婁底市育齡人群地中海貧血篩查與診斷結(jié)果分析＊

何喜紅 趙海瀠

婁底市婦幼保健院 (湖南 婁底 417000)

地中海貧血(thalassemia，以下簡(jiǎn)稱(chēng)“地貧”)是由于珠蛋白基因缺陷導(dǎo)致珠蛋白肽鏈合成障礙所致的遺傳性溶血性疾病，按珠蛋白基因缺陷的類(lèi)型可分為α地貧和β地貧。地貧是全球分布最廣、累及人群最多的一種單基因遺傳病[1]，也是危害嚴(yán)重、地區(qū)高發(fā)的出生缺陷疾病。地貧臨床癥狀輕重不一，大多表現(xiàn)為慢性進(jìn)行性溶血性貧血[2]，影響兒童生活質(zhì)量，也給家庭帶來(lái)了負(fù)擔(dān)。地貧難治可防，故而婚前、孕前及產(chǎn)前地貧篩查是有效防控地貧的方法。自2013年起，依婦幼公共衛(wèi)生系統(tǒng)對(duì)婁底范圍內(nèi)的育齡人群進(jìn)行地貧篩查、地貧基因診斷推廣，現(xiàn)就2021年婁底市五個(gè)縣市區(qū)地中海貧血篩查及基因診斷數(shù)據(jù)進(jìn)行總結(jié)并分析，為其他地區(qū)建立地貧篩查診斷推廣體系提供參考。

1 資料與方法

1.1 樣本來(lái)源標(biāo)本源于2021年1月1日至12月31日婁底市五個(gè)縣市區(qū)內(nèi)各級(jí)助產(chǎn)機(jī)構(gòu)遞送至婁底市地中海貧血篩查中心檢測(cè)的7320份育齡人群血液標(biāo)本，入組年齡為17～46歲。樣本采集按照《婁底市產(chǎn)前診斷(篩查中心)地貧防控項(xiàng)目技術(shù)服務(wù)規(guī)范》要求，由各縣市助產(chǎn)機(jī)構(gòu)對(duì)產(chǎn)婦知情同意并采集EDTA抗凝靜脈血不少于2mL，嚴(yán)格遵循樣本采集儲(chǔ)運(yùn)操作流程，遞送至篩查中心。

1.2 方法

1.2.1血細(xì)胞分析 依托婚前檢查、孕前優(yōu)生健康檢查等項(xiàng)目動(dòng)員孕前或早孕期夫婦完成血常規(guī)檢查。采集EDTA抗凝靜脈血2 ml使用任意廠家的全自動(dòng)或半自動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀進(jìn)行血液分析。下列情況之一者，血常規(guī)初篩結(jié)果為陽(yáng)性：(1)MCV＜80 fl；(2)MCH＜27pg；(3)MCV＜80 fl和MCH＜27 pg。

1.2.2 血紅蛋白分析 夫妻兩人中一人或者兩人的血細(xì)胞分析結(jié)果有異常，兩方均需進(jìn)行血紅蛋白分析。實(shí)驗(yàn)使用全自動(dòng)毛細(xì)管電泳分析儀(Capillarys2，Sebia，法國(guó))進(jìn)行血紅蛋白分析，檢測(cè)血紅蛋白A2(Hb A2)與血紅蛋白(Hb F)。下列情況之一者，血紅蛋白分析結(jié)果為陽(yáng)性：(1)HbA2＜2.5%；(2)HbA2＞3.5%；(3)HbF＞2%；(4)出現(xiàn)異常血紅蛋白條帶。

1.2.3 基因分析 夫妻中有一人或者兩人的血紅蛋白分析結(jié)果為陽(yáng)性，雙方都應(yīng)進(jìn)行地中海貧血基因檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)使用廣州凱普醫(yī)藥科技有限公司試劑，結(jié)合PCR和導(dǎo)流雜交技術(shù)檢測(cè)α地貧基因--SEA、-α3.7、-α4.2三種缺失型及αCSα、αQSα和αWSα 三種非缺失基因突變，檢測(cè)β地貧基因CD41-42(-CTTT)、IVS-Ⅱ-654(C＞T)、-28(A＞G)、CD71-72(+A)、CD17(A＞T)、CD31(-C)、CD27-28(+C)、IVS-I-1(G＞T,G＞A)、CD43(G＞T)、-32(C＞A)、-29(A＞G)、-30(T＞C)、CD14-15(+G)、Cap+40-43(-AAAC)、Cap+1(A＞C)、Int(T＞G)、IVS-I-5(G＞C)，βE(G＞A)共19種突變類(lèi)型(17個(gè)突變位點(diǎn))。

