小兒消化性潰瘍與Treg/Th17免疫平衡的關系

羅沖,張向東,劉曉政,夏永欣

(南陽市中心醫院 消化內科,河南 南陽 473000)

消化性潰瘍是一種臨床上常見的胃腸道疾病,好發于小兒,以惡心、嘔血、腹痛、便血等臨床癥狀較為常見,嚴重影響兒童的正常身體發育[1]。目前,藥物治療仍然是小兒消化性潰瘍的首選治療方案,奧美拉唑三聯療法可改善小兒消化性潰瘍的臨床癥狀,但仍然存在部分患兒停藥復發等現象,目前臨床上尚缺乏有效的特異性指標預測小兒消化性潰瘍治療后復發[2-3]。報道顯示,消化性潰瘍發生、發展與機體的免疫失衡密切相關,調節性T淋巴細胞(regulatory T cell,Treg)是機體細胞免疫的重要組成部分,能夠與輔助性T細胞17(T helper cell 17,Th17)共同作用來維持機體的免疫平衡[4]。相關研究指出,幽門螺桿菌(helicobacter pylori,HP)能夠激活Th17細胞的免疫應答,使得CD4+T淋巴細胞向Th17細胞分化,會造成Th17細胞的增加,從而破壞機體內Treg/Th17的免疫平衡[5]。目前,國內有關小兒消化性潰瘍與Treg/Th17免疫平衡的關系的研究尚少,鑒于此,本研究選取南陽市中心醫院收治的125例小兒消化性潰瘍患者為研究對象,期望為臨床診治提供指導。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2018年5月至2020年4月南陽市中心醫院收治的125例小兒消化性潰瘍為研究組,另選擇同時間段來醫院的59例健康體檢兒童為對照組。其中對照組中男42例,女17例;年齡3～16歲,平均(9.27±3.34)歲;研究組中男89例,女36例;年齡3～15歲,平均(9.14±3.25)歲。兩組性別、年齡比較,差異無統計學意義(P>0.05)。(1)納入標準:①參照《小兒慢性胃炎、消化性潰瘍胃鏡診斷標準》[6],患兒符合消化性潰瘍的診斷標準,且經胃鏡證實;②HP感染陽性(經Giemsa試驗、14C-尿素呼氣試驗等確診)[7];③患兒家屬簽署知情同意書。(2)排除標準:①既往有消化道手術史;②合并惡性腫瘤;③臨床懷疑為癌前病變;④伴有穿孔、出血等并發癥;⑤對本研究治療藥物過敏;⑥肝腎等器官功能不全;⑦合并甲狀腺功能亢進。該研究已獲得南陽市中心醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 研究方法

1.2.1治療方法

所有患兒均接受奧美拉唑三聯療法,口服阿司匹林膠囊(國藥準字H11022562,北京曙光藥業有限責任公司),50 mg·(kg·d)-1;口服克拉霉素膠囊(國藥準字H20010664,北京順鑫祥云藥業有限責任公司),10 mg·(kg·d)-1;口服奧美拉唑腸溶膠囊(國藥準字H20113502,上海美優制藥有限公司),0.8 mg·(kg·d)-1,所有患兒均持續治療2周后觀察效果,治療期間患兒均接受常規流質食物。

1.2.2Treg/Th17的檢測方法

體檢當天采集對照組兒童3 mL空腹靜脈血,治療前、治療2周后分別采集研究組患兒3 mL空腹靜脈血,通過乙二胺四乙酸鈉進行抗凝,采用密度梯度離心法分離兩組外周血單核細胞,采用流式細胞儀CyFlow Cube6流式細胞儀(廣州吉源生物)檢測兩組Treg細胞與Th17細胞,并計算Treg/Th17,抗體及試劑盒均購自上海圻明生物科技有限公司。

1.2.3隨訪及收集資料

治療2周后,采用電話或門診復查方式進行隨訪,隨訪治療2周后HP根除者,隨訪1 a,每月復查1次,以Giemsa試驗、14C-尿素呼氣試驗等[8]確診為幽門螺桿菌感染陽性為復發,否則記為未復發。采集可能引起患兒治療后復發的臨床資料,包括性別、年齡、病程、抗生素濫用史(不經醫生指導更換抗生素種類、延長抗生素療程或不經醫院檢查患兒家屬隨機給患兒服用抗生素)和治療前、治療2周后實驗室指標,包括γ-干擾素(interferon-γ,IFN-γ)、白蛋白、血紅蛋白、總蛋白、白細胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、Treg/Th17。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 Treg/Th17

治療前,研究組Treg/Th17高于對照組(P<0.05);治療2周后,研究組Treg/Th17低于治療前(P<0.05),且高于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 對照組、研究組Treg/Th17比較

