氣質(zhì)聯(lián)用法測定苯胺靈殘留量實(shí)驗(yàn)教學(xué)

張璐薇， 李珂嘉， 王鴻偉， 趙 宏， 彭錦峰

（西安交通大學(xué)儀器科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，西安 710049）

0 引言

“食品化學(xué)”是食品科學(xué)與工程專業(yè)最主要的專業(yè)基礎(chǔ)課和相關(guān)學(xué)科的骨干課程之一［1］。就我校開設(shè)的食品測控技術(shù)與儀器專業(yè)方向而言，食品化學(xué)課程為多學(xué)科交叉中——食品工程專業(yè)模塊的核心課程。該課程主要從化學(xué)和分子水平角度講述與食品有關(guān)的化學(xué)知識，包括食品中的營養(yǎng)素、添加劑、風(fēng)味成分、有害物質(zhì)等相關(guān)知識，是一門理論聯(lián)系實(shí)際較強(qiáng)的課程［2］。隨著我國在2016 年正式加入國際工程聯(lián)盟的“華盛頓協(xié)議”，國內(nèi)工科高校的本科教學(xué)更加重視創(chuàng)新能力和工程實(shí)踐能力的培養(yǎng)，而實(shí)驗(yàn)教學(xué)是培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)新意識和實(shí)踐能力的重要環(huán)節(jié)［3］。根據(jù)本專業(yè)方向培養(yǎng)學(xué)生的要求和目標(biāo)，將食品化學(xué)和現(xiàn)代儀器分析兩門專業(yè)課程進(jìn)行緊密結(jié)合，特開設(shè)了蔬菜中農(nóng)藥苯胺靈殘留量的測定——?dú)庀嗌V-串聯(lián)質(zhì)譜法實(shí)驗(yàn)。

農(nóng)藥是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中必不可少的生產(chǎn)資料，在生物災(zāi)害防治和糧食增產(chǎn)中發(fā)揮著重要作用［4］。農(nóng)藥的濫用和過量使用會造成環(huán)境污染與農(nóng)藥殘留超標(biāo)，進(jìn)而對人類產(chǎn)生急性或慢性的毒害作用［5］。苯胺靈（N-苯氨基甲酸異丙酯）是一種土壤除草劑，主要用于大豆、甜菜、棉花、蔬菜、煙草地中防、除一年生禾本科雜草。作為苯胺類的除草劑，它的毒性比較大，若進(jìn)入人體，易通過血腦屏障而與含大量類脂質(zhì)的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生作用，從而損害神經(jīng)系統(tǒng)［6］。開展農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留分析及相應(yīng)的監(jiān)管是保障消費(fèi)者食品安全的重要手段，受到各國政府及公眾的廣泛關(guān)注［7］。因此，采用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法對農(nóng)藥苯胺靈進(jìn)行殘留量的測定，為評估帶有苯胺靈的膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)提供科學(xué)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)過程包括樣品制備、提取、凈化、濃縮、上機(jī)測定及數(shù)據(jù)處理等復(fù)雜流程，耗時(shí)長，步驟繁瑣。如何讓學(xué)生在實(shí)驗(yàn)過程中做到心中有數(shù)、有條不紊是實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中需要關(guān)注的重點(diǎn)問題，既使學(xué)生掌握了分析儀器的原理及實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范，又加強(qiáng)對食品安全法規(guī)的理解及運(yùn)用?；诖耍疚慕⒘嗽敿?xì)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，對關(guān)鍵步驟進(jìn)行了總結(jié)歸納，提出了“4-3-2-1”的樣品前處理流程，從試劑耗材清單準(zhǔn)備到樣品前處理、上機(jī)分析測定及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理，進(jìn)行了全方位的規(guī)定，在實(shí)際操作過程中，重點(diǎn)講授學(xué)生應(yīng)特別注意的關(guān)鍵步驟，結(jié)合最終實(shí)驗(yàn)結(jié)果，分析關(guān)鍵步驟對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，從而使學(xué)生養(yǎng)成“粗細(xì)結(jié)合，關(guān)注核心”的食品測控技術(shù)實(shí)驗(yàn)習(xí)慣。