下列情況之一者，需進(jìn)行α地貧基因檢測(cè)：(1)夫妻一方或雙方HbA2＜2.5%，夫妻雙方均需行α地貧基因檢測(cè)；(2)夫妻一方或雙方HbA2＞3.5%，夫妻雙方除選擇β地貧基因檢測(cè)外，還需增加α地貧基因檢測(cè)；(3)夫妻一方已診斷為缺失型α0地貧攜帶者，另一方需行α地貧基因檢測(cè)。下列情況之一者，需進(jìn)行β地貧基因檢測(cè)：(1)夫妻一方或雙方HbA2＞3.5%或HbF＞2%，夫妻雙方均需進(jìn)行β地貧基因檢測(cè)；(2)夫妻一方已診斷為β地貧攜帶者，另一方也進(jìn)行β地貧基因診斷。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)各組數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)量與統(tǒng)計(jì)，所占總體比例使用百分率表示。

2 結(jié) 果

2021年婁底市有產(chǎn)婦30505人，血常規(guī)初篩陽(yáng)性5866人，篩查陽(yáng)性率為19.2%；有7320例育齡人群進(jìn)行了地貧電泳篩查，其中有1633例陽(yáng)性，地貧篩查陽(yáng)性率為22.3%；隨訪地貧初篩陽(yáng)性有592例進(jìn)行地貧基因檢測(cè)，地貧基因診斷率為36.25%，檢測(cè)出地貧基因攜帶136例；其中α地貧基因攜帶73例，β地貧基因攜帶59例，α地貧合并β地貧基因攜帶4例，見(jiàn)表1。

表1 各縣市區(qū)育齡人群地貧篩查、診斷統(tǒng)計(jì)結(jié)果

統(tǒng)計(jì)分析地貧基因檢測(cè)結(jié)果592例，其中地貧基因攜帶136例，計(jì)算總攜帶率為5.12%，按比例估算攜帶率，得出α地貧基因攜帶率為2.75%，β地貧基因攜帶率為2.22%，α地貧合并β地貧基因攜帶4例，攜帶率為0.15%，見(jiàn)表2。

表2 婁底市育齡人群地貧基因攜帶率

統(tǒng)計(jì)分析7320例育齡人群中檢測(cè)出的地貧基因攜帶的136例，其中α地貧基因攜帶有73例，頻數(shù)前三的類(lèi)型占α地貧基因攜帶數(shù)的91.79%，類(lèi)型為--SEA/αα、-α3.7/αα、-α4.2/αα，比例分別為41.1%、36.99%、13.71%；β地貧基因攜帶有59例，頻數(shù)前三的類(lèi)型占β地貧基因攜帶數(shù)的88.13%，類(lèi)型為IVS-Ⅱ-654(C＞T)、CD41-42(-TTCT)、CD17(AAG＞TAG)，比例分別為33.9%、32.2%、22.03%，見(jiàn)表3。

表3 23種常見(jiàn)的α和β地貧基因型匯總表

3 討 論

地中海貧血是我國(guó)南方最常見(jiàn)的一類(lèi)單基因常染色體隱性遺傳病[1]，湖南省是地中海貧血的高發(fā)區(qū)之一，對(duì)地貧高發(fā)區(qū)的育齡人群進(jìn)行孕前檢查與產(chǎn)前篩查，對(duì)地中海貧血高風(fēng)險(xiǎn)夫婦進(jìn)行產(chǎn)前診斷，是防止中間型、重型地中海貧血患兒出生最有效的防控措施[3]。由表1可見(jiàn)漣源市地貧基因診斷率為7.02%、雙峰縣地貧基因診斷率為7.37%、新化縣地貧基因診斷率為22.44%，婁底市育齡人群地貧基因診斷率僅為36.25%，基因診斷率低。導(dǎo)致婁底市育齡人群的地貧基因診斷率低的因素有以下幾點(diǎn)：一是部分醫(yī)院地貧管理不到位，未對(duì)初篩陽(yáng)性個(gè)案進(jìn)行進(jìn)一步的追蹤隨訪，動(dòng)員其及時(shí)進(jìn)行地貧基因檢測(cè)；二是地貧防控宣傳力度不足，地貧篩查與診斷實(shí)施的范圍不夠廣，醫(yī)務(wù)人員未主動(dòng)通過(guò)各種方式向育齡人群提供地貧防控相關(guān)知識(shí)的健康教育服務(wù)，導(dǎo)致其地貧防控知識(shí)知曉率低，夫婦自覺(jué)接受地貧基因檢測(cè)的意識(shí)不強(qiáng)；三是鄉(xiāng)鎮(zhèn)醫(yī)院醫(yī)生未接受過(guò)地貧相關(guān)業(yè)務(wù)培訓(xùn)，部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)醫(yī)院醫(yī)生對(duì)于地貧電泳的報(bào)告結(jié)果無(wú)法做出詳細(xì)的解讀，使地貧篩查陽(yáng)性人群未及時(shí)進(jìn)行地貧基因檢測(cè)。四是部分醫(yī)院地貧管理不規(guī)范，存在外送第三方檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)檢測(cè)的情況，未及時(shí)上報(bào)數(shù)據(jù)，使得婁底市地貧防控?cái)?shù)據(jù)不完整。五是基于孕產(chǎn)婦MCV/MCH和Hb A2的串聯(lián)篩查模式[4]使得靜止型地貧或者α地貧復(fù)合β地貧產(chǎn)婦可能因?yàn)檠Ｒ?guī)正常而造成漏篩[5]。

