肉類食品中激素殘留的檢測技術分析

◎ 劉貴州，丘東蔚

（廣東產品質量監督檢驗研究院，廣東 廣州 510000)

肉類是我國居民飲食中的重要食品，肉類食品中含有人體所需要的營養元素。多年來，我國肉類食品需求量和產量不斷增加，其中豬、牛、羊成為最主要的肉類食品。肉類食品需求和產量增加，代表我國居民生活水平提高，同時伴隨而來的是肉類食品安全的問題。肉類食品中的激素問題頻繁出現，造成民眾食肉恐慌情緒，民眾對肉類食品質量管理產生質疑，也造成了肉類消費市場波動等問題。因此，在現代肉類食品中增加激素殘留檢測項目非常必要。

1 肉類食品激素殘留檢測的重要性

肉類食品激素殘留檢測的重要性在于食品安全。在肉類食品中之所以存在較多的激素，主要是畜禽類在飼養過程中添加較多的激素類飼料，促使動物快速生長。但是，養殖者僅看到了激素的“利”，卻忽略了激素的“弊”。研究發現，激素對動物生長會產生較大影響。例如，畜禽以及水產品中，使用性激素、生長激素、甲狀腺素、β-興奮劑等能夠提高動物增重速度，飼料轉化利用率高，繼而提升了經濟效益。但是，這樣的畜禽以及水產品營養價值低，食用危害極大。

2 肉類食品激素殘留檢測的技術分析

2.1 殘留激素分離技術

①液-液萃取（LLE）技術。該技術利用分離萃取原理，三氯甲烷作為萃取劑進行分離萃取，具有技術應用簡單，設備條件較低的優勢。常規情況下，激素是穩兩性基團，在堿性條件下提取后，調節溶液為中性或酸性萃取至有機相，樣品中激素提取率可達90% 以上。

②固相萃取（SPE）技術。這是一種較為常見的分離技術。固相萃取（SPE）技術分離效率相對比較高。該項技術在實際應用中，有機溶劑使用比較少，能夠減少對環境的污染。研究發現采用雙三甲基硅基三氟乙酰氨基作為萃取物進行萃取，回收率能夠達到75%~95%。

2.2 殘留激素檢測技術

在實際檢測工作過程中，由于在肉類食品中激素的含量非常低，所以，對檢測技術的精度、檢測技術的效率要求非常高。通過相關專家的不懈努力，已經研究出多種激素殘留檢測方法，常見檢測技術主要有氣相色譜檢測法、高效液相色譜檢測法、免疫分析檢測法、毛細管電泳檢測法、氣質聯用檢測法等。

①氣相色譜檢測法。氣相色譜檢測法是一種常見的技術，在檢測領域中的應用較為廣泛，同時具有檢測精度高、效率高的優勢。在利用氣相色譜檢測技術進行檢測的過程中，需要先將激素樣品甲基硅烷化，利用火焰檢測器配合氣相色譜儀實施激素含量檢測。在具體檢測實施的過程中，采用2% OV-17作為填充物，有利于檢測能夠良好開展。

該檢測技術在應用過程中，主要利用激素的物理特性，因為激素本身具有沸點高、揮發性差的性質，不太適用于氣相色譜檢測。但是，經過研究發現，在實施檢測的過程中，可以利用氣相色譜檢測方法對鹽酸克侖特羅進行檢測，檢測樣品均質，并利用超聲萃取進行凈化，凈化時要求采用C18小柱、利用HP-1石英毛細管柱程序升溫，完成以上兩項檢測。利用該方法進行檢測，平均回收率能夠達到86%，相關系數為0.999 3，線性范圍為0.1~40 mg·L-1。

②高效液相色譜法。高效液相色譜檢測方法在殘留激素檢測中具有良好的效果。該檢測技術應用比較廣泛，最早應用于20世紀70年代，具有高效分離的優勢，能夠對沸點高、摩爾質量相對比較大的有機物進行檢測，效果良好，效率高。

相關專家在技術研究中提出，利用SB-C18 柱為固定相，甲醇-水（70∶30）為流動相，對殘留激素進行檢測，檢測效果最佳。通過對該技術研究發現，該技術方法回收效率超過85%。在檢測過程中，如果己烯雌酚濃度在 0~200 μg/kg 之內，檢測值相關系數超過0.999、靈敏度達到0.15 mg/kg。

