抗酸染色法、蛋白芯片法、MGIT液體培養法三種檢測技術在肺結核中的診斷效能分析

安慶震

聊城市傳染病醫院結核科，山東聊城 252000

肺結核是臨床上常見的呼吸道傳染疾病，由結核分枝桿菌引發，病灶主要是肺組織、氣管和支氣管。在我國傳染疾病中，肺結核具有高傳染率和高病死率的特點，并呈逐年上升的趨勢，也是全球范圍內十大死亡病因之一[1-2]。肺結核的易感人群主要為糖尿病患者、免疫力低下的老年人、艾滋病患者、營養不良者等，因此應定期參加結核病篩查[3]。該疾病的主要傳播途徑是呼吸道飛沫傳播，當肺結核患者咳嗽和談話時，會把結核分枝桿菌傳播到空中，吸入患者有被感染的風險。肺結核的主要病因是結核分枝桿菌，而是否發病還與人體的免疫能力和結核桿菌的數量相關[4-5]。肺結核的早期沒有明顯癥狀，部分患者會出現全身發熱、咳嗽、咳痰或痰中帶血的現象，嚴重患者可能會伴隨結節性紅斑或角膜炎等，影響其生活質量和工作生活，因此快速診斷肺結核患者顯得極為重要[6]。本研究選取2019年11月—2021年12月聊城市傳染病醫院結核科收治的80例疑似肺結核患者，比較抗酸染色法、蛋白芯片法、分枝桿菌生長指示管（mycobacteria growth indicator tube, MGIT）液體培養法的診斷效能，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院收治的80例疑似肺結核患者作為研究對象，男42例，女38例；年齡18～73歲，平均（44.78±8.42）歲；結核分枝桿菌潛伏感染者16例，活動肺結核患者18例，非活動性肺結核患者20例。

1.2 納入與排除標準

納入標準：患者及家屬知曉本研究，并簽署知情同意書；溝通交流未出現障礙患者。

排除標準：依從性較低，不能完成此次研究中相關評估患者；合并惡性腫瘤疾病患者；中途退出研究或檔案缺失患者。

1.3 方法

1.3.1 標本來源和要求 標本來源：80例疑似肺結核患者的痰標本由結核科提供。標本要求：晨間采集痰標本，樣本量為3～6 mL；2～8℃的環境下保存，存放時間≤48 h。

1.3.2 檢測方法 ①抗酸染色法：將干燥后的涂片放置于染色架，滴入石碳酸紅染液后完全覆蓋在痰膜上，出現蒸汽后脫離火焰，靜置5 min，染色時要保持痰膜完全被染液蓋住，若染液不足可繼續添加，勿將染液沸騰；染色時間到后用流水沖去染色液體，擦干標本上的水；在痰膜上滴入脫色劑完全覆蓋在痰膜上進行脫色，脫色時間為3 min，流水洗去脫色液后至無可視紅色為止，流水洗去脫色液并擦干剩余的水后，滴入亞甲藍復染液，染色30 s，用流水洗去復染液，瀝干玻璃片上剩余水，待玻璃片干后放入油鏡下檢測。②蛋白芯片法：在芯片上標記血液樣本的標號，在芯片盒內滴入200 μl試劑A，將痰膜完全浸濕，將準備好的100 μl血清樣本加入窗口中后等待完全浸濕，再加入300 μl試劑B，待試劑B浸濕后再加入500 μl試劑C；待試劑完全浸濕后再滴入300 μl試劑D，芯片反應30 min以內，將芯片盒里的小光盤放入識別儀器等待分析結果。結核桿菌包括 核分枝桿菌細胞壁成分脂阿拉伯甘露聚糖（lipoar abino mannan, LAM）、16 KDa、38 KDa共3種特異性抗體，若其中一項抗體為陽性，則結果為陽性。③MGIT液體培養法：將檢測卡編號備用，將血清樣本加入加樣孔中，同時加入100 μl稀釋液，等待3～5 min顯示結果，結果在15 min內有效。

1.4 觀察指標

①統計所有患者抗酸染色法、蛋白芯片法及MGIT液體培養法檢測結果，以臨床癥狀綜合分析和影像學為金標準。②對比3種方法檢測結果對肺結核疾病的診斷效能，靈敏度=真陽性例數/（真陽性例數+假陰性例數）×100%；特異性=真陰性例數/（真陰性例數+假陽性例數）×100%；準確率=（真陽性例數+真陰性例數）/總例數×100%。