湖南籍人群地貧流行病學(xué)調(diào)查[6]數(shù)據(jù)顯示，湖南省地貧基因攜帶率約為4.13%，其中α地中海貧血基因攜帶率為2.15%，β地中海貧血基因攜帶率2.03%，α地貧復(fù)合β地貧基因攜帶率為0.12%；通過(guò)統(tǒng)計(jì)，2021年婁底市轄區(qū)內(nèi)育齡人群地貧基因檢測(cè)592例，其中地貧基因攜帶136例，粗略計(jì)算總攜帶率為5.12%，按比例估算出α地貧基因攜帶率為2.75%，β地貧基因攜帶率為2.22%，α地貧復(fù)合β地貧基因攜帶率為0.15%；與湖南省流調(diào)數(shù)據(jù)基本相符，與關(guān)于湖南省地貧的研究結(jié)果基本相符。

2021年全年對(duì)592例疑似地貧樣本進(jìn)行地貧基因檢測(cè)，共檢測(cè)出α地貧基因突變攜帶者73例、β地貧基因突變攜帶者59例、α地貧基因復(fù)合β地貧基因4例，見(jiàn)表3。73例α地貧基因攜帶者中頻數(shù)前三的類(lèi)型為--SEA/αα、-α3.7/αα、-α4.2/αα，比例分別為41.1%、36.99%、13.71%，與已報(bào)道的湖南地區(qū)最常見(jiàn)地貧基因突變類(lèi)型的分析結(jié)果一致[7]；59例β地貧基因攜帶者中頻數(shù)前三的類(lèi)型為IVS-Ⅱ-654(C＞T)、CD41-42(-TTCT)、CD17(AAG＞TAG)，比例分別為33.9%、32.2%、22.03%，與胡蘭萍[8]報(bào)道的長(zhǎng)沙地區(qū)人群β地貧基因型構(gòu)成、李彩云[9]報(bào)道的郴州地區(qū)人群β地貧基因型構(gòu)成、黃京希[10]報(bào)道的湘潭地區(qū)的人群β地貧基因型構(gòu)成基本一致。

通過(guò)對(duì)2021年婁底市育齡人群地中海貧血防控措施分析，根據(jù)婁底市地貧防控督導(dǎo)要求，助產(chǎn)服務(wù)機(jī)構(gòu)常規(guī)開(kāi)展地中海貧血篩查工作，所有孕婦血紅蛋白電泳檢測(cè)率達(dá)40%以上，地中海貧血初篩陽(yáng)性者接受基因診斷率達(dá)80%以上。婁底市孕婦血紅蛋白電泳檢測(cè)率僅22.31%，基因診斷率僅36.25%。故需加強(qiáng)地貧防控督導(dǎo)，確保地貧防控工作順利開(kāi)展；需加強(qiáng)地貧宣傳教育，通過(guò)新媒體科普地貧知識(shí)；發(fā)揮孕婦健康服務(wù)機(jī)構(gòu)優(yōu)勢(shì)，通過(guò)孕婦學(xué)校等平臺(tái)，開(kāi)展健康教育，提升新婚、計(jì)劃懷孕和孕早期夫妻的地貧知識(shí)知曉率，加強(qiáng)風(fēng)險(xiǎn)防范意識(shí)；引導(dǎo)育齡人群孕前主動(dòng)接受地貧篩查，注重男方的地貧篩查，特別是地貧篩查陽(yáng)性孕婦的丈夫，要建立婚檢、孕檢雙陽(yáng)夫婦的追蹤管理[11]，盡早發(fā)現(xiàn)重型地貧并及時(shí)干預(yù)，可有效預(yù)防重型地貧患兒出生。