高效價冷凝集素對輸血相容性的準確性與安全性研究

葉祖興 林金美

輸血是臨床常用的治療方法，在嚴重外傷出血、內(nèi)臟出血、術(shù)中出血患者的治療過程中，需要及時補充血容量，為患者輸注全血或紅細胞[1]。在貧血患者的治療中，可以通過輸注紅細胞的方式，改善患者的貧血癥狀。在輸血治療前，需進行血型鑒定和交叉配血試驗，判斷輸血相容性。存在血型不合的抗原-抗體反應(yīng)，或是在配血不相合的情況下，無法進行輸血[2]。輸血相容性檢測結(jié)果的準確性，關(guān)系著輸血治療的安全性。為了保障輸血的安全性，需要考慮影響輸血相容性檢測過程中的干擾因素，采取針對性的預(yù)防措施[3]。在交叉配血試驗中，主要根據(jù)凝集反應(yīng)的發(fā)生，判斷有無配血不合的現(xiàn)象。冷凝集素效價過高的情況下，會對輸血相容性檢測形成干擾，引起配血不合[4]。蛋白樣凝集的發(fā)生，也會影響輸血相容性檢測結(jié)果的準確性。針對輸血相容性檢測不合現(xiàn)象的發(fā)生，應(yīng)該考慮高效價冷凝集素、蛋白樣凝集的影響，進而采取有效的處理對策，保障輸血治療安全、順利進行[5]。本研究選取2019年4月—2022年3月在輸血科進行輸血相容性檢測的血液樣本進行研究，針對出現(xiàn)強凝集現(xiàn)象的輸血相容性檢測不合的27份血液樣本進行分析，探討提高檢測結(jié)果準確性、保障輸血治療安全性的有效措施。

1 資料與方法

1.1 一般資料

于2019年4月—2022年3月在輸血科進行輸血相容性檢測的血液樣本中，選取291份輸血相容性檢測不合的血液樣本進行研究分析，其中27份血液樣本出現(xiàn)強凝集現(xiàn)象（冷凝集素效價過高，蛋白樣凝集等）。發(fā)生強凝集現(xiàn)象的血液樣本來自27例患者，男性17例，女性10例，年齡24～78歲，平均（51.43±7.65）歲。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準。

1.2 方法

準備好血型鑒定、直接抗人球蛋白試驗、抗體篩查、交叉配血試驗所需的試劑（購自上海血液生物醫(yī)藥有限公司的抗-A單克隆抗體、抗-B單克隆抗體、抗-D單克隆抗體、譜細胞、抗人球蛋白試劑、ABO血型反定型紅細胞及購自長春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司的二巰基乙醇、抗人球蛋白卡等）、試驗設(shè)備（水浴箱、離心機、顯微鏡等）。

在紅細胞處理的過程中，使用生理鹽水進行洗滌。洗滌3次后，形成紅細胞懸液（2%）。通過鏡檢，確認無凝集現(xiàn)象后，應(yīng)用于輸血相容性檢測。針對自身凝集紅細胞的處理，應(yīng)用45 ℃左右的生理鹽水。洗滌6次后，形成紅細胞懸液（2%）。鏡檢結(jié)果提示無凝集現(xiàn)象，實施輸血相容性檢測。鏡檢結(jié)果提示凝集時，加二巰基乙醇，在37 ℃的條件下，水浴30 min，進行洗滌。將無凝集的紅細胞應(yīng)用于各項試驗（血型鑒定、抗人球蛋白試驗、交叉配血試驗等）。

在血清處理的過程中，選取獻血者紅細胞（O型），經(jīng)過洗滌后與患者血清混合（1:1）。或者取患者紅細胞洗滌后與患者血清混合（1:1）。在4 ℃的條件下，吸收60 min。在血清中加入二巰基乙醇，在37℃的條件下，水浴30 min。完成上述操作后，進行輸血相容性檢測。

在測定冷凝集素時，針對血清進行倍比稀釋處理（試管法），加入試劑O細胞懸液，于4 ℃孵育60 min。經(jīng)離心處理（3000 r/min，15 s）后進行冷凝集素效價的測定。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）血液標(biāo)本處理前后的血型鑒定結(jié)果： 在血液標(biāo)本處理前后，對于不同血型（A、B、O、AB）患者的血型鑒定結(jié)果進行分析。

（2）直接抗人球蛋白試驗結(jié)果：在血液標(biāo)本處理前后，進行直接抗人球蛋白試驗，比較自身免疫性貧血、冷凝集素綜合征、骨髓異常增生綜合征、多發(fā)性骨髓瘤等不同疾病患者之間的差異性。

2 結(jié)果

2.1 血液標(biāo)本處理前后的血型鑒定結(jié)果

在血液標(biāo)本處理前后，對于A型患者（n＝8）、B型患者（n＝7）、O型患者（n＝10）、AB型患者（n＝2）的血型鑒定結(jié)果進行對照分析，見表1。

表1 血液標(biāo)本處理前后的血型鑒定結(jié)果分析

2.2 血液標(biāo)本處理前后的直接抗人球蛋白試驗結(jié)果分析

在27例患者（自身免疫性貧血4例，冷凝集素綜合征12例，骨髓異常增生綜合征5例，多發(fā)性骨髓瘤6例）中，比較血液樣本經(jīng)過處理前后的直接抗人球蛋白試驗結(jié)果（多抗、抗-IgG、抗-C3d、AB漿），見表2。