1 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與步驟

1.1 實(shí)驗(yàn)主要內(nèi)容

為建立氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測定蔬菜中苯胺靈（除草劑）殘留量的分析方法，采用Rtx-5 色譜柱（30 m×0.25 mm ×0.25 μm）進(jìn)行分離，質(zhì)譜以選擇離子掃描模式進(jìn)行檢測，同位素外標(biāo)法定量，對100 mg／L的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)。在優(yōu)化的條件下，苯胺靈在0.5 ～10 mg／mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.9997。樣品加標(biāo)平均回收率為75% ～110%。本實(shí)驗(yàn)的開設(shè)不但可簡便、快速、準(zhǔn)確對蔬菜中苯胺靈殘留量進(jìn)行測定，也可使學(xué)生掌握樣品前處理過程與氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)及方法，加深對這一新型分析儀器與檢測原理的認(rèn)知。

1.2 樣品前處理規(guī)程

樣品前處理需按“4-3-2-1”流程進(jìn)行，即4 份樣品制備（2 份平行樣+2 份加標(biāo)樣）、3 次提取、2 次氮吹濃縮、1 次凈化。這些環(huán)節(jié)相對獨(dú)立又相輔相成，每個環(huán)節(jié)都很重要，如果其中某個步驟出現(xiàn)失誤，則會影響整個實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性，造成實(shí)驗(yàn)加標(biāo)回收率過高或過低，從而無法驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)方法的可靠性。學(xué)生雖然有生命科學(xué)導(dǎo)論、無機(jī)與分析化學(xué)、有機(jī)化學(xué)等基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)操作經(jīng)驗(yàn)，但第一次接觸專業(yè)實(shí)驗(yàn)，存在實(shí)驗(yàn)試劑、儀器較陌生，基礎(chǔ)操作薄弱等問題，實(shí)驗(yàn)中又涉及農(nóng)藥、揮發(fā)性有機(jī)溶劑等，相較之前的基礎(chǔ)科學(xué)類實(shí)驗(yàn)，本實(shí)驗(yàn)更復(fù)雜、操作步驟繁瑣、注意事項(xiàng)較多且具有一定危險(xiǎn)性，加上操作不熟悉，很容易在實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)人為因素導(dǎo)致的數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確，從而對實(shí)驗(yàn)結(jié)果有影響。為了培養(yǎng)學(xué)生具備扎實(shí)的食品質(zhì)量與安全理論基礎(chǔ)，降低失誤率，保證實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量，促進(jìn)實(shí)操素質(zhì)提升，需要對實(shí)驗(yàn)進(jìn)行合理統(tǒng)籌規(guī)劃，嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)規(guī)范——標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（Standard Operating Procedures，SOP）進(jìn)行，易出錯環(huán)節(jié)進(jìn)行重點(diǎn)講解與提醒，使學(xué)生主觀上更細(xì)心，有條不紊地合理構(gòu)思，有利于培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真的科學(xué)實(shí)驗(yàn)態(tài)度，為培養(yǎng)高素質(zhì)的應(yīng)用型人才奠定必要的實(shí)驗(yàn)操作基礎(chǔ)，從而實(shí)現(xiàn)培養(yǎng)具有國際視野的食品安全領(lǐng)軍人才及卓越工程師這一目標(biāo)。

1.3 實(shí)驗(yàn)材料與儀器

（1）原材料。新鮮青菜（市售）。

（2）試劑。苯胺靈、乙酸乙酯、正己烷、ProELut CARB石墨化碳黑小柱、氯化鈉等。

（3）實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備。氣相色譜儀（聚光科技GC-2000）、質(zhì)譜儀（聚光科技MS-6100）、離心機(jī)（湘儀H1850R）、超聲波提取機(jī)（KQ-500 VDE 型）、固相萃取儀（AG-SPE-12D）、氮吹濃縮儀（MD 200）、渦旋混勻儀（SCILOGEX MX-S）等。