在高效液相色譜檢測方法應用過程中，相關專家提出以60% 甲醇超聲提取，用Dianon sil C18 柱為固定相，甲醇-0.01 mol·L-1磷酸二氫鈉(33∶67)為流動相進行檢測。在實施檢測的過程中發現，該檢測方法要求檢測回收率超過86%、固相萃取檢測實施過程中，可以采用雌雄性激素進行殘留檢測。

高效液相色譜檢測對激素檢測具有良好的適應性。因此，相關專家一直都在針對不同液相和固相進行更換，探討最佳檢測方法。例如，我國化學研究專家已經提出甲醇為洗脫液，SUPELCO Discovery C18 5 μm 250 × 4.6 mm 柱為固定相，流動相為甲醇 - 水（85∶15）的相關檢測方法。測算該檢測方法的相關系數能夠達到0.999、檢出限為9.55 μg/kg、回收效率能夠達到92%~98%，通過回收效率就能確認現代高效液相色譜檢測方法較傳統方法已經有非常大的進步，對于激素檢測實施也有重要的影響[1]。

目前，高效液相色譜檢測方法在檢測中應用，已經開始提出多激素檢測技術。傳統檢測方法在應用的過程中，單一激素需要置換固相和液相流動相，從而導致檢測效率下降。因此，為解決該問題，相關專家在檢測技術研究過程中針對該技術問題進行深入分析，并提出處理方法。例如，林奕芝等專家在對高效液相色譜檢測方法進行研究的過程中提出HPLC 法，該方法主要流程包括甲醇超聲萃取、離心、濃縮等多項技術，在技術應用過程中，使用0.45 μm FH 膜進行過濾效果更好，從而提升了檢測效率，同時也能夠達到多種元素檢測效果。該檢測方法能夠對包括沙丁醇在內的8種雌性激素進行檢測。最終測定該檢測方法在應用過程中，相關系數達到0.999，回收率在 84.5%~101%之間，更加滿足現代檢測技術的應用條件，有利于檢測工作良好實施，提升檢測工作質量[2]。

2.3 免疫法檢測方法應用

實踐研究發現，該檢測方法具有良好的檢測效果，操作簡單，靈敏度能夠達到10 ~12 g，其主要確定就是較高的假陽性。因此，該檢測方法經常在殘留分析初篩時應用。

①酶聯免疫分析方法。該檢測方法應用相對廣泛，主要是利用酶聯競爭的原理進行檢測。相關專家已經研究應用丁胺醇殘留酶聯免疫試劑盒，該試劑盒進行檢測，確認檢測下限為0.1 ng/g、回收檢測率能夠達到75%~105%。另外，相關專家對該方法進行檢測創新，設計應用鹽酸克侖特羅酶聯免疫試劑盒，該檢測方法能夠實現12.5~0.1 ng/mL范圍檢測，相關系數能夠達到0.998 0、靈敏度也達到0.1 ng/g[3]。

②放射免疫分析法（RIA）是一種比較常見的檢測方法，可以利用生物化學方法進行免疫檢測。微生物活性物質具有一定的優越性，可以通過生物化學試驗分析活躍度，繼而實現對激素中相關位置的檢測，從而保證檢測達到最佳效果。最初該檢測方法在應用的過程中，不能夠滿足超微量分析精度，因此對激素殘留檢測的效果也不是很好。基于此，提出RIA試劑盒測定方法，該方法能夠對牛肝中的鹽酸克侖特羅進行檢測。通過試驗確定，RIA試劑盒測定方法在檢測實施過程中，能夠提升檢測工作效率，在進行檢測的過程中，當鹽酸克侖特羅的量分別為1 ng/g和2.5 ng/g時，數據回收率分別達到95%± 15% 和 89% ± 9 %，通過數據可以發現，該檢測工作效率靈敏度比較高。但是，半衰期相對比較短、輻射比較少，從而導致其應用不夠廣泛[4]。

2.4 肉類食品激素殘留檢測技術標準研究

通過本文研究發現，肉類食品激素殘留檢測技術種類非常多，適合應用于不同肉類、不同激素檢測。我國相關部門還在推動探究新技術，從而解決技術問題，提升檢測技術應用效率。例如，當前我國的肉類食品檢測包括多種，有牛肉中β-雌二醇殘留量的測定、等標準化檢測，更有利于提升檢測精度[5]。

3 結語

本文針對肉類食品激素殘留檢測技術進行分析，提出多種檢測技術和標準。為確保我國肉類食品使用安全，需要繼續研發新技術進行檢測，提升檢測工作效率。