比較不同切片檢測在甲狀腺癌病理診斷中的應用效果

謝登林

（閩西職業技術學院，福建 龍巖 364000）

甲狀腺疾病隨著人們生活方式改變等因素影響呈現逐年遞增的趨勢，且發病開始趨向于年輕化群體，女性患者發病率明顯高于男性。甲狀腺癌作為臨床常見內分泌惡性腫瘤之一，早期檢出有利于爭取癌腫切除最佳時機，提高患者治愈效果[1-2]。現階段，臨床以超聲檢查作診斷甲狀腺結節的首選方案，雖然能準確定位癌組織，但無法確定患者病因。為此，在實施癌腫病理診斷時可使用快速冰凍方法來加快樣本檢查速率，既能保證診斷準確率，又能為后續制定針對性治療方案提供依據。冰凍切片是指在手術期間切取部分癌組織后進行冷凍，最后用于臨床診斷評估。但最終診斷金標準還是參照石蠟切片，當前臨床可用冰凍切皮方法有低溫恒溫冷箱冰凍切片、二氧化碳冰凍切片等[3]。隨著臨床醫療技術的快速發展，各類技術也得到了優化，并被廣泛應用到臨床中。冰凍切片一般用于確定病變組織是否為癌腫及鑒別癌腫的良惡性，并確定腫瘤是否出現擴散和觀察手術切緣是否已經浸潤癌細胞，評估手術范圍是否達到要求[4-5]。對于手術中部分微小的可疑組織，經冰凍切片法可以有效識別，降低漏診率。基于此，本研究主要以石蠟切片作為診斷金標準，分析在甲狀腺癌患者病理診斷中應用冰凍切片的應用價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2019年4月至2020年4月于臨床實踐中收集的甲狀腺癌病歷中抽出80例作為觀察對象，均表示對研究知情且同意。所選患者中男45例，女35例；年齡23～70歲，平均年齡為（50.58±3.76）歲；患病類型：單側病變50例，雙側病變30例。納入標準：本次研究所選患者均經甲狀腺手術治療，有完整臨床資料。排除標準：本次研究對合并嚴重感染、凝血功能障礙、其他嚴重惡性腫瘤及肝臟、腎臟等重要臟器功能障礙、精神障礙等疾病，存在手術禁忌、處于特殊生理階段（妊娠期）等患者。

1.2 方法 由手術主治醫師負責切取患者游離后的甲狀腺組織，之后依序完成冰凍切片、石蠟切片。手術醫師進行病理組織切取時需要重點關注甲狀腺組織周圍的病變現象，若發現甲狀腺和周圍組織傾向于癌變，且沒有血色和質地堅硬，需在第一時間切除組織后送檢。①冰凍切片：將切取的甲狀腺組織放置妥當，注入包埋劑后冷凍。當發現有小體積的待檢組織時，需要借助支撐器幫助來成功滴入包埋劑，形成一個小臺，并置入-15 ℃冰箱進行冷凍。冷凍處理后，利用專用切片機，將冷凍的甲狀腺組織制成5 μm厚的薄片。完成切片制作后，用乙醇迅速固定切片組織，且注意固定時間不超過25 s，然后依序進行水洗、著色、密封等處理。②石蠟切片：冷凍切片完成后，用石蠟切片制備其余甲狀腺組織。用10%的甲醛溶液對有關組織進行固定，在乙醇脫水過程中需要有一個梯度的差異。在成功進行脫水處理后，將乙醇和三氯甲烷按1∶1的比例進行混合來完成液態制作。石蠟包埋后，經專用切片機加工完成切片制作，經常規處理后，再用光學顯微鏡對切片組織進行仔細觀察，以確定其病理特征，并作為診斷依據。

