雞滑液囊支原體的研究進展

劉 麒，要緯玉，戎 暢，房思遠，劉 瑩，史萬玉

河北農業大學動物醫學院，河北保定 071000

1 病原學

雞滑液囊支原體(MS)屬于厚壁菌門，柔膜菌綱，支原體目，支原體科，是一種可自我復制的原核生物。MS 無細胞壁，直徑介于0.2 ～0.4 μm，在電子顯微鏡下觀察可見MS 大部分為圓形或者橢圓形，具有多形性。MS 可以被吉姆薩染色，革蘭氏染色為革蘭氏陰性。MS 細胞結構包括莢膜、單位膜、粘附蛋白以及內含物，其內含物又包括核糖體、核質、轉座子以及質粒等。莢膜不僅包含抵抗宿主吞噬的粘性物質，還是重要的毒力因子。MS 可以發酵葡萄糖及麥芽糖產生酸不產氣體，不能發酵乳糖、水楊苷或蕈糖。由于MS 生長所必需的很多營養物質無法自身合成，如脂肪酸和膽固醇等，可以用改良的Frey 培養基對其進行體外培養。在培養基中接種MS 后，在8%的CO2下37 ℃培養箱中培養3 ～5 d，可見“煎蛋”狀菌落。MS 只有一種血清型但存在多種不同的基因型。

2 流行病學

MS 的自然宿主是雞和火雞，各個日齡均易感，相對于成年雞，雛雞更容易感染，此外鴿子、鴨等其它禽類也可以感染，哺乳動物不易感。病雞和隱性感染雞是其主要的傳染源，傳播方式有垂直傳播和水平傳播，包括種蛋傳播、飛沫傳播、接觸各種被污染的物品傳播，如被污染過的飼料、羽毛、水源等。雞感染本病后造成飼料利用率下降、生長發育受阻、死亡率上升，當與大腸桿菌、新城疫病毒、傳染性支氣管炎病毒等混合感染時，還可導致更加嚴重的疾病。雞滑液囊支原體病在一年四季都可以發生，無明顯的種群特異性，在氣候驟變或換季時更易傳播。疾病剛開始在雞群中傳播時，往往只有個別雞發病，病死率較低，若不加以控制，會快速擴散至整個雞群。近年來，MS 在全球各國都有不同程度的暴發，在我國MS 的發病率也越來越高。Sui 等人通過對來自我國中部地區的258 只雞進行研究發現，蛋雞的MS 感染率高達74.1%。MS 在我國的高感染率給各個家禽養殖企業造成了巨大損失。

3 臨床癥狀

雞滑液囊支原體病由急性向慢性發展，雞在感染MS 之初可以觀察到雞冠發白、跛行及生長發育遲緩，后逐漸發展為羽毛粗亂、雞冠萎縮。常見病雞關節及胸部腫脹，附關節和爪墊是MS 的主要病變組織，但也偶見病雞有全身性感染癥狀而無明顯的附關節及爪墊腫脹。感染MS 后，病雞雖仍會進水進食，但體形消瘦，常伴隨不安及脫水等癥狀。度過急性期之后，機體恢復速度較為緩慢，恢復后體內仍含有MS 并伴隨整個生命周期。偶見雞群中無急性感染病雞，僅有慢性感染的病雞。通過呼吸道感染MS 的病雞通常在一周內出現輕微啰音，通過爪墊注射方法感染的病雞除爪墊、關節腫脹外，可能出現軟骨發育不良等癥狀。氣囊病變在任何日齡均有發生，常見于冬季，導致體重增加變慢、淘汰率增高。國外學者研究發現蛋雞感染MS 后平均每日產蛋量下降11%，蛋殼頂端異常占總產蛋數的24.5%，產出部分軟殼蛋，蛋殼表面出現少量氣孔。

4 剖檢變化

在MS 感染早期，滑液囊、關節、龍骨滑膜囊出現少量炎性滲出物。隨著病情的加重，在病雞的肌肉、關節、氣囊中滲出物增加，逐漸渾濁甚至發展為干酪樣滲出物。肝、脾腫大，腎臟腫大并伴有顏色發白斑駁等癥狀。部分病雞有呼吸道癥狀，氣囊渾濁嚴重者有干酪樣滲出物，但上呼吸道無明顯病變。

5 診斷

5.1 病原分離

在MS 感染早期可采集病雞的咽拭子、氣管拭子、關節及爪墊的滲出物后用改良的Frey 氏培養基在8%的CO2下37 ℃培養箱中培養。慢性感染的病雞其關節及爪墊等病變組織中MS 含量減少，但在呼吸道仍有大量MS，建議使用無菌棉采集咽拭子和氣管拭子進行分離培養。由于該病在感染后期機體病變組織不再含有MS，應在雞群中盡可能多采集樣本進行分離培養。采集樣本后應在最短時間內進入實驗室進行操作或者用干冰保存。病原分離是較為可靠的鑒定方法，但其耗時長、難度較大，在生產實踐中較少采用病原分離作為診斷MS 的方法。

5.2 血清學診斷

平板凝集試驗、酶聯免疫吸附試驗和血凝抑制試驗是常用的血清學診斷MS 的方法。SPA 是生產實踐中最常用的檢測方法之一，將0.02 mL 血清和同等劑量的抗原在板上混合后觀察，操作較為簡單便捷，但用SPA 法檢測MS 時，可能會出現非特異性反應，需要與其他檢測方法配合使用。ELISA 作為另一種常用的血清學診斷方法，主要用于對雞群感染的常規監控。由于沒有商業化的抗原，不同菌株之間差異較為顯著，HI 法檢測MS 時并不常用。

