血清NT-proBNP、TNF-α、D-dimer聯合檢測在慢性心力衰竭診斷中的應用

王新獻,朱衛偉,陳紅軍

(安陽市中醫院檢驗科,河南 安陽 455000)

慢性心力衰竭(CHF)是心臟疾病的終末期階段,也是誘發死亡的主要原因[1]。有研究顯示,在CHF患者中采用血清標志物檢測利于診斷疾病和判斷疾病進展程度[2]。N端腦鈉肽前體(NT-proBNP)在發生心力衰竭時會加速分泌,受外源性影響較少,對心功能評定具有較高靈敏性;腫瘤壞死因子(TNF-α)可反映心肌損傷程度,對疾病早期診斷具有重要意義;D-二聚體(D-dimer)可反映患者機體纖維蛋白溶解系統亢進和凝血途徑的激活,是血栓生成診斷標志物。本文旨在觀察NT-proBNP、TNF-α、D-dimer聯合檢測對CHF疾病診斷的應用價值。報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2018年7月至2020年7月共43例CHF患者作為觀察組,選擇健康體檢者43例作為對照組。其中觀察組43例,男23例,女20例,年齡49～85歲,平均(67.19±6.03)歲,心功能分級:Ⅰ級17例,Ⅱ級15例,Ⅲ級7例,Ⅳ級4例。對照組43例,男22例,女21例,年齡46～88歲,平均(67.28±6.11)歲。(1)納入標準:觀察組患者均符合CHF診斷標準[3],經彩超檢查左心室射血分數≤40%,患者知情。(2)排除標準:患有急性心肌梗死、心肌炎、限制性心臟病。兩組年齡基線資料對比,無統計學意義(P>0.05)。

1.2 方法

NT-proBNP檢測:抽取兩組受檢者空腹靜脈血3mL置于促凝管內,采用美國貝克曼Microfuge 20R型離心機,以3500r/min離心10min,分離血清,采用日立7600全自動生化分析儀內以磁微粒化學發光法檢測。

TNF-α檢測:抽取受檢者靜脈血3mL置于黃色促凝管內,用Microfuge 20R離心機離心,分離血清,采用齊一生物科技有限公司生產的試劑盒,以酶聯免疫吸附法進行檢測。操作步驟如下:分別設置空白對照孔和樣品孔,在包被板樣品孔內加入20μL的1% BSA磷酸鹽緩沖液,加入10μL血清;加樣完成后將其放置在37℃溫浴箱內1h,溫浴完成后將包被板內液體棄去,每孔加入洗滌液,反復清洗3遍,拍干;再將50μL辣根過氧化物酶-抗人IgG復合物加入至樣品孔,隨后溫浴30min,洗滌;之后酶孔加入50μL顯色劑A、50μL顯色劑B,溫浴15～20min,每孔加入50μL終止液,終止反應。使用美谷分子儀器有限公司生產的SpectraMax iD5多功能酶標儀,波長為650nm,讀取TNF-α的OD值。

D-dimer檢測:抽取兩組受檢者2mL置于枸櫞酸鈉抗凝劑1:9抗凝管內,離心分離血清,采用羅氏 Coagu Chek XS型全自動凝血分析儀內,以膠乳免疫比濁法進行檢測。

1.3 觀察指標

觀察組對癥治療3個月后,對比兩組受檢者NT-proBNP、TNF-α、D-dimer水平。

1.4 統計學方法

2 結果

兩組受檢者NT-proBNP、TNF-α、D-dimer水平對比,對照組3個月前后NT-proBNP、TNF-α、D-dimer水平無統計學意義(P>0.05),觀察組治療3個月后NT-proBNP、TNF-α、D-dimer水平均低于治療前,對照組入組時與3個月后均低于觀察組(P<0.05),見表1。

表1 兩組NT-proBNP、TNF-α、D-dimer水平對比

3 討論

CHF發病機制主要是由于心肌病理性重構造成的,造成心衰病情進展的兩個關鍵過程為心肌壞死、自噬、凋亡的發生及神經內分泌系統失衡,其中交感神經興奮和腎素-血管緊張素-醛固酮系統(RAAS)被激活發揮重要作用[4]。目前我國對于CHF疾病的治療和診斷水平顯著提升,但發病率和病死率仍處于居高不下階段。因此,尋找血清標志物評估患者疾病進展程度尤為重要。

