CXCL5基因多態性對多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎及碳青霉烯類藥物敏感性的影響*

劉啟波,麥東媚△,譚俊青,李曉君,蔡棟昊

廣東省第二中醫院:1.檢驗科;2.感染管理科,廣東廣州 510095

醫院獲得性肺炎是臨床中的常見病癥,是發生在肺泡、終末氣道或肺間質的炎性病變[1]。由于社會老齡人口增多、病原體診斷難度增大等因素,醫院獲得性肺炎的患病群體及肺炎相關死亡人數呈持續增長趨勢[2]。鮑曼不動桿菌廣泛存在于自然環境與醫院環境中,生存要求極低,可定植于人體的呼吸道、消化道或皮膚表層等,對常規消毒制劑或紫外線抵抗力較強,是國內醫院感染最常見的致病菌之一[3]。既往研究發現,鮑曼不動桿菌以多重耐藥鮑曼不動桿菌較為多見,其耐藥譜持續擴大、感染率及耐藥率逐年升高[4-5]。有研究報道,多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎患者發病率為1.3%～3.4%,病死率為33.1%,患者住院時間較長,治療費用高,如何預防和減少其發生是世界性的公共衛生問題。對多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎患者的病情嚴重程度及預后進行有效評估一直是急需解決的難題。CXC類趨化因子配體5(CXCL5)與其受體CXC類趨化因子受體2(CXCR2)結合可以對嗜中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞等多種免疫細胞發揮趨化作用,促進炎癥反應的啟動和進展[7]。本研究旨在探討CXCL5基因多態性對多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎及碳青霉烯類藥物敏感性的影響,為多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎的臨床治療及預防提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 將2020年7月至2022年7月于本院被明確診斷為多重耐藥鮑曼不動桿菌感染肺炎的121例患者納入研究作為患者組,年齡(56.38±17.15)歲,男65例、女56例。納入標準:痰培養連續2次以上為多重耐藥鮑曼不動桿菌陽性且影像學結果表現異常,根據中華醫學會呼吸病學分會醫院獲得性肺炎的診斷標準,確診為醫院獲得性多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎患者。排除標準:(1)入院24 h內死亡或自動出院;(2)伴嚴重軀體性疾病;(3)合并其他精神疾病或有嚴重自殺傾向。根據臨床醫生對患者病情的診斷,將患者又分為輕癥組(36例)、中癥組(66例)、重癥組(19例)。另外將同期121例體檢健康者作為對照組,年齡(57.15±18.11)歲,男70例、女51例。各組年齡、性別比較,差異均無統計學意義(P>0.05),具有可比性。所有納入研究者均對本研究知情同意并簽署知情同意書。本研究已獲得本院倫理委員會批準。

1.2方法

1.2.1單核苷酸多態性位點(SNP)基因分型 在HapMap數據庫中選取中國漢族人群的SNP中的CXCL5基因相關位點,即rs352046和rs425535。提取患者DNA,通過毛細管電泳(采用ABI 3730XL測序儀進行,上海興曼生物科技有限公司)及SNaPshot片段分析技術(MG-012型SNaPshot法基因型儀,天津邁基生物科技有限公司)對2個SNP位點進行基因分型。

1.2.2藥敏試驗及炎癥指標的檢測 對納入研究患者的痰液標本進行痰液分離菌株的菌種鑒定,應用梅里埃公司生產的VITEK2-Compact全自動微生物分析儀進行檢測,根據2019版CLSI標準評估藥敏試驗結果。炎癥指標使用邁瑞7500血細胞分析儀與雅培I2000微粒子化學發光儀進行檢測。

2 結 果

2.1CXCL5基因位點的基因型及等位基因比較 將對照組和患者組患者CXCL5基因的rs352046及rs425535位點進行比較,rs352046位點的基因型及等位基因分布差異無統計學意義(P>0.05),rs425535位點的基因型及等位基因分布差異均有統計學意義(P<0.05),患者組A等位基因、GA基因型比例高于對照組,G等位基因、GG基因型比例低于對照組,差異均有統計學意義(P<0.05),見表1、2。

表1 對照組和患者組間CXCL5基因rs352046位點的等位基因、基因型分布比較(n)

表2 對照組和患者組間CXCL5基因rs425535位點的等位基因、基因型分布比較(n)

2.2CXCL5基因rs352046、rs425535位點的基因型與炎癥指標的關系 rs352046位點的基因型與患者的白細胞計數無關(P>0.05),而與中性粒細胞、淋巴細胞、C反應蛋白、降鈣素原水平有關(P<0.05),GG基因型的患者上述4項指標水平明顯低于GC及CC基因型的患者。rs425535位點的基因型與患者白細胞計數無關(P>0.05),而與中性粒細胞、淋巴細胞、C反應蛋白與降鈣素原水平有關(P<0.05),GG基因型的患者上述4項指標水平明顯低于GA及AA基因型的患者,差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 CXCL5基因rs352046、rs425535位點基因型與炎癥指標的關系

2.3CXCL5基因rs352046、rs425535位點等位基因和基因型分布與肺炎嚴重程度的關系 CXCL5基因rs352046位點基因型及等位基因分布情況與患者肺炎嚴重程度無關(P>0.05),而CXCL5基因rs425535位點基因型及等位基因分布情況與患者肺炎嚴重程度有關(P<0.05),見表4、5。

表4 不同嚴重程度肺炎患者CXCL5基因rs352046位點的基因型與等位基因分布比較(n)

表5 不同嚴重程度肺炎患者CXCL5基因rs425535位點的基因型與等位基因分布比較(n)

