兒童吉蘭-巴雷綜合征譜系疾病變異型免疫功能變化

孫小蘭,黃志新,黃文劍,鐘建民

(江西省兒童醫(yī)院 a.神經(jīng)內(nèi)科; b.信息科,南昌 330006)

吉蘭-巴雷綜合征(GBS)譜系疾病是一類包括經(jīng)典型GBS以及變異型急性免疫介導(dǎo)性的中樞及周圍神經(jīng)疾病。全球GBS的年發(fā)病率為1/10 萬～2/10 萬[1],兒童年發(fā)病率為0.34/10萬～1.34/10萬[2],而我國(guó)GBS年發(fā)病率約為0.66/10萬[3]。變異型的發(fā)病率國(guó)內(nèi)外未見明確的報(bào)道。2014年8月,GBS分類專家組[4]提出GBS和Miller Fisher綜合征(MFS)的新分類和診斷標(biāo)準(zhǔn),將GBS、MFS和Bickstaffer腦干腦炎(BBE)作為一個(gè)疾病譜。近年來國(guó)內(nèi)外也有新的GBS譜系疾病及其各亞型的研究[5-6]。目前,GBS譜系疾病變異型的發(fā)病機(jī)制一般認(rèn)為由細(xì)胞免疫與體液免疫共同參與,但機(jī)體免疫功能如何影響該病變異型的發(fā)生發(fā)展尚不清楚。本文通過分析變異型患兒淋巴細(xì)胞亞群、免疫球蛋白及相關(guān)細(xì)胞因子的變化,探討兒童GBS譜系疾病變異型的發(fā)病免疫機(jī)制,為臨床診治、判斷疾病預(yù)后及探討新的治療方法提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2018—2021年于江西省兒童醫(yī)院就診的變異型GBS譜系疾病患兒20例(變異型組)及經(jīng)典型GBS譜系疾病患兒20例(經(jīng)典型組),既往無自體免疫病或無服用激素等免疫抑制劑史,均符合2014年GBS分類專家組提出的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。選取同期本院兒保科健康體檢兒童20例為對(duì)照組,均無自身免疫性疾病,無感染、手術(shù)、外傷、精神創(chuàng)傷等病史。變異型組,男8例,年齡(4.85±1.13)歲;女12例,年齡(4.81±1.10)歲。經(jīng)典型組,男9例,年齡(5.21±1.08)歲;女11例,年齡(4.92±1.02)歲。對(duì)照組,男8例,年齡(5.09±1.10)歲;女12例,年齡(4.98±1.07)歲。3組年齡、性別比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。所有患兒均在其父母知情同意的情況下參與本研究,并得到醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 檢測(cè)方法

抽取外周靜脈血行相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)。用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定外周血淋巴細(xì)胞亞群水平(CD16+56、CD19+、CD4+、CD8+),流式細(xì)胞儀(FACSCanto)和試劑盒購(gòu)自美國(guó)BD公司。用化學(xué)發(fā)光法測(cè)定相關(guān)細(xì)胞因子(IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α)水平,IMMULITE1000化學(xué)發(fā)光免疫分析儀和試劑盒購(gòu)自德國(guó)西門子公司。用免疫比濁法測(cè)定血清免疫球蛋白(IgM、IgG、IgA),ADVIA2400免疫分析儀購(gòu)自德國(guó)西門子公司,試劑購(gòu)自重慶博士泰生物有限公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行分析。正態(tài)分布的計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)進(jìn)行比較,計(jì)數(shù)資料的比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher精確概率法;非正態(tài)分布數(shù)據(jù)的比較采用Wilcoxon符號(hào)秩和檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 淋巴細(xì)胞亞群水平比較

變異型組CD16+56、CD4+、CD8+低于對(duì)照組(P<0.05);變異型組外周血淋巴細(xì)胞亞群數(shù)與經(jīng)典組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 3組淋巴細(xì)胞亞群的水平比較

2.2 細(xì)胞因子水平比較

變異型組IL-2、IL-8、TNF-α高于對(duì)照組(P<0.05);變異型組IL-2、IL-8高于經(jīng)典型組(P<0.05)。見表2。

表2 3組細(xì)胞因子的水平及比較

2.3 免疫球蛋白水平比較

變異型組IgG高于對(duì)照組(P<0.05);變異型組與經(jīng)典型組IgG、IgM、IgA比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表3。