1.4 實(shí)驗(yàn)操作步驟

實(shí)驗(yàn)檢測流程如圖1 所示。

圖1 實(shí)驗(yàn)檢測流程圖

（1）配制標(biāo)準(zhǔn)樣品。稱取適量苯胺靈標(biāo)準(zhǔn)品，用乙酸乙酯定容至10 mL，得到1000 mg／L 的苯胺靈標(biāo)準(zhǔn)儲備液，用乙酸乙酯稀釋至質(zhì)量濃度為100 mg／L標(biāo)準(zhǔn)工作液，再空白基質(zhì)溶液逐級稀釋至10、5、1、0.5、0 mg／L，制得標(biāo)準(zhǔn)品STD（standard的縮寫），并分別標(biāo)注STD 100、STD 10、STD 5、STD 1、STD 0.5 及STD 0，待測。以苯胺靈質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的質(zhì)譜峰面積為縱坐標(biāo)，繪制基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線［8］。標(biāo)準(zhǔn)液配制過程中，注意移液器的使用方法及注意事項(xiàng)，在添加溶液后需及時(shí)更換槍頭以及渦旋混勻。該環(huán)節(jié)使用移液槍嚴(yán)格按規(guī)定添加，即實(shí)驗(yàn)要求中的“細(xì)”即細(xì)心、仔細(xì)。

（2）樣品前處理。將市售青菜制樣加工成漿狀，制備成試樣甲、試樣乙（留樣、冰箱冷藏）。試樣甲放入離心管中，加入NaCl進(jìn)行鹽析。由于僅對試樣中的有機(jī)相進(jìn)行萃取提取，在稱樣時(shí)，允許一定誤差，即“粗”環(huán)節(jié)，達(dá)到有的放矢。

（3）樣品中農(nóng)藥殘留的提取。包含添加提取液、渦旋、超聲、離心、提取有機(jī)相等步驟，該過程較復(fù)雜且重復(fù)3 次，對操作要求較高，需耐心、謹(jǐn)慎在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行，最后對提取液進(jìn)行加溫氮吹濃縮。

（4）樣品凈化。需使用固相萃取儀及真空泵，利用固相萃取小柱對目標(biāo)分析物進(jìn)行分離、純化后，進(jìn)行二次氮吹將濃縮液轉(zhuǎn)移至GC-MS 進(jìn)樣瓶（GC-MS 氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀），編輯進(jìn)樣程序并選擇分析方法進(jìn)行上樣測定。

（5）上樣測定，數(shù)據(jù)處理。氣相色譜儀將復(fù)雜混合物試樣各組分分離后，依次流入氣相色譜儀，并順序進(jìn)入質(zhì)譜系統(tǒng)，經(jīng)質(zhì)譜分析檢測后，計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)據(jù)采集、處理、傳遞并存儲［9］。儀器分析結(jié)束后，生成質(zhì)譜圖，借助美國國家標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)研究院（National Institute of Standards and Technology，NIST）標(biāo)準(zhǔn)庫匹配檢索得到目標(biāo)物的保留特征及特征碎片離子。

2 實(shí)驗(yàn)過程及保障措施

2.1 實(shí)驗(yàn)教師課前準(zhǔn)備

GC-MS是一種結(jié)合氣相色譜和質(zhì)譜的特性，用于復(fù)雜和痕量樣品的檢測，其主要應(yīng)用于工業(yè)檢測、食品安全、環(huán)境保護(hù)等眾多領(lǐng)域，如農(nóng)藥殘留、食品添加劑等。氣相色譜-質(zhì)譜技術(shù)可以準(zhǔn)確有效地完成復(fù)雜樣品的定性與定量分析，在檢測過程中依托進(jìn)樣系統(tǒng)、質(zhì)量分析器、檢測器等組件的應(yīng)用，強(qiáng)化對目標(biāo)物的檢測效果，排除相關(guān)因素的干擾，提升檢測工作的有效性［10］。農(nóng)藥在樣品中的殘留是痕量水平，待測樣品的成分復(fù)雜，如何去除背景值的干擾、保證目標(biāo)化合物的響應(yīng)以及保護(hù)分析儀器是農(nóng)藥殘留分析的核心問題［11］。實(shí)驗(yàn)教師需要根據(jù)目標(biāo)分析物，參照國家標(biāo)準(zhǔn)及實(shí)驗(yàn)條件，建立氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定農(nóng)藥中苯胺靈殘留量的分析方法并對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，對方法可靠性進(jìn)行驗(yàn)證。

2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器的調(diào)試、預(yù)實(shí)驗(yàn)