1.3 觀察指標 以術后石蠟切片病理診斷為金標準，評估冷凍切片的檢出率、誤診率、延遲診斷率。檢出率判斷依據：對比石蠟切片，診斷結果與之相同或基本相同，即良惡性檢出結果一致，且疾病類型上有差異但不會給手術治療造成影響。誤診判斷依據：冰凍切皮診斷結果和石蠟切片不一致，即前者診斷為惡性，后者為良性，即判斷為假陽性；或石蠟切片診斷顯示惡性，冰凍切片呈現良性，會直接影響后續手術，難以正確選擇術式。延遲診斷率：經冰凍切片病理診斷不能直接確定患者組織病變性質，需進一步借助石蠟切片來進行診斷。記錄兩組切片病理診斷所用檢查時間。

1.4 統計學分析 使用SPSS 22.0統計學軟件進行數據分析，計量資料采用（）表示，組間比較行t檢驗；計數資料采用[n（%）]表示，組間比較行χ2檢驗；P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 冰凍切片與石蠟切片檢查時間 甲狀腺冰凍切片病理診斷時間為（22.54±6.14）min，低于石蠟切片的（2 163.98±409.49）min，組間數據比較差異有統計學意義，t=17.856，P＜0.05。

2.2 冰凍切片與石蠟切片病理診斷率 甲狀腺石蠟切片病理診斷為良性甲狀腺腫瘤、惡性甲狀腺腫瘤和非甲狀腺腫瘤分別25例、33例和22例，其中惡性甲狀腺腫瘤包括3例甲狀腺髓樣癌，15例濾泡狀癌，15例乳頭狀癌。甲狀腺冰凍切片病理診斷為良性甲狀腺腫瘤、惡性甲狀腺腫瘤和非甲狀腺腫瘤分別23例、31例和20例，其中惡性甲狀腺腫瘤包括3例甲狀腺髓樣癌，15例濾泡狀癌，13例乳頭狀癌。參考石蠟切片結果，甲狀腺冰凍切片在鑒別甲狀腺良惡性病變中，檢測檢出率、誤診率和延遲率分別為93.10%（54/58）、5.17%（3/58）、1.73%（1/58）。見表1。

表1 冰凍切片與石蠟切片病理診斷率比較[n（%）]

3 討論

根據臨床表現來看，甲狀腺癌患者一般是在常規體檢中進行甲狀腺觸診和頸部超聲檢查時發現癌腫，可發現小體積的甲狀腺腫塊，且質地堅硬，并不會隨著活動而轉移位置，通常是固定結節[6-7]。在病情發展至后期，甲狀腺癌患者會出現聲音嘶啞、呼吸困難等癥狀。從診斷角度分析此類癌腫，可以從甲狀腺腫塊、頸部淋巴結腫大、壓迫性甲狀腺腫塊、甲狀腺腫塊快速增多等因素綜合考慮，并進一步加大觀察力度。現階段，臨床治療甲狀腺癌仍然是首選綜合治療方法，術后配合內分泌治療有助于強化整體療效[8]。

對于甲狀腺癌患者實施早診斷、早治療可促進其生存率提升。病理診斷一般是通過手術切除病變組織，經固定染色后借助顯微鏡來對病變組織進行全方位觀察，之后根據鏡下顯示的組織結構和細胞病變特征來判斷患者病情[9-10]。當前，臨床大多數首選冰凍切片來進行病理診斷，確定患者手術切除范圍和手術方式，且手術質量直接受冰凍切片的準確率影響。但冰凍切片應用弊端在于取材有較高局限性，制作切片若未合理取材，所得效果則無法達到理想狀態。尤其是乳頭狀癌及毛玻璃狀結節，誤診、漏診問題常有發現，所以臨床需進一步對檢查措施進行優化，盡可能控制好誤診風險。石蠟切片作為病理診斷金標準，但弊端在于耗時較長，給快速制訂手術方案造成了一定局限性。當甲狀腺癌在術前已經確定為惡性后，即刻會安排手術切除腫瘤組織，然后送檢切除的邊緣組織，并根據冰凍切片結果來判斷切除范圍[11-12]。本研究結果顯示，冰凍切片有較高診斷準確率，需要注意的是選擇標本時要游離具有癌變傾向的組織。此外，還要注意冰片切片厚度的合理性控制，過厚、過薄都會對診斷結果造成影響，需加大可以凸顯組織質地的染色操作，并由超過2名且經驗豐富的醫師來判斷診斷結果，若出現疑議則需等待石蠟切片結果來確定手術方案，避免對患者造成不必要的手術創傷[13]。