2.2 小兒消化性潰瘍HP根除率與復發情況

125例患兒中,HP根除119例,HP根除率為95.20%,隨訪119例HP根除者1 a,失訪2例,117例小兒消化性潰瘍中復發26例,復發率為22.22%,未復發者91例。

2.3 復發者與未復發者的臨床資料

復發者年齡低于未復發者(P<0.05),復發者有抗生素濫用史例數占比、治療2周后IFN-γ、Treg/Th17高于未復發者(P<0.05),見表2。

表2 復發者與未復發者的臨床資料比較

2.4 小兒消化性潰瘍治療后1 a內復發的logistic回歸分析

以小兒消化性潰瘍治療后1 a內是否復發為因變量(是=1,否=0),以年齡、是否有抗生素濫用史、治療2周后IFN-γ、Treg/Th17為自變量進行logistic回歸分析(有抗生素濫用史=1,無抗生素濫用史=0;其余均為連續變量),結果顯示,有抗生素濫用史、年齡、治療2周后Treg/Th17均為小兒消化性潰瘍治療后1 a內復發的危險因素(P<0.05)。見表3。

表3 小兒消化性潰瘍治療后1年內復發的logistic回歸分析

2.5 治療2周后Treg/Th17對小兒消化性潰瘍治療后1 a內復發的預測價值

ROC曲線結果顯示,治療2周后Treg/Th17預測小兒消化性潰瘍治療后1 a內復發的AUC值為0.786(P<0.05),見表4。

表4 治療2周后Treg/Th17對小兒消化性潰瘍治療后1 a內復發的預測價值

3 討論

目前,消化性潰瘍的發病機制尚不明確,有研究指出,其發生可能與內分泌失常、飲食不當、HP感染、神經功能失調等因素有關[9-10]。臨床治療小兒消化性潰瘍多以藥物治療為主,旨在降低疾病復發風險,促進潰瘍愈合[11]。有研究表明,當HP侵襲機體時,會引起機體的免疫細胞未能及時活化或活化功能減弱,自身抵御HP感染的難度較大,加之小兒免疫功能低下,易引起HP感染[12]。有報道指出,尋求消化性潰瘍患兒治療后復發的危險因素有助于臨床擬定治療方案,改善預后[13]。既往研究指出,Treg/Th17在維持機體免疫平衡及內環境穩定中具有重要作用[14]。為探討小兒消化性潰瘍與Treg/Th17免疫平衡的關系,本研究采取前瞻性研究反復進行分析,旨在為臨床擬定治療方案提供指導依據。

相關研究表明,小兒消化性潰瘍免疫功能失衡,Treg細胞作為T細胞亞群的重要組成部分,可發揮較強的免疫抑制作用,可在趨化因子的作用下,遷移至機體免疫應答局部,從而抑制靶細胞表面的白細胞介素-2受體α鏈抗體,從而對靶細胞的活化與增殖產生抑制;Treg可分泌白細胞介素-10等諸多抑制性細胞因子,從而發揮免疫抑制作用,在呼吸道感染等多種免疫疾病中存在結構與功能的改變[15]。相關研究指出,Treg與Th17既相互聯系,又相互抑制,在正常生理狀態下保持動態平衡,能夠維持機體免疫平衡與內環境穩定[16-17]。國內有研究證實Th17細胞介導的免疫應答在HP相關性疾病中發揮著重要作用[18]。本研究結果顯示,治療前研究組Treg/Th17占比高于對照組,提示相比于健康兒童,小兒消化性潰瘍Treg/Th17異常,應引起臨床的重視。本研究結果顯示,治療后研究組Treg/Th17低于治療前,提示采用奧美拉唑三聯療法治療小兒消化性潰瘍,可調節Treg/Th17免疫平衡。本研究logistic回歸分析結果顯示,有抗生素濫用史、年齡、治療2周后Treg/Th17均為小兒消化性潰瘍治療后1 a內復發的危險因素。本研究中,治療2周后Treg/Th17預測消化性潰瘍患兒治療后1 a內復發的最佳截斷點為0.64,靈敏度、特異度、約登指數及AUC(95% CI)分別為76.92%、75.82%、0.527及0.786(0.694～0.877),提示治療2周后Treg/Th17預測消化性潰瘍患兒治療后1 a內復發效能較高,值得推廣使用。

4 結論

小兒消化性潰瘍Treg/Th17異常升高,治療2周后Treg/Th17與預后復發相關,且可作為小兒消化性潰瘍治療后1 a內復發的敏感指標。然而,本研究隨訪年限及樣本選取有限,后續仍需要擴大樣本量、延長隨訪時間來深入探討小兒消化性潰瘍與Treg/Th17免疫平衡的關系。