2.4CXCL5基因多態性與碳青霉烯類藥物敏感性的關系 121例多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎患者中,102例患者對耐碳青霉烯類藥物的敏感性較高(敏感組),19例對這類藥物不敏感(不敏感組)。兩組CXCL5基因rs425535位點的基因型及等位基因分布比較,差異有統計學意義(P<0.05),見表6。

表6 CXCL5基因位點的基因型與等位基因(n)

3 討 論

醫院獲得性肺炎占醫院感染的29.6%～32.7%,病死率為22.3%～33.2%[8],發病率約為9%[9]。醫院獲得性肺炎的病原菌中,多重耐藥鮑曼不動桿菌感染率居首位。若患者的免疫系統紊亂或臟器功能受損,多重耐藥鮑曼不動桿菌的易感性明顯增加,易誘發肺炎、手術切口部位感染、泌尿系統感染、導管相關感染等各種醫院感染。廣譜抗菌藥物的廣泛使用導致多重耐藥鮑曼不動桿菌對目前臨床常用的抗菌藥物的敏感性明顯降低[10-11]。一項對國內16家醫院的細菌耐藥性通過細菌耐藥監測網進行監測結果發現,10 120株鮑曼不動桿菌菌株中多重耐藥鮑曼不動桿菌的比例高達89.2%,多重耐藥鮑曼不動桿菌對常用抗菌藥物的耐藥率可達36.4%～2.8%[12]?？梢?多重耐藥鮑曼不動桿菌相關肺炎仍是公共衛生事件中棘手的問題。趨化因子在炎癥細胞向炎癥組織部位轉運的過程中發揮調節作用,CXCL5作為關鍵的趨化因子之一,可以誘導、維持、擴大炎癥反應或免疫反應以促進炎癥進展[13]。因此,探究CXCL5基因與肺炎多重耐藥鮑曼不動桿菌感染及碳青霉烯類藥物敏感性之間的關系具有重要意義。

本研究將兩組患者CXCL5基因的rs352046、rs425535位點進行比較,結果顯示,兩組CXCL5基因的rs352046位點的基因型及等位基因分布比較,差異無統計學意義(P>0.05);兩組CXCL5基因rs425535位點的基因型及等位基因分布比較,差異有統計學意義(P<0.05),患者組A等位基因、GA基因型比例高于對照組,G等位基因、GG基因型低于對照組,表明CXCL5基因rs425535位點的多態性與多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎的發生風險相關。既往有研究報道CXCL5基因多態性與肺炎鏈球菌感染的發生緊密相關[14]。趨化因子是一種低相對分子質量的蛋白質,在炎癥反應與免疫應答的初期與靶細胞膜上特異性受體相互作用,促使白細胞、粒細胞、NK細胞等在炎癥部位聚集,對人體的炎癥反應、免疫反應、組織修復和造血中發揮重要調節作用[15]。

本研究將CXCL5基因rs352046、rs425535位點基因型分布與多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎患者炎癥指標的關系進行分析。結果顯示,rs352046位點的基因型和等位基因分布與患者白細胞計數無關,而與中性粒細胞、淋巴細胞、C反應蛋白與降鈣素原水平有關,GG基因型患者上述4項指標水平明顯低于GC及CC基因型患者。CXCL5基因rs425535位點基因型分布與患者白細胞計數無關,而與中性粒細胞、淋巴細胞、C反應蛋白與降鈣素原有關,GG基因型患者上述4項指標水平明顯低于GA及AA基因型。趨化因子CXCL5多態性位點基因型的改變導致中性粒細胞、淋巴細胞、C反應蛋白與降鈣素原水平的升高。在既往探究CXCL5基因多態性與感染性疾病之間的關系的研究中,CXCL5-156的基因型及等位基因與巨細胞病毒感染具有相關性,而且CXCL5-156 C等位基因的增加使得患兒血清中CXCL5的水平升高,巨細胞病毒感染及新生兒壞死性小腸結腸炎的相關炎癥反應加重,患兒相關死亡風險顯著升高[16]。

本研究分析了CXCL5基因rs352046、rs425535位點分布情況與肺炎患者嚴重程度之間的相關性。結果顯示,CXCL5基因rs425535位點基因型及等位基因分布情況與患者組患者的多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎的嚴重程度有關,表明CXCL5基因多態性可以在一定程度上影響患者肺炎的病情。陸秀娟等[17]研究結果表示,CXCL9基因多態性與類風濕關節炎的發生風險顯著相關,而且類風濕關節炎的發生風險隨CXCL9水平的升高而增加。雖然本研究結果顯示,CXCL5基因rs352046位點基因型及等位基因分布情況與患者肺炎嚴重程度無關,但并不意味著CXCL5基因rs352046位點的多態性對多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎的發生或疾病進程不產生影響,未來還需進行深入研究。

本研究結果顯示,CXCL5基因rs425535位點的基因型及等位基因分布在碳青霉烯類藥物敏感和不敏感患者間比較,差異有統計學意義(P<0.05),表明CXCL5基因rs425535位點多態性的改變與多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎患者對碳青霉烯類藥物的敏感性有關。有研究報道,CXCL5基因rs425535位點的基因型及等位基因與青霉素敏感性有關[14]。本研究結果中,CXCL5基因rs352046位點的基因型及等位基因分布與多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎患者碳青霉烯類藥物敏感性無關,并不意味著CXCL5基因rs352046位點的多態性對碳青霉烯類藥物敏感性不產生影響,未來還需更多研究來進行深入探討。

綜上所述,本研究發現CXCL5基因多態性與多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎的發生風險、嚴重程度及碳青霉烯類藥物敏感性有關,但本研究也存在樣本量較小的不足,還需要開展多中心、大樣本的研究,并且考慮其他基因及環境因素產生的影響,以深入探討CXCL5基因多態性對多重耐藥鮑曼不動桿菌肺炎及碳青霉烯類藥物敏感性的影響。