表2 血液標(biāo)本處理前后的直接抗人球蛋白試驗結(jié)果分析

2.3 輸血相容性檢測不合現(xiàn)象的發(fā)生原因

在27份發(fā)生輸血相容性檢測不合現(xiàn)象的樣本中，12例與高效價冷凝集素有關(guān)，6例受到蛋白樣凝集的影響。另外，冷凝集素伴同種抗體（5例）、冷凝集素伴有自身抗體（4例）也是導(dǎo)致輸血相容性檢測不合現(xiàn)象的發(fā)生原因。

2.4 冷凝集素效價測定

在21例患者中，冷凝集素效價為128～512、1024、2048的患者分別為18 、2 、 1 例。

3 討論

在嚴重外傷出血、內(nèi)臟出血、術(shù)中出血、貧血等情況下，患者需要接受輸血治療，達到補充血容量、增進血液攜氧能力的目的。在輸血治療的過程中，為了保障治療的安全性，需要嚴格進行血型鑒定和交叉配血試驗[6]。結(jié)合血型鑒定結(jié)果，嚴格按照配型原則，選擇與受血者血型相合的供血者。實施交叉配血試驗，評價輸血相容性。在輸血相容性不合的情況下，無法進行輸血。在輸血相容性檢測中，為了獲得精準的檢測結(jié)果，為輸血治療提供可靠的參考依據(jù)[7]。需要加強對各類干擾因素的排查、防控。在健康人群中，冷凝集素對于輸血相容性檢測結(jié)果的影響不大；但是受到疾病的影響，部分患者會出現(xiàn)冷凝集素效價升高的影響，容易產(chǎn)生交叉配血不合的現(xiàn)象。在高效價冷凝集素的影響下，會引起紅細胞凝集，導(dǎo)致配血不合[8]。

在血型鑒定、交叉配血試驗的基礎(chǔ)上，還需要進行抗體篩查，并對陽性抗體特異性進行鑒定。受到專于O細胞反應(yīng)的抗體（抗-I、抗-H、抗-HI）、高頻抗原的抗體、針對譜細胞保養(yǎng)液成分的抗體的影響，抗體篩查提示陽性，通過抗體特異性鑒定反應(yīng)格局強度基本相同，自身對照陰性[9]。若存在自身抗體、同時有同種抗體與自身抗體、類抗體、冷凝集、假凝集等因素的影響，則抗體篩查提示陽性[10]，通過抗體特異性鑒定反應(yīng)強度基本相同，但是自身對照陽性。若存在自身抗體全部吸附于紅細胞上、補體C3陽性、輸血反應(yīng)產(chǎn)生同種抗體完全吸附于輸入的紅細胞上等情況，則抗體篩查可提示陰性，自身對照陽性[11]。

針對輸血相容性檢測不合的血液樣本進行研究分析，除高效價冷凝集素之外，還存在著蛋白樣凝集的現(xiàn)象，紅細胞呈緡錢狀，與疾病引起的異常免疫球蛋白增加、血清蛋白比例改變有關(guān)[12]。紅細胞發(fā)生緡錢狀凝集后，會對血型鑒定、交叉配血試驗形成干擾，影響輸血相容性檢測結(jié)果，無法為輸血治療提供可靠的參考依據(jù)[13]。為了獲得精準的輸血相容性檢測結(jié)果，需要針對高效價冷凝集素、蛋白樣凝集等問題，采取有效的處理措施。應(yīng)用45℃左右的生理鹽水，進行紅細胞洗滌。確認無紅細胞凝集現(xiàn)象后，可以更加準確地進行輸血相容性檢測，安全進行輸血治療；或是應(yīng)用生理鹽水置換血漿的方式，二巰基乙醇進行處理，避免出現(xiàn)紅細胞凝集的情況[14]。經(jīng)過有效地處理后，減少輸血相容性檢測的干擾性因素，進而為輸血治療安全、順利地進行提供保障[15]。

本研究結(jié)果顯示，結(jié)合血型鑒定、交叉配血試驗結(jié)果進行分析，存在著正反定型不符、交叉配血不合的情況，高效價冷凝集素、蛋白樣凝集是主要的影響因素。在直接抗人球蛋白試驗中，冷凝集素綜合征患者、骨髓異常增生綜合征患者、多發(fā)性骨髓瘤患者均為抗-IgG陽性、AB漿陽性。經(jīng)過有效處理后，直接抗人球蛋白試驗結(jié)果顯示，冷凝集素綜合征患者、骨髓異常增生綜合征患者、多發(fā)性骨髓瘤患者均為抗-IgG陰性、AB漿陰性。在27份發(fā)生輸血相容性檢測不合現(xiàn)象的樣本中，除了高效價冷凝集素（12例）、蛋白樣凝集（6例）之外，還會受到冷凝集素伴同種抗體（5例）、冷凝集素伴有自身抗體（4例）的影響。經(jīng)過溫生理鹽水洗滌紅細胞、鹽水置換、二巰基乙醇等方法進行處理，可以減少高效價冷凝集素、蛋白樣凝集等問題；進而精準地進行輸血相容性檢測，結(jié)合檢查結(jié)果真實、準確地反映輸血治療的安全性。

綜上所述，保障輸血相容性檢測的準確性，有助于提高輸血治療的安全性。針對高效價冷凝集素、蛋白樣凝集等問題對于檢測結(jié)果的影響，采取有效的處理措施，排除輸血相容性檢測過程中的干擾因素，獲得精準的檢測結(jié)果，才能保證輸血治療的安全性。