表3 3組免疫球蛋白的水平比較

3 討論

兒童GBS譜系疾病是由細(xì)胞免疫和體液免疫共同參與的中樞及周圍神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫性疾病,自體免疫功能的紊亂對(duì)該病的發(fā)生起主要作用。機(jī)體免疫功能的維持與T(CD3+)、B(CD19+)和NK(CD16+56)淋巴細(xì)胞有關(guān)。Th(CD4+)細(xì)胞分為Th1和Th2細(xì)胞,Th1細(xì)胞主要參與細(xì)胞免疫及遲發(fā)型超敏反應(yīng);Th2細(xì)胞主要與體液免疫有關(guān)[7]。Ts(CD8+)細(xì)胞為細(xì)胞毒性T細(xì)胞,對(duì)體液免疫和細(xì)胞免疫起負(fù)相調(diào)節(jié)作用。B(CD19+)淋巴細(xì)胞可分化為漿細(xì)胞,主要維持機(jī)體的體液免疫作用。NK(CD16+56)細(xì)胞作為免疫細(xì)胞,在特定條件下參與自身免疫性疾病的發(fā)生。目前發(fā)現(xiàn)機(jī)體免疫功能失衡與多種神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病有關(guān),GBS譜系疾病作為神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病的一類,免疫失衡在其發(fā)生發(fā)展中起重要作用,本研究結(jié)果顯示,兒童GBS譜系疾病變異型患者CD16+56、CD4+、CD8+水平低于對(duì)照組,IgG水平高于對(duì)照組(均P<0.05),提示兒童GBS譜系疾病變異型患者細(xì)胞免疫功能與體液免疫功能均出現(xiàn)紊亂,參與疾病的發(fā)生發(fā)展,鑒于此結(jié)果,對(duì)于GBS譜系疾病變異型患兒的治療建議參考經(jīng)典型GBS治療[8],首選免疫球蛋白治療,調(diào)節(jié)免疫失衡,改善預(yù)后。

IL-2是T細(xì)胞生長(zhǎng)因子,具有促進(jìn)T、B淋巴細(xì)胞增殖、分化和增強(qiáng)NK細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用,抗原刺激T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生大量IL-2,血清IL-2含量變化,代表著T細(xì)胞增殖和功能的強(qiáng)弱。YOSHII等[9]研究發(fā)現(xiàn),急性期GBS患者在接受治療前血清中IL-2水平低于對(duì)照組,經(jīng)過治療后,血中IL-2水平有所上升,但本研究發(fā)現(xiàn),變異型組血清IL-2水平高于對(duì)照組及經(jīng)典型組,由此推測(cè)IL-2參與了GBS譜系疾病變異型的發(fā)病,且變異型與經(jīng)典型GBS免疫發(fā)病機(jī)制存在差異性,為變異型GBS譜系疾病患兒的免疫治療提供新的思路。

IL-8是由多種細(xì)胞產(chǎn)生的炎癥因子[10],主要調(diào)節(jié)中性粒細(xì)胞激活和轉(zhuǎn)移,在組織病理損傷過程中起關(guān)鍵作用[11]。在病毒感染、缺氧、外傷及自身免疫性疾病患者的血清中可檢測(cè)到高水平的IL-8,研究還發(fā)現(xiàn)IL-8的升高與疾病的進(jìn)展、轉(zhuǎn)歸等相關(guān)[12],本研究發(fā)現(xiàn),變異型組血清中IL-8水平高于對(duì)照組、經(jīng)典型組(P<0.05),提示IL-8參與兒童變異型GBS譜系疾病的發(fā)病,與既往報(bào)道的經(jīng)典型GBS發(fā)病有所差異[12]。

TNF-α是由巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞分泌的單核因子,在免疫系統(tǒng)的發(fā)育、免疫功能的調(diào)節(jié)和T細(xì)胞引起的組織損傷中起著重要作用[13]。HUIZINGA等[14]研究發(fā)現(xiàn),GBS患者血清TNF-α水平明顯升高,并且與病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)(P<0.05),經(jīng)免疫治療后,血清TNF-α水平下降(P<0.05)。RADHAKRISHNAN等[15]也發(fā)現(xiàn),GBS患者血清TNF-α水平高于對(duì)照組(P<0.05),經(jīng)過靜脈注射免疫球蛋白或血漿置換治療后,血清TNF-α的水平降低(P<0.05)。本研究結(jié)果顯示,變異型組血清TNF-α水平高于對(duì)照組(P<0.05),與既往報(bào)道經(jīng)典型GBS患者結(jié)果一致[15],進(jìn)一步支持兒童變異型GBS譜系疾病免疫治療有效。

總之,本研究表明變異型GBS譜系疾病患兒存在細(xì)胞免疫及體液免疫功能紊亂,表現(xiàn)為CD16+56、CD4+、CD8+水平下降,IL-2、IL-8、TNF-α水平升高,IgG水平升高,與經(jīng)典型GBS發(fā)病免疫機(jī)制有部分重疊,不同之處為血IL-2、IL-8水平升高。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展,未來IL-2、IL-8等炎癥因子抑制劑用于臨床免疫性疾病的治療值得期待。