探究Ki67、p63、P504s、LIMK1、Cofilin免疫組化檢測在前列腺診斷中的應用

陳詠梅

南通市第二人民醫院病理科，江蘇南通 226002

前列腺癌（prostatic carcinoma,prostatic cancer,PCa）屬于臨床上較為常見的一種惡性腫瘤，老年男性是主要的發病群體，在很多西方國家PCa發病人數居男性惡性腫瘤疾病的第一位[1-3]。而近年來隨著人們生活習慣的變化，我國PCa其發病率也呈逐年上升的趨勢[4]。PCa早期的臨床癥狀并不典型，且發病較隱匿，很多患者在確診時大多已經發展至晚期，因而早期的有效診斷與及時治療對于保證患者的生命健康至關重要[5-6]。目前，臨床上常通過血清前列腺特異性抗原（prostate specific antigen,PSA）檢測及前列腺穿刺活檢來進行前列腺疾病的鑒別與診斷，而PCa患者的早期診斷率也在逐年上升[7]。前列腺穿刺活檢屬于臨床PCa診斷比較可靠的方法，而穿刺活檢其獲取的樣本量極為有限，加之一些病變早期不夠典型，單純依靠HE染色或者光鏡鏡檢，基于微小的可疑性病灶來給出前列腺癌的良惡性診斷，這對任何一個病理醫生來說難度都是相當大的[8]。隨著醫療及科學技術的不斷發展，免疫組化技術在臨床上的運用越來越廣泛[9-11]。本文選取2021年2月—2022年2月南通市第二人民醫院收治的202例行早期穿刺及電切的前列腺患者為研究對象，探究Ki67、p63、P504s、LIMK1、Cofilin免疫組化技術檢測在前列腺病理診斷中的應用價值。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院收治的202例行早期穿刺及電切的前列腺患者為研究對象，所選病例均經醫院醫學倫理委員會批準。其中良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia, BPH）組患者171例，年齡44～75歲，平均（58.26±7.12）歲；血清中PSA含量0～10 μg/L。前列腺癌（PCa）組患者31例，年齡45～74歲，平均（58.22±7.14）歲；血清中PSA含量均＞4 μg/L。兩組的年齡、血清PSA含量等比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。具有可比性。

1.2 納入與排除標準

納入標準：①參與治療前未使用任何有關前列腺的藥物以及化療等；②患者未合并其他原發性的惡性腫瘤疾病；③患者不具有傳染性疾病；④患者的病歷資料齊整；⑤對研究知情并簽署知情同意書。

排除標準：①患者合并患有其他類型的生殖系統相關性疾病；②患者具有肝腎功能障礙；③患者依從性較差。

1.3 方法

對兩組活檢樣本中的腫瘤標志物進行檢測，包括Ki67、p63、P504s、LIMK1及Cofilin，并統計其陽性的檢出情況。對患者其穿刺的活檢樣本進行收集，并以10%的甲醛予以固定，將組織實施常規處理以后再給予石蠟包埋。對制備好的相應蠟塊予以切片，要求切片厚度控制在2 μm，隨后對各切片給予免疫組化染色。而后分別對Ki67、p63、P504s、LIMK1及Cofilin進行一抗染色，將細胞核或是胞漿中有棕黃色顆粒判定為染色陽性。借助光學顯微鏡，以其中的5個視野開展陽性細胞的比例計數，如果陽性細胞的比例在10%以上，則認定是表達陽性。

1.4 觀察指標

對兩組樣本中Ki67、p63、P504s、LIMK1及Cofilin等前列腺標志物相應陽性表達情況進行比較，以病理確診結果作為金標準，統計各免疫指標診斷效能以及聯合診斷效能。其中靈敏度=真陽性例數/（真陽性例數+假陰性例數）×100%；特異度=真陰性例數/（假陽性例數+真陰性例數）×100%；準確度=（真陽性例數+真陰性例數）/總例數×100%。

1.5 統計方法

采用SPSS 20.0統計學軟件處理數據，符合正態分布的計量資料以（±s）表示，組間差異比較以t檢驗，計數資料以頻數（n）及率表示，組間差異比較以χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者各檢測指標的表達量比較

