金屬線碼標(biāo)記對(duì)幼年鱘魚行為及其非特異性免疫能力的影響

王潤和

（上海民辦包玉剛實(shí)驗(yàn)學(xué)校，上海 200042）

近年來，隨著水環(huán)境污染的加劇，魚類研究和保護(hù)成為了環(huán)境學(xué)的重點(diǎn)課題。而魚類標(biāo)記是進(jìn)行魚類研究和保護(hù)的重要工具。例如，在水產(chǎn)實(shí)際養(yǎng)殖中，魚類標(biāo)記可用以識(shí)別繁殖計(jì)劃中的親魚[1]，識(shí)別和追蹤野生養(yǎng)殖魚類[1-3]；在實(shí)驗(yàn)研究中，魚類標(biāo)記可用于標(biāo)記再捕獲實(shí)驗(yàn)，以確認(rèn)魚類年齡，調(diào)查魚類的遷徙、生長、種群大小和釋放后的生存情況、種群動(dòng)態(tài)等，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)放養(yǎng)計(jì)劃的評(píng)估，這有助于針對(duì)瀕危魚類進(jìn)行種群動(dòng)態(tài)建模、制定管理計(jì)劃和協(xié)助保護(hù)行動(dòng)[4]。其中，金屬線碼標(biāo)記（CWT）作為魚類標(biāo)記中的一種，因其具有可用于非常小的魚體、在魚體內(nèi)有較高的保留率、價(jià)格便宜、編碼數(shù)字存量大以及能更好地評(píng)價(jià)魚類的增殖放流效果等優(yōu)點(diǎn)，在魚類研究和保護(hù)中得到了廣泛應(yīng)用。

中華鱘是長江口特有的珍稀、瀕危魚類，對(duì)其做好生態(tài)監(jiān)控，有助于更好地研究和保護(hù)中華鱘乃至整個(gè)長江魚類。目前，關(guān)于金屬線碼標(biāo)記在中華鱘上的應(yīng)用研究較少；同時(shí)，金屬線碼標(biāo)記是否會(huì)影響中華鱘的行為，以及是否會(huì)破壞魚類自身的非特異性免疫也有待研究。在此背景下，筆者以非特異性免疫能力較弱、易受外界因素影響的幼年鱘魚（以下簡稱幼鱘）為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，研究了金屬線碼標(biāo)記對(duì)幼鱘行為及其非特異性免疫能力的影響，以期促進(jìn)金屬線碼標(biāo)記在長江魚類研究和保護(hù)中的進(jìn)一步應(yīng)用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

本研究以8條幼鱘為研究對(duì)象。供試幼鱘均是從長江下游捕獲的野生鱘魚孵化出來的幼苗，孵化后幼鱘飼養(yǎng)于溫度為24～25 ℃的養(yǎng)殖池中，在實(shí)驗(yàn)開始前1周轉(zhuǎn)移至調(diào)溫后的實(shí)驗(yàn)池。實(shí)驗(yàn)開始前，8條幼鱘的平均體質(zhì)量為429.7 g。

實(shí)驗(yàn)工具為自動(dòng)標(biāo)記注射器（MKIV）、T 型檢測器、金屬線碼標(biāo)記、注射器、離心管、離心器、全自動(dòng)生化儀。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

實(shí)驗(yàn)依據(jù)是否進(jìn)行金屬線碼標(biāo)記注射設(shè)計(jì)處理：（1）實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行金屬線碼標(biāo)記注射。在注射前，先利用70 mg/L MS-222 麻醉劑對(duì)實(shí)驗(yàn)對(duì)象進(jìn)行麻醉1～4 min，然后用自動(dòng)標(biāo)記注射器（采用MKIV 3.5 ETCHED 長針，且在注射時(shí)使用護(hù)針器來調(diào)節(jié)針的穿透深度）進(jìn)行金屬線碼標(biāo)記注射（注射位置為鰓蓋），注射后使用T型檢測器檢驗(yàn)標(biāo)記是否注入成功。（2）對(duì)照組，不進(jìn)行金屬線碼標(biāo)記注射。8條幼鱘平均分為兩個(gè)組。為了排除未標(biāo)記和已標(biāo)記魚類之間的相互影響，及便于調(diào)查對(duì)比，將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的幼鱘分開飼養(yǎng)。