良惡性甲狀腺癌對患者的機體健康均有不同程度的威脅，盡早治療仍然是提高治療效果的主要原則。甲狀腺患者的臨床表現缺乏特異性，癥狀所存在的較高相似度間接性提高了患者疾病診斷難度。快速冰凍法作為一種病理診斷方法，對比傳統石蠟切片，前者具有操作便捷、檢測速度快等優勢，進而有效評估患者病情，加上確診率較高，可提供較多參考性依據[14]。術后石蠟切片同樣是臨床常用病理學檢查措施之一，也是診斷甲狀腺疾病的金標準，但是操作不足之處在于需要等待較長時間，很可能會導致患者病情錯過最佳治療時機，所以石蠟切片病學診斷對手術操作無指導作用[15]。術中冰凍切片作為一種新型病理檢測方法，可以在手術臺上直接完成患者病灶組織切取，之后置入-20 ℃的環境進行冷凍，成塊狀后切片得出檢測樣本，通常情況下30 min內即可得出結果，便于臨床快速確定癌腫性質來合理選擇手術方式，對提高手術療效有積極的作用。

本研究結果顯示，甲狀腺冰凍切片病理診斷時間低于石蠟切片（P＜0.05）；分析冰凍切片診斷結果，在甲狀腺良惡性病變的檢出率、誤診率、延遲率分別為93.10%、5.17%、1.73%，仍屬于較高水平，說明石蠟切片和冰凍切片均存在一定的優劣勢。冰凍切片操作迅速，可以加快患者診斷結果獲取速率，而石蠟切片需進行脫水、包埋、切片、染色一系列過程，等待結果時間甚至會超過24 h。考慮到冰凍病理切片操作質量和組織切除范圍、深度以及制片質量、閱片人能力等因素有密切的關系，所以想要提高診斷準確率來降低誤診或漏診風險，可以考慮從以下幾點對操作人員的技術水平進行優化：①為了提高取材質量，在對甲狀腺疾病患者病變組織進行取樣時，要選擇有癌變傾向且無血色的組織，從多個解剖面進行觀察并合理選擇切除位置，如果病灶存在包裹現象，取材時必須要選擇包膜的交界組織。②標準操作，強化主刀醫師的訓練，特別是冰凍切片的操作流程，需納入重點考核內容，要求其在進行切片組織冷凍時，避免影響染色效果。切片時要控制適當速率，動作柔和，染色期間要做好沖洗工作，注意速度放緩，避免影響組織膠質。在染色過程中也會發生切片掉色風險，此時要丟棄該切片，并重新進行新的切片處理和制作。在外科手術中，病理診斷醫師在獲取標本后，可以在15 min內迅速得出結果，以指導手術醫師制訂針對性治療方案，而病理檢查的正確與否，與外科醫師在手術臺上的操作有著密切關聯。因此，必須正確、迅速、可靠地進行冰凍切片的病理檢查才能為外科手術提供可靠依據。但由于要在短時間內做出決定實際上仍有較高難度，而且切片的制作品質比石蠟片要差，所以也會有誤診和延遲診斷等情況發生。

綜上所述，甲狀腺冰凍切片在甲狀腺癌病理診斷中，耗時明顯短于石蠟切片，且操作便捷，有較高定性判斷價值，但后者診斷準確率高于前者，所以前者診斷有疑慮時可聯合石蠟切片進行二次診斷，有助于避免癌腫漏診、誤診，為后續制定針對性治療方法提供依據。