由于氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀屬于大型精密儀器，每次開課前，實(shí)驗(yàn)教師需要進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，建立檢測方法，熟悉操作，調(diào)試設(shè)備及實(shí)驗(yàn)結(jié)果驗(yàn)證等工作。此外還需制作原理簡單明了、知識點(diǎn)清晰、注意事項(xiàng)明確的PowerPoint（PPT）課件以及參照國家標(biāo)準(zhǔn)《GB 23200.61-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中苯胺靈殘留量的測定氣相色譜-質(zhì)譜法》，編寫實(shí)驗(yàn)步驟明確的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）以保障學(xué)生實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。

2.1.2 實(shí)驗(yàn)耗材準(zhǔn)備及化學(xué)品的配制

購買市售新鮮蔬菜（青菜）；提供給學(xué)生足夠的實(shí)驗(yàn)耗材如一次性吸管、固相萃取小柱（Solid Phase Extraction，SPE）、2 mL GC-MS進(jìn)樣瓶等。所用不同種類試管需要提前超聲洗滌，超純水沖洗后，烘箱烘干，置于試管架上，應(yīng)準(zhǔn)備1.5 倍的試管數(shù)量備用。除此之外，實(shí)驗(yàn)需要的試劑量較大，包括苯胺靈標(biāo)準(zhǔn)品、乙酸乙酯、乙酸乙酯-正己烷（1 +1，V／V）等，實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師需提前配制備用。

2.2 按小組進(jìn)行實(shí)驗(yàn)

為保證教學(xué)效果及規(guī)范操作，實(shí)驗(yàn)分組進(jìn)行，每組為5 人，給予每組人員足夠的實(shí)驗(yàn)空間，實(shí)驗(yàn)教師1∶1組進(jìn)行指導(dǎo)確保實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，同時(shí)也提高了實(shí)驗(yàn)的安全性。此外，實(shí)驗(yàn)中樣品制備（平行樣與加標(biāo)樣）及標(biāo)準(zhǔn)品配制同時(shí)進(jìn)行，需要同學(xué)們相互配合；超聲、離心配平也需互相提醒注意事項(xiàng)；2 次氮吹濃縮因時(shí)間較長，輪流操作，從而共同協(xié)作完成實(shí)驗(yàn)，發(fā)揮團(tuán)隊(duì)合作精神。

2.3 教師示范關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

扎實(shí)的實(shí)驗(yàn)基本技能是保證學(xué)生安全完成實(shí)驗(yàn)的條件，也是學(xué)生在以后工作中實(shí)現(xiàn)新突破的基礎(chǔ)［12］。實(shí)驗(yàn)開始前，進(jìn)行系統(tǒng)安全培訓(xùn)教育，特別強(qiáng)調(diào)規(guī)范操作及噴淋、洗眼裝置、消防器材及逃生通道具體位置，以確保實(shí)驗(yàn)過程中人身安全。

有機(jī)相提取和目標(biāo)分析物富集是整個實(shí)驗(yàn)的重點(diǎn)部分，也是難點(diǎn)，對學(xué)生操作技術(shù)要求較高，實(shí)驗(yàn)也有一定的危險(xiǎn)性，這就要求實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師要熟悉操作，并就實(shí)驗(yàn)過程中可能出現(xiàn)的問題提前叮囑學(xué)生，關(guān)鍵步驟要親自示范，避免不必要事故的發(fā)生［13］。

離心機(jī)初次使用，由指導(dǎo)教師示范配平、對位擺放、離心轉(zhuǎn)子及程序選擇原則；對固相萃取小柱預(yù)淋洗活化過程、固相萃取儀的使用、初次氮吹過程由實(shí)驗(yàn)教師親自示范，氣瓶、減壓閥等進(jìn)行詳述，使學(xué)生加深理解，隨后進(jìn)行實(shí)際操作。提取及氮吹步驟均在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行，特別強(qiáng)調(diào)通風(fēng)櫥活動擋板拉至離臺面15 cm以下，避免易揮發(fā)氣體對人體的傷害。

2.4 落實(shí)實(shí)驗(yàn)安全措施

本實(shí)驗(yàn)使用苯胺靈農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品、大量有機(jī)溶劑等，具有揮發(fā)性，因此要求所有實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)，盡可能在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)安全，不要近距離吸入有機(jī)揮發(fā)性氣體。

標(biāo)準(zhǔn)品配制前，需要學(xué)習(xí)并反復(fù)練習(xí)移液槍的使用及移液操作，操作熟練后方可進(jìn)行移液進(jìn)行5 個標(biāo)準(zhǔn)品的配制。特別強(qiáng)調(diào)每配制完一份標(biāo)準(zhǔn)品務(wù)必注意移液槍槍頭的更換以及使用渦旋混勻儀以保證標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確、均勻、徹底混合。