1.3 調(diào)查項(xiàng)目及方法

在飼養(yǎng)4 d 后進(jìn)行相關(guān)調(diào)查。其中，通過比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組幼鱘的存活率、日攝食量、呼吸次數(shù)、擺尾次數(shù)，來評(píng)價(jià)金屬線碼標(biāo)記對(duì)幼鱘行為的影響；通過比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組幼鱘血液中的免疫球蛋白A 含量、堿性磷酸酶活性、白蛋白含量，來評(píng)價(jià)金屬線碼標(biāo)記對(duì)幼鱘非特異性免疫能力的影響。

具體調(diào)查方法為：（1）存活率。飼養(yǎng)4 d后，調(diào)查記錄幼鱘存活數(shù)，計(jì)算存活率。（2）日攝食量。在標(biāo)記注射后的24 h 內(nèi)不進(jìn)行投喂，24 h 后進(jìn)行投喂，投喂量為幼鱘體質(zhì)量平均值的0.2%，計(jì)算日攝食量。（3）呼吸次數(shù)和擺尾次數(shù)。飼養(yǎng)4 d 后，分別觀察記錄幼鱘每30 s的呼吸次數(shù)和擺尾次數(shù)。（4）免疫球蛋白A含量、堿性磷酸酶活性、白蛋白含量。飼養(yǎng)4 d 后，分別提取實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組幼鱘的血液樣本，用離心機(jī)從提取的血液樣本中分離出血清，通過全自動(dòng)生化儀測得免疫球蛋白A 含量、堿性磷酸酶活性、白蛋白含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)幼鱘行為的影響

由表1 可知，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組幼鱘的存活率和日攝食量沒有差異，呼吸次數(shù)和擺尾次數(shù)差異也不大。以上結(jié)果表明，金屬線碼標(biāo)記對(duì)幼鱘的行為影響不大。

表1 幼鱘行為分析

2.2 對(duì)幼鱘非特異性免疫能力的影響

由表2可知，實(shí)驗(yàn)組幼鱘的主要免疫學(xué)生化指標(biāo)較對(duì)照組有所下降，其中，堿性磷酸酶活性和白蛋白含量的下降幅度較大。以上結(jié)果表明，金屬線碼標(biāo)記對(duì)幼鱘的非特異性免疫能力影響較大，幼鱘注射金屬線碼標(biāo)記后不宜立即放流，需經(jīng)過一段時(shí)間的人工養(yǎng)殖后再進(jìn)行放流。

表2 幼鱘主要免疫學(xué)生化指標(biāo)

3 結(jié)論與討論

3.1 結(jié) 論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，金屬線碼標(biāo)記對(duì)幼鱘的行為影響不大，但對(duì)幼鱘的非特異性免疫能力影響較大。因此，可利用金屬線碼標(biāo)記對(duì)鱘魚進(jìn)行生態(tài)監(jiān)控，但鱘魚注射金屬線碼標(biāo)記后需進(jìn)行一段時(shí)間的人工養(yǎng)殖后，再進(jìn)行野外放生。

3.2 討 論

本實(shí)驗(yàn)是在假定組內(nèi)幼鱘不會(huì)相互影響的基礎(chǔ)上開展的，且為了排除未標(biāo)記和已標(biāo)記幼鱘之間的相互影響，及便于調(diào)查對(duì)比，將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組幼鱘進(jìn)行分開飼養(yǎng)，保證了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的正確性。但是，本實(shí)驗(yàn)的樣本數(shù)據(jù)較少，以后應(yīng)擴(kuò)大樣本數(shù)量，并優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案（例如，優(yōu)化金屬線碼標(biāo)記的注射位置）等，從而進(jìn)一步明確金屬線碼標(biāo)記對(duì)鱘魚的影響，進(jìn)而為做好鱘魚的生態(tài)監(jiān)控和保護(hù)奠定基礎(chǔ)。