與BPH組患者相比，PCa患者Ki67、P504s、LIMK1及Cofilin指標的表達水平顯著更高，而p63表達量顯著更低，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組患者各檢測指標的表達量比較(±s)

表1 兩組患者各檢測指標的表達量比較(±s)

檢測指標Ki67 p63 P504s LIMK1 Cofilin BPH組（n=171）2.32±0.57 6.80±1.85 2.43±0.85 2.05±0.61 2.28±0.73 PCa組（n=31）7.20±1.47 0.87±0.24 6.93±1.29 8.14±2.33 8.40±1.65 t值32.266 16.678 24.804 29.340 33.781 P值＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

2.2 各免疫指標單獨及聯合診斷的診斷效能比較

Ki67、p63、LIMK1指標單獨檢測PCa的靈敏度均達到90%以上；而P504s和Cofilin指標單獨檢測的靈敏度分別為83.87%、87.10%；Ki67、p63、P504s、LIMK1、Cofilin5項指標聯合檢測的靈敏度、特異度和準確度均較高，分別達到96.77%、98.24%和98.02%。見表2。

表2 各免疫指標單獨及聯合診斷診斷結果比較

3 討論

前列腺癌屬于臨床上較為嚴重的男性惡性腫瘤性疾病，在我國其發病人數較西方國家偏少，但近年來隨著人們生活習慣的變化及人口老齡化趨勢的加重，前列腺癌的發病率呈逐年上升的趨勢[12-14]。PSA屬于臨床上鑒別與診斷PCa最常用的腫瘤標志物，對于PCa的早期診斷具有積極的作用和價值。然而PSA僅具備組織的特異性，缺乏腫瘤的特異性，因而PCa及前列腺炎等疾病的相關手術治療均有可能會造成PSA水平上升，而導致假陽性的出現。

前列腺穿刺活檢屬于臨床上用于PCa鑒別與診斷的金標準，同時PCa與其他類型的腫瘤性疾病不同，其具有特有的形態以及生物學特征。PCa的核異型性、壞死、核分裂以及血管淋巴管等相關惡性指標對于疾病的鑒別與診斷往往影響較小，很少有明顯的核異型性，也不會有單核或是多核的瘤巨細胞出現[15]。臨床上對于PCa的鑒別與病理診斷注重腺體結構是否出現異常以及腫瘤細胞所表現出的異形性或是浸潤現象。因PCa其病理形態比較復雜，加之前列腺病變的病理形態差別很小，導致光鏡下PCa的病理診斷較為困難，通常需輔助以免疫組化協助檢查。

本次研究結果顯示，與BPH組患者相比，PCa患者其Ki67、P504s、LIMK1及Cofilin指標的表達水平顯著更高，而p63表達量顯著更低，這與相關的研究結果相似。何進等[16]報道了Ki67、p63、P504s、LIMK1及Cofilin的PCa診斷陽性率，分別為79.31%、79.31%、82.76%、89.66%、86.21%，本次結果略高于該報道結果。同時統計分析各項指標的診斷效能顯示，Ki67、p63、LIMK13項指標單獨檢測PCa的靈敏度均達到90%以上；而P504s和Cofilin指標單獨檢測的靈敏度分別為83.87%、87.10%；Ki67、p63、P504s、LIMK1、Cofilin5項指標聯合檢測的靈敏度、特異度和準確度均較高，分別達到96.77%、98.24%和98.02%。證實了前列腺癌各相關標志物包括Ki67、p63、P504s、LIMK1以及Cofilin指標的聯合檢測，能夠顯著提升前列腺癌的早期檢出率。進一步說明可以由免疫組化技術對標志物陽性表達進行檢測，有助于明確患者的臨床分期，以制訂具有針對性的臨床治療方案，提升患者的治療效果，并改善其預后[17]。

綜上所述，Ki67、p63、P504s、LIMK1及Cofilin等各前列腺癌的標志物均具有一定的陽性及陰性檢出率，Ki67、p63、P504s、LIMK1及Cofilin等指標聯合檢測在前列腺癌的鑒別和診斷中具有積極的病理診斷意義，在臨床上具有廣闊的推廣價值。