1.5 統計方法

采用SPSS 21.0統計學軟件進行數據分析，計數資料以例數（n）和率表示，進行χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 抗酸染色法檢測結果統計

80例疑似肺結核患者經金標準檢測后確診為肺結核73例。抗酸染色法診斷肺結核的靈敏度為79.45%（58/73），特異性為57.14%（4/7），準確率為77.50%（62/80）。見表1。

表1 抗酸染色法檢測結果統計（n）

2.2 蛋白芯片法檢測結果統計

蛋白芯片法診斷肺結核的靈敏度為98.63%（72/73），特異性為100.00%（7/7），準確率為98.75%（79/80）。見表2。

表2 蛋白芯片法檢測結果統計（n）

2.3 MGIT液體培養法檢測結果統計

MGIT液體培養法診斷肺結核的靈敏度為97.26%（71/73），特異性為85.71%（6/7），準確率為96.25%（77/80）。見表3。

表3 MGIT液體培養法檢測結果統計（n）

2.4 3種檢查方式診斷效能比較

MGIT液體培養法與蛋白芯片法診斷肺結核的靈敏度、特異性與準確率均高于抗酸染色法，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表4。

表4 抗酸染色法、蛋白芯片法及MGIT液體培養法對肺結核疾病的診斷效能比較（%）

3 討論

結核病是一種慢性傳染疾病，隨著人口增加，人口移民、艾滋病患者增多等因素，結核病的防治工作十分嚴峻，老年肺結核呈高病死率[7-8]。根據疾病類型和病理特征，可將其分為結核分枝桿菌潛伏感染者、活動肺結核患者及非活動性肺結核，分枝桿菌潛伏感染者和非活動性肺結核傳染性較低，而活動肺結核患者具有較高的傳染性[9-10]。該疾病主要傳染源為確診患者痰中攜帶結核分枝桿菌，但感染菌者不一定會傳染他人，一般情況下，機體的免疫系統可以將部分結核分枝桿菌消滅，但仍有少量結核分枝桿菌存在體內且處于休眠狀態，當機體免疫力下降時，結核菌可能會開始活躍[11-12]，因此及時診斷結核病癥顯得尤為重要。隨著醫學的不斷發展，對肺結核的診斷方法也在不斷提高，為肺結核尋找更為科學合理的檢測方法是不容忽視的。

研究結果顯示，以臨床癥狀評估及影像學方法檢查結果為金標準，抗酸染色法診斷肺結核的靈敏度為79.45%，特異性為57.14%，準確率為77.50%；蛋白芯片法診斷肺結核的靈敏度為98.63%，特異性為100.00%，準確率為98.75%；MGIT液體培養法診斷肺結核的靈敏度為97.26%，特異性為85.71%，準確率為96.25%。MGIT液體培養法與蛋白芯片法診斷肺結核的靈敏度、特異性與準確率相似（P＞0.05）；兩項檢測方式的準確率均高于抗酸染色法（P＜0.05）。丁海霞等[13]在研究中選擇了180例疑似肺結核患者分別采用蛋白芯片法與抗酸染色法進行檢測，研究中蛋白芯片法診斷靈敏度（93.44%）、特異性（93.28%）及準確率（93.33%）均高于抗酸染色法的80.33%、88.24%、85.56%（P＜0.05），與本研究結果相似。抗酸染色法是目前診斷較快的檢測方法，具有簡單、快速等優點，但是陽性檢出率較低，存在一定的診斷問題。當人體感染結核分枝桿菌時，免疫系統會產生抗體來抵御感染，蛋白芯片法則是一種通過微型芯片檢測多種蛋白質結合情況的方法，這種檢測方法可以檢測多種抗體和蛋白質的結合情況，從而提高診斷的準確性和可靠性[13]。MGIT液體培養法在結核分枝桿菌檢測應用中具有檢出率高、檢查快、操作簡單、經濟便捷等優點，其檢測結果基本不會受外界因素所影響，因此最終診斷結果較為可靠[14]。

綜上所述，蛋白芯片檢測肺結核病相較于抗酸染色法具有更高的靈敏度、特異性與準確率，在肺結核患者的診斷中采用MGIT液體培養法、抗酸染色法、蛋白芯片法聯合檢測，可以提高準確性，值得臨床推廣。