抗體檢測聯合核酸檢測對青少年早期艾滋病的檢出效果分析

劉 宇

防城港市第一人民醫院 廣西 防城港 538021

艾滋病是由人類免疫缺陷病毒（HIV）引起的一種免疫系統疾病，主要通過性、血液和母嬰等途徑傳播[1]。在中國，自1985 年出現第1 例HIV 感染病例以來，艾滋病已成為嚴重的社會公共衛生問題，早期診斷對于艾滋病的防控及治療意義重大[2]。目前，抗體檢測常用于診斷艾滋病，但有局限性，窗口期難以準確確定，在這一時期內進行抗體檢測可能會導致艾滋病漏診。核酸檢測通過提取樣本中的病毒核酸，可有效地進行早期艾滋病的診斷。但核酸檢測成本較高，不同檢測方法的檢測靈敏度有所不同。近幾年，抗體檢測聯合核酸檢測被廣泛應用于早期艾滋病的篩查。本文將針對該方法進行分析，探討其在臨床實踐中的應用價值。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2018 年3 月至2023 年3 月收治的80 例青少年艾滋病患者為研究對象，取其首次血樣，經化驗分析，初次抗體陽性但確證試驗（免疫印跡法試驗）不確定，后經二次隨訪且通過蛋白免疫印跡（WB）確證為HIV-1 抗體陽性，結合臨床癥狀及相關檢查判斷為艾滋病早期感染者，收集患者臨床資料進行回顧性分析。80 例患者中男性51 例，女性29 例；年齡10~19 歲，平均（14.31±2.58）歲。

1.2 納入及排除標準

納入標準：①經酶聯免疫吸附試驗法、熒光定量PCR 及WB 蛋白免疫印跡確證者；②自愿參與研究并簽署《知情同意書》者；③臨床資料完整者；④符合《中國艾滋病診療指南（2021 版）》中艾滋病診斷標準者[3]。⑤無肝炎、結核、梅毒等相關病毒感染性疾病者。

排除標準：①臨床資料不完全者；②嚴重認知障礙、精神疾病或視聽障礙、依從性較差者；③合并惡性腫瘤或嚴重臟器衰竭者；④合并心臟病者。

1.3 方法

抗體檢測：按照酶聯免疫吸附試驗法（Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay，ELISA）進行抗體檢測，通過蛋白質聚合反應，利用抗原蛋白包被抗體蛋白，提取一抗的抗體進行孵育，采用三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽緩沖洗滌個體標本，加入適量酶標二抗、底物液顯色，結合標準顯色情況放于ELx 800 型酶標儀上450nm 處，調零室內質控孔、空白孔、陽性對照孔、陰性對照孔后，檢測各孔的吸光度值，完成抗體初篩、復篩檢測。

核酸檢測：經由離心機離心處理后，提取和純化核糖核酸（RNA），執行聚合酶鏈式反應（PCR）擴增實驗，應用瓊脂糖凝膠電泳的方法進行PCR產物的分離和檢測，記錄PCR 產物的大小和結果，并判定檢測結果是陽性或陰性。

1.4 觀察指標

記錄分析兩種檢測結果，計算兩種方式診斷早期艾滋病的診斷符合率進行分析比較。

1.5 統計學處理

應用SPSS22.0 軟件進行處理，n（%）表示計數資料，采用χ2檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2.結果

兩種檢測方式對于青少年早期艾滋病感染者診斷符合率的比較，抗體檢測聯合核酸檢測對青少年早期艾滋病患者的診斷符合率為97.50%，顯著高于抗體檢測83.75%，差異具有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩種檢查方診斷青少年早期艾滋病感染者結果比較［n(%)］

3.討論

艾滋病是一種具有高度傳染性和危害性的免疫系統疾病。艾滋病毒本身不會引發任何疾病，但當患者感染HIV 后，病毒侵襲T 淋巴細胞，造成免疫系統損傷，導致條件致病菌感染及各類腫瘤。隨著全球的交流和人口流動，艾滋病的發病率呈逐年上升趨勢，據聯合國艾滋病規劃署發布的報告，2022 年全球新增約130 萬名艾滋病病毒感染者，共計約3 900 萬人感染艾滋病病毒。同時，近年來亞洲地區艾滋病的感染趨勢呈增長態勢，其流行病學表現復雜多變，主要集中于低中收入國家和特定人群中。盡管目前研制的藥物能夠抑制病毒活性、減緩病程發展，間接減少感染后的死亡率以及致死率，但仍未有藥物能根治艾滋病。艾滋病檢測可以早期發現HIV 感染并及時采取治療措施，減緩疾病的發展，提高患者的生存率。艾滋病在全球范圍內仍存在較高的感染率和傳播率,早期艾滋病的檢出對于保護青少年群體的健康至關重要。

艾滋病目前主要通過性行為、血液等傳播，青少年由于年齡較低，且好奇心強，加上不良同伴的誘導，容易感染艾滋病。及早地發現艾滋病的存在，對于疾病的控制具有顯著的影響。目前，抗體檢測常用于艾滋病的診斷，利用一定的標記技術來檢測血液中存在的HIV 抗體，以判斷受檢者是否感染了HIV。目前常用的檢測方法有酶聯免疫吸附試驗、膠體金免疫層析試驗、磁性顆粒免疫層析試驗等。這些檢測方法具有檢測方便、容易操作等優點[4]。但是，抗體檢測存在的一個局限性是在病毒感染后的短暫時期內抗體可能還未產生，這個時間又稱窗口期，窗口期難以準確確定（特別是免疫印跡法），有概率出現假陰性。因此，在這一時期內進行抗體檢測可能會導致艾滋病的漏診[5]。

