2周后臨床效果比較[例(%)]

2.5 不良反應(yīng)比較

治療期間,聯(lián)合組出現(xiàn)口干1例,常規(guī)組出現(xiàn)便秘2例,口干1例,2組不良反應(yīng)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

3 討論

《景岳全書·咳嗽篇》中記載:“咳證雖多,無非肺病”,可見咳嗽與肺關(guān)系密切[11]。我院王玉棟主任根據(jù)感染后咳嗽“風(fēng)、寒、燥、痰”等病理因素,結(jié)合“風(fēng)為百病之長”“風(fēng)盛則動,風(fēng)盛則痙急”的論述,提出“風(fēng)邪”是感染后咳嗽主要病因。外風(fēng)侵襲肌表,而風(fēng)邪為六淫之首,邪氣由皮毛或口鼻而入,伏于肺腑,遏阻肺氣,外邪滯留,久而不去,日久而肺氣不宣,氣機上犯咽喉,故而咳;且風(fēng)性主動,善行而數(shù)變,風(fēng)盛則癢,癢咳難止,寒熱之象不顯,故治則應(yīng)以清咽利喉、疏風(fēng)宣肺為主[12-13]。

肅金方為我院協(xié)定處方,強調(diào)辨證施治,主要由蟬蛻、僵蠶、前胡、橘紅、紫菀、白前、烏梅、荊芥、蜜枇杷葉和防風(fēng)等藥物組成,可隨癥加減。方中僵蠶、蟬蛻皆為蟲類,善走竄,性剽悍,可止咳解痙,祛風(fēng)止癢;前胡苦泄辛散微寒,能散風(fēng)清熱,降氣化痰;紫菀辛散苦降溫潤,可潤肺下氣,消痰止咳;白前祛痰止咳;烏梅斂肺生津;蜜枇杷葉化痰止咳;荊芥微溫不燥,辛而不烈,疏風(fēng)止痙,散邪開郁;蘆根味甘性寒,可清熱瀉火,生津止渴;射干性寒微毒,主治咳嗽氣喘,咽喉腫痛;橘紅燥濕化痰;防風(fēng)疏風(fēng)解表,祛風(fēng)解痙;牛蒡子疏風(fēng)散熱,宣肺利咽;細(xì)辛祛風(fēng)散寒;五味子鎮(zhèn)咳祛痰;甘草不僅能潤肺止咳,還可益氣補中,調(diào)和諸藥[14-16]。縱觀此方藥性平和,既無大辛大熱,又無大苦大寒之品,契合感染后咳嗽的病機,可共奏肅肺止咳、疏風(fēng)清咽之功效。現(xiàn)代藥理學(xué)研究證實,蟬蛻中含有多種微量元素和氨基酸,有鎮(zhèn)靜和抗炎等作用;荊芥中的荊芥內(nèi)酯、桂皮酸等成分能抑菌、抗炎、抗病毒;枇杷葉、甘草等具有止咳、抗氧化,提高機體免疫力等作用;烏梅可改善微循環(huán)、擴(kuò)張血管,有利于調(diào)節(jié)免疫功能[17-19]。本研究結(jié)果顯示,治療1和2周后,咳嗽、咽干、咽癢、咳痰積分和咳嗽日間、夜間積分聯(lián)合組低于常規(guī)組,LCQ評分聯(lián)合組高于常規(guī)組;治療2周后,總有效率聯(lián)合組高于常規(guī)組。說明與常規(guī)藥物治療相比,肅金方聯(lián)合常規(guī)藥物治療感染后咳嗽患者可明顯改善臨床癥狀,提升生活質(zhì)量,提高臨床效果。分析其原因為肅金方遵循“陽者陰之,上者下之”原則,以肅肺止咳為主,有效緩解了風(fēng)邪犯肺之證。此外,本研究結(jié)果顯示,治療期間2組不良反應(yīng)發(fā)生率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,且2組出現(xiàn)的不良反應(yīng)均較輕微,不影響日常生活工作,說明肅金方聯(lián)合常規(guī)藥物治療感染后咳嗽患者安全性較好。

既往研究顯示,TLR4/NF-κB信號通路在氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)等過程中發(fā)揮重要作用[20]。病原體侵入呼吸道后可激活機體免疫-炎癥信號通路,間接激活氣道感覺神經(jīng),增強氣道高反應(yīng)性,還可釋放大量炎性介質(zhì),損傷氣道黏膜上皮細(xì)胞。TLR4是跨細(xì)胞膜受體蛋白,廣泛存在于組織細(xì)胞中,可特異性識別損傷相關(guān)分子模式與病原體相關(guān)分子模式,能激活NF-κB導(dǎo)致免疫調(diào)節(jié)和炎癥的基因轉(zhuǎn)錄,引起下游信號通路的級聯(lián)反應(yīng),從而促進(jìn)IL-6和TNF-α等炎性因子大量釋放,參與氣道炎癥的進(jìn)展[21-22]。本研究結(jié)果顯示,治療1和2周后,TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-6聯(lián)合組低于常規(guī)組,表明肅金方聯(lián)合常規(guī)藥物治療感染后咳嗽患者能抑制炎性因子分泌,分析原因可能與肅金方能調(diào)控TLR4/NF-κB信號通路有關(guān)。賈璐等[23]通過小鼠實驗發(fā)現(xiàn),五味子中的五味子乙素能通過抑制TLR4/NF-κB信號通路,發(fā)揮免疫和抗炎作用,本研究結(jié)論與其一致。

綜上所述,肅金方聯(lián)合常規(guī)藥物治療感染后咳嗽風(fēng)邪犯肺證患者效果良好,可改善臨床癥狀,抑制炎性因子表達(dá),提高生活質(zhì)量,且安全性好;分析原因可能與肅金方能調(diào)控TLR4/NF-κB信號通路有關(guān)。然而,本研究因時間、經(jīng)費有限,未能開展臨床試驗研究,今后研究需結(jié)合藥理學(xué)、藥效學(xué)及動物實驗等進(jìn)一步闡明本研究結(jié)論的作用機制,從而為臨床治療感染后咳嗽提供新思路。