5.3 分子生物學診斷

分子生物學檢測方法是通過檢測MS 的遺傳物質來對機體是否已感染作出判斷。對比其他檢測方法，分子生物學檢測方法更加敏感，有更強的特異性，可以免去大量干擾因素，檢測結果具有較強的說服力。通常使用聚合酶鏈式反應擴增MS 特異性可變脂蛋白和凝血素A（vlha）基因或16SrRNA 片段，再采用瓊脂糖凝膠電泳的方法來檢測MS 的感染，這種檢測方法具有強特異性，可信度高。

6 致病機制

6.1 通過與宿主細胞表面受體結合侵入細胞

MS 細胞膜上的蛋白能夠結合宿主細胞的受體，分泌產生的有毒物質能夠穿過宿主細胞膜進入細胞并對其造成損傷，使宿主細胞喪失原本功能。

6.2 影響機體鈣物質代謝

MS 可以影響蛋雞和肉雞的鈣代謝，造成產蛋量下降、蛋殼頂端異常等問題，使雞蛋品質下降，但并不會對雞蛋的重量及蛋殼厚度造成嚴重影響。

6.3 掠奪宿主細胞的營養物質

由于MS 本身基因組較小且對生長環境要求較高，一些自身生長繁殖所需要的營養物質不能自己合成，需要從宿主細胞內掠奪，如維生素、氨基酸、脂肪酸、膽固醇等營養物質，這種掠奪的過程會對宿主細胞造成損傷。

6.4 產生有毒代謝產物

MS 的生長繁殖過程中會分泌大量有毒代謝產物，如神經毒素、過氧化氫酶、溶細胞酶等，損傷宿主細胞或造成宿主細胞死亡。

6.5 逃避免疫應答

MS 表面膜蛋白中的vlha 蛋白及可變脂蛋白可以幫助MS 逃避宿主的免疫應答。vlha 可以通過突變多個位點、改變抗原決定簇以及粘附結構域來逃避宿主的免疫系統，造成機體慢性感染。

7 防控

7.1 綜合措施

應保持合適的飼養密度，確保雞舍內通風合理，溫度濕度適宜，減少雞的應激反應。雞場應當加強飼養管理，切實做好雞場的衛生消毒工作，定期消毒并清理糞便，嚴格管控進出車輛，貨車進出應做好消毒工作。堅持從陰性雞場引種，嚴格把控雞苗質量，從源頭防止MS 進入雞場。飼養過程中應提供全價飼料，做好MS 的定期檢疫工作，盡量做到全進全出的飼養模式，防止與野鳥接觸。在這些管理措施基礎上結合疫苗注射與藥物防治兩種方法，可有效預防滑液囊支原體病。

7.2 藥物防治

由于支原體沒有細胞壁，故常用的作用于細胞壁的藥物不能應用于MS 的防治。一般選用泰樂菌素、氟苯尼考、泰萬菌素、泰妙菌素等藥物進行治療。在治療雞滑液囊支原體病時一般采取間歇用藥的方法，用藥一周停藥一周，再用藥一周。除常規給藥方法外，針對呼吸系統癥狀較為嚴重的病雞還可以用噴霧的方法給藥，可以取得較好的治療效果。治療時不能在應用恩諾沙星的同時使用氟苯尼考，二者會產生拮抗作用，可以選用恩諾沙星加替米考星或者恩諾沙星加泰樂菌素聯合用藥的方法提升治療效果。由于只有少量藥物能夠通過血液循環達到靶器官，且不同雞場存在的毒株耐藥性不同，對藥物的敏感程度不同，單純使用藥物治療的方法不能有效根除MS，只能使癥狀減輕，故應采用藥物防治與疫苗預防相結合的方法防治雞滑液囊支原體病。

7.3 疫苗預防

藥物防治是應對MS 感染的手段之一，但由于生產實踐中缺乏規范使用，容易造成病菌耐藥性問題和藥物殘留問題。接種疫苗的方法更加經濟、安全、有效，已成預防MS 感染最重要的手段之一。當前對于MS 疫苗的研究主要集中在弱毒疫苗、滅活疫苗和基因工程疫苗。弱毒疫苗MS-H 株有較強的保護性和安全性，可通過滴鼻點眼的方式免疫。保護期能達到40 周左右，可使蛋雞的產蛋率有一定提升，提高雞蛋的重量和品質，但對于已經感染MS 的雞并不能起到保護效果。MS 滅活疫苗在臨床上有較好的免疫保護效果，可以刺激機體產生免疫反應，顯著降低感染率。王昆將實驗中分離到的4種疫苗株滅活處理后，配以相應的佐劑制備成滅活疫苗，均有較好的疫苗保護率。MS 滅活疫苗安全有效，有較高的保護率，適合在中國市場推廣使用。當前對于MS基因工程疫苗的研究仍處于起步階段，相較于其他種類疫苗來說，基因工程疫苗成本更低，更易于大規模生產，能夠為企業帶來較好的經濟效益，有較好的發展前景，因此基因工程疫苗是MS疫苗未來的發展方向之一。