某地區RhD 陰性獻血人群血清學表型及不規則抗體分析

谷 寒，張 穎，郝金中，劉 靜，孫靜美

（1.安陽市人民醫院，河南 安陽 455000；2.安陽市人民醫院，河南 安陽 455000）

Rh 血型系統在臨床重要性僅低于ABO 血型系統，具有多態性以及免疫原性血型系統，占有比例0.2～0.5%，會導致新生兒出現溶血病、自身免疫性相關溶血性的貧血以及溶血性的輸血反應等[1]。Rh 血型系統里含有54 個抗原數目，其同臨床輸血主要相關抗原為C、c、D、E、e 五種，尤其是D 抗原的抗原性能最強[2]。為增強輸血的安全性，本文對某地區RhD陰性獻血人群血清學表型及不規則抗體進行分析，現報導如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集某地區2018 年5 月～2020 年5 月160 例RhD 陰性獻血人群血液標本設為研究對象，年齡18～55 歲，其中男92 例，女68 例，平均年齡（39.32±2.74）歲；本研究倫理委員會審批通過。

1.2 方法

RhD 陰性獻血人群初篩選擇IgM 試劑的鹽水介質微量板法，選擇IAT 進行再次確認。初篩以及再次確認皆呈陰性人群判定是RH 陰性，其中初篩呈陰性，確認試驗呈陽性的人群歸類為不完全D/弱D。鹽水試管法對單克隆IgM 抗-D、C、c、E、e試劑進行鑒定。不規則抗體的篩查和鑒定：依據抗體進行紅細胞篩選的試劑盒說明書分別運用凝聚胺法、鹽水介質試管法以及IAT 等抗體鑒定法進行抗體相關篩查。

1.3 儀器和試劑

單克隆抗-C、抗c、抗E、抗e 皆是上海血液生物醫藥有限公司產品；抗-D（IgG+IgM）、抗-D（IgG）以及抗-D（IgM）（英國Millipore 公司）；單克隆的抗人球蛋白（法國DIAGAsT 公司）；凝聚胺介質（珠海貝索生物技術有限公司）；人源抗-D 為AB 型的抗-D 血清；血庫專用離心機（Baso 2002-2 型，臺灣貝索企業有限公司）。

2 結果

2.1 RhD 陰性獻血人群ABO 血型分布狀況比較（見表1）

表1 RhD 陰性獻血人群ABO 血型分布狀況比較 n（%)

2.2 不完全D/弱D 獻血人群Rh 表型的分布狀況比較（見表2）

表2 不完全D/弱D 獻血人群Rh 表型的分布狀況比較 n（%)

2.3 不規則抗體的檢出情況比較（見表3）

表3 不同性別的獻血人群中不規則抗體的檢出情況比較 n（%)

3 討論

Rh 血型系統的抗原和相應的抗體進行結合后會出現血管內、外溶血，由于Rh 血型系統具備低效價的高免疫活性抗E/e，該類抗原輸血前不易被檢測出來，而輸血后會迅速到達高峰，輸血前的交叉配血出現相容，從而產生較大風險以及安全隱患[3]。D 變異型皆可導致免疫系統產生，使同種的抗-D 生成，為提高輸血的安全性，當其是供血者需當成RhD 陽性，受血者需當成RhD 陰性進行血液的輸注。因RhD 陰性血為臨床上的稀缺血源，有效增加稀有的血型庫利用率為當前研究熱點。本文對160例RhD 陰性獻血人群表型檢測顯示，ccee（62.50%）表型占比最高，其次為Ccee（22.50%）表型，ccEe（7.50%）、CCee（5.00%）、以及CcEe（2.50%）表型相對較低，其他相關表型本研究未檢出，這與張欣等[2]研究結果相一致。

臨床紅細胞的表面攜帶D 抗原稱RhD 陽性，未攜帶D 抗原稱RhD 陰性，RhD 陰性以外RhD 表型能分成4 類：a）D 表型的紅細胞表面其RhD 的抗原數提升至7.5～20 萬個；b）常見表型的每個紅細胞攜帶1～3.3 萬個抗原；c）稀有的Rh 缺失型；d）RhD 抗原的數量降低后的變異體，能分成弱D 以及不完全D等；RhD 的弱表達檢測在輸血中的意義成為近年免疫血液學里研究的熱點[2]。弱D 表型和D 抗原呈現無區別，只紅細胞膜的D抗原相對較少，表達更弱。輸血實踐里需預防不完全D 定成Rh陽性，由于不完全D 患者輸注D 陽性的紅細胞能產生抗-D 的抗體，故患者呈不完全D 型需當成Rh 陰性，而供血者的不完全D 表型需當成Rh 陽性[3]。本研究檢出不完全D/弱D 獻血人群19 例，其中ccEe3 例，ccEE1 例，CcEe3 例，CCee3 例，Ccee9例，另外，本研究顯示，不規則抗體檢出14 例（8.75%），其中抗E5 例，自身抗體3 例，冷凝集素與抗M 皆2 例，抗c 以及抗補體C3d 皆l 例。獻血人群女性不規則抗體的陽性率大于男性。分析原因Rh 系統內具有天然性及免疫性的抗體，天然的抗E能利用酶處理血紅細胞進行檢測，其中抗-D 偶然可見；免疫性的抗體里抗-D 大部分是IgG，僅少數有IgM，隨著IgG 的出現，可偶然見IgA，由于血清里主要存在IgG，而IgG 型的抗-D 無法直接凝集成為正常的Rh 表型；抗-DIgG 最多見的是IgGl 與IgG3，較少見的IgG2 與IgG4，一般隨著IgGl 一起出現，而女性常呈單一的亞類，男性則常具有多種亞類[4]。檢測RhD 陰性獻血人群血清學表型及不規則抗體臨床對組建RhD 陰性獻血者表型庫具有重大意義，不僅能為臨床危重癥患者提供安全血液，且為部分需長期進行反復輸血的患者提供更具配合性血液，從而提升臨床療效，增加患者生存質量。

綜上，對某地區RhD 陰性獻血人群進行血清學表型及不規則抗體的檢測，從而建立RhD 陰性獻血人群表型相關資料庫，更能確保輸血的安全性。