CHF疾病發生時,心肌細胞會發生牽張超負荷狀態,此時機體會分泌大量氨基酸前BNP原,通過酶轉變為proBNP,之后進一步轉化為環狀BNP和支鏈結構N端片段(NT-proBNP)。NT-proBNP屬于心源性神經激素,是由腦鈉肽經過血液分解而產生的無活性氨基酸末端腦鈉肽片段,是由心室肌細胞合成分泌的;當心力衰竭發生時心肌細胞負荷加重,心室壁張力增大,造成心肌細胞產生大量的NT-proBNP。NT-proBNP半衰期較長,穩定性高于B型腦鈉肽(BNP),可準確靈敏的反映機體新合成的BNP水平,其具有抑制交感神經興奮性、擴張血管、拮抗RAAS、降低水鈉潴留和利于尿鈉排出的作用,同時可特異性調節新室肌收縮功能。NT-proBNP屬于腦鈉肽前體物質,主要存在于心房細胞質或心房細胞間質組織內,當心房細胞順應性降低時,造成組織血液中斷并通過生成機械性刺激引發心房細胞腺體成分被激活,進而增大NT-proBNP的釋放;其可準確反映心室功能,CHF屬于心肌舒張收縮功能障礙,當疾病發生時患者可出現心肌缺血癥狀,并誘發心臟擴大、體循環瘀血及組織血液灌注不足,使血液中NT-proBNP含量升高[5]。因此,NT-proBNP可作為診斷CHF疾病的重要指標之一。

TNF-α是炎癥反應最為常見的細胞因子,主要是由內皮細胞、巨噬細胞和成纖維細胞分泌而成,當機體受損時TNF-α含量上升,同時具有負性肌力作用,誘導基質金屬蛋白酶活性提高,促使膠原網降解,心室腔擴大,加快心室肌細胞的凋亡,引發機體產生氧化應激反應,使患者機體心功能降低,進而嚴重影響心肌重塑。在心力衰竭疾病進展過程中,TNF-α可作為調節機體免疫功能和代謝過程的細胞因子,具有加強腎素-血管緊張素系統活性、抑制心肌的作用。有文獻指出,TNF-α是CHF患者死亡的獨立危險因子,與患者預后療效密切相關,TNF-α含量每提高一個標準差,心力衰竭危險性增大1.59倍[6]。

血管內皮受損和凝血機制異常均會造成患者機體處于高凝狀態,而CHF患者機體內存在大量的血栓因素,使凝血因子被激活、血小板異常釋放,進而提高血液凝固性,生成血栓。D-dimer是纖溶過程的主要標志物,對血栓性疾病診斷和預后判斷具有重要意義。當CHF疾病發生時,心臟收縮功能出現障礙,心室張力提高,心腔內血液流速降低,提升了心腔內血栓形成;心力衰竭發作時常伴隨免疫系統變化,單核細胞和中性粒細胞上升,淋巴細胞減低,造成血管內皮受損、外周血管出現炎癥反應,血小板聚集及內皮細胞和單核細胞黏附抑制作用均降低,促使血管壁血栓生成;微血栓的生成激活了患者機體內的纖溶-激肽系統和補體系統,造成凝血-纖溶系統功能發生紊亂,使D-dimer含量上升。D-dimer水平提高表示繼發性纖溶活性加強,動脈腔內存在持續性的交聯纖維蛋白,并且生成后降解,D-dimer水平與動脈粥樣硬化程度呈正比,與CHF疾病嚴重程度密切相關[7]。本研究顯示,觀察組入組時和3個月后NT-proBNP、TNF-α、D-dimer水平均高于對照組,對癥治療3個月后低于入組時,提示三種血清標志物聯合檢測可準確反映CHF疾病嚴重程度,為CHF治療提供了有力支持,具有較高的應用價值。

綜上所述,血清NT-proBNP、TNF-α、D-dimer聯合檢測對CHF患者診斷、治療及預后具有重要意義,值得臨床推廣。