核酸檢測是直接檢測病毒RNA 或DNA 來確定是否感染某個病毒，分為定性檢測與定量檢測，常用的檢測方法有實時熒光定量聚合酶鏈式反應（RT-qPCR）和巢式聚合酶鏈式反應（nested-PCR），前者具有更高的準確性和高通量，后者更加靈敏，用于少量樣本血樣的檢測。核酸檢測可在患者病毒感染的早期階段準確檢測出HIV 的存在，對于急性期或窗口期HIV 感染均可診斷，有效降低此時期病毒造成的風險。但核酸檢測成本較高，同時不同的檢測方法對艾滋病的檢測靈敏度有所不同[6]。

可見，抗體檢測和核酸檢測各自具有優缺點，將它們結合使用可以提高早期艾滋病的檢出率。抗體檢測可用于篩查廣泛的人群，快速排除無感染者，核酸檢測可以提供更早的感染檢出率，特別適用于窗口期內的早期感染者。抗體檢測聯合核酸檢測，對青少年早期艾滋病的檢出率具有明顯的優勢，能夠盡早發現感染者，采取及時干預措施，并有效減少疾病傳播的風險。然而，該方法的實施還需考慮成本、設備和專業人員等可行性因素,未來還需要進一步驗證該方法的可行性和有效性。

在臨床中，有定量HIV 核酸檢測和定性HIV核酸檢測兩種類型，其中定性HIV 核酸檢測的主要作用是對診斷HIV 感染進行輔助分析，定量HIV 核酸檢測可以對HIV 感染者的病癥發展情況和抗病毒治療效果做出直接且準確的檢查和判斷。HIV 侵入人體后會展開大量的復制，形成較多的RNA 片段，此時通過病毒載量檢測的方法可以對早期感染的情況展開輔助診斷。隨著人體免疫系統發揮作用，病毒載量會大幅度下降，甚至難以檢測出來，轉而有抗原、抗體出現。但是，當患者體內的HIV 病毒出現大量復制，病毒載量又會再次增加，可見人體內病毒的載量并不是穩定的，受到人體免疫力的影響而波動。患者感染艾滋病病毒前期階段，病毒載量監測結果可以相對較好地反映患者感染情況，在晚期階段，病毒載量監測結果可以為判斷患者的疾病進程提供輔助作用，并幫助患者合理用藥。抗體從產生以后就會一直存在，抗體檢測呈現出的敏感性、特異性等是其他檢測方法不具有的。抗體確證試驗是以抗體檢測方法為基礎實現的，在臨床診斷中是HIV 病毒感染診斷的最佳標準。

本研究對診斷為早期艾滋病的80 例青少年患者進行了回顧性分析，結果顯示采用抗體檢測聯合核酸檢測的診斷符合率顯著高于采用單一抗體檢測的診斷符合率（P ＜0.05）。抗體檢測聯合核酸檢測通過同時檢測HIV 抗體和核酸的方法可以有效提高早期艾滋病的檢出率，縮短診斷時間，減少漏診和誤診的情況，尤其適合低病毒載量的病毒感染者。一些研究已經證實，在感染后的5~14 天內使用抗體檢測聯合核酸檢測可以提高HIV 檢出率的準確性和敏感性。抗體檢測聯合核酸檢測可以縮短艾滋病的診斷時間，從3 個月減少到1 個月，從而更快地進行治療[7]。

抗體檢測聯合核酸檢測還可以提高艾滋病防控的效率和精度。利用該技術篩查艾滋病，可以更準確地確定病毒感染的情況，有助于制定有效的預防和控制措施；治療上可以更好地評估病情，制定更合適的治療方案。這為艾滋病的治療和預防提供了更多的支持。但抗體檢測聯合核酸檢測對于高感染性病毒株的檢出率較低，病毒RNA/DNA 在早期病毒感染期間數量較少，核酸檢測可能導致假陰性結果。抗體檢測聯合核酸檢測的實施需要配備專業的技術人員和實驗室設備，需要嚴格的實驗室操作和管控，操作難度較大。此外，該方法的成本較高，可能對資源匱乏地區造成一定的負擔[8]。

針對HIV 檢測，核酸檢測和抗體檢測是兩種準確率和靈敏度不同的方法，二者聯合，可提高艾滋病的診斷準確率，降低誤診和漏診的概率。抗體檢測聯合核酸檢測技術已經逐漸成為早期艾滋病診斷的重要組成部分，可以提高早期青少年期艾滋病的檢出率，縮短診斷時間，提高艾滋病防控工作的效率和精度，有助于制定有效的防治策略。在實際應用中，抗體檢測聯合核酸檢測技術可以廣泛應用于醫療衛生機構的篩查、邊緣群體的篩查、疫情調查等領域，值得臨床應用。但是本研究所選例數具有一定的局限性，后續還需要進一步完善，以期為青少年早期艾滋病的診斷及治療起到輔助作用。