提取溶劑的選擇苯胺類除草劑易揮發(fā)、難溶于水、易溶于有機(jī)試劑［14］。本實(shí)驗(yàn)采用乙酸乙酯-正己烷（1∶1，V／V）進(jìn)行提取，3 次提取過程，每次盡可能收集、提取全部有機(jī)相后，超聲時(shí)水溫升高使離心管內(nèi)有機(jī)相揮發(fā)氣化體積膨脹，易使離心管蓋崩開，因此嚴(yán)格要求學(xué)生佩戴個人防護(hù)用品（Personal Protect Equipment，PPE）如實(shí)驗(yàn)服、丁腈手套、護(hù)目鏡等，同時(shí)超聲機(jī)中放入適量冰袋，降低樣品溫度以減少氣體揮發(fā)。取出離心管置于離心管架時(shí)，要求輕拿輕放，切勿瓶口對人。

由于是初次使用離心機(jī)，需特別注意離心機(jī)轉(zhuǎn)子不同所對應(yīng)程序不同，設(shè)置對應(yīng)的轉(zhuǎn)子程序、帶蓋配平、對位放置，設(shè)置所需轉(zhuǎn)速、時(shí)間、離心溫度等條件后啟動，以保證離心機(jī)正常工作運(yùn)轉(zhuǎn)。

由于初次接觸氮?dú)鈿馄?，學(xué)生會有些許畏懼，教師演示如何開啟、關(guān)閉氣瓶及講述減壓閥的作用、氮吹儀的原理及使用，鼓勵學(xué)生實(shí)際動手操作，將理論聯(lián)系實(shí)際加深印象。

使用固相萃取儀及無油真空泵進(jìn)行萃取時(shí)，注意先進(jìn)行石墨化碳黑固相萃取小柱的預(yù)淋洗活化以及萃取后待分析物的洗脫，實(shí)驗(yàn)中注意吸管的使用，保證所有提取的有機(jī)相都通過SPE小柱后收集至試管中。

以上各環(huán)節(jié)，需要實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師對每個細(xì)節(jié)反復(fù)強(qiáng)調(diào)，加深印象，稍有不慎，高靈敏的實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)會產(chǎn)生誤差。實(shí)驗(yàn)整個過程，嚴(yán)格遵守食品化學(xué)實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)安全規(guī)章制度，并按SOP 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程嚴(yán)格操作。

2.5 重視實(shí)驗(yàn)過程

本實(shí)驗(yàn)將先進(jìn)儀器技術(shù)轉(zhuǎn)化為實(shí)驗(yàn)教學(xué)資源，把科研意識的培養(yǎng)融入實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程，實(shí)現(xiàn)科研與教學(xué)的交互和融合，一方面使學(xué)生在實(shí)驗(yàn)過程中充分了解前沿的科研成果及實(shí)驗(yàn)方法；另一方面還鍛煉了學(xué)生的科學(xué)思維能力及探索創(chuàng)新能力［15］。實(shí)驗(yàn)涉及農(nóng)藥等化學(xué)品，且實(shí)驗(yàn)操作較為繁瑣，細(xì)節(jié)等所需注意事項(xiàng)較多，且使用造價(jià)昂貴的大型精密儀器進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，學(xué)生有所畏懼，不敢著手進(jìn)行操作實(shí)施。第一步即使用移液槍進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品配制，由于不熟悉操作，失誤頻繁發(fā)生，學(xué)生心理上負(fù)擔(dān)較重，更易手忙腳亂，影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。此時(shí)，教師應(yīng)以鼓勵為主，語氣平緩，耐心并合理解釋該實(shí)驗(yàn)難度，強(qiáng)調(diào)熟能生巧，逐漸緩解學(xué)生緊張情緒。每完成一個標(biāo)準(zhǔn)品的配制，方式方法上鼓勵學(xué)生為主，以增強(qiáng)自信心，熟悉操作后，實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，充分激發(fā)了學(xué)生的成就感，對后續(xù)操作更加細(xì)致認(rèn)真投入。

4 個樣品（2 平行樣+2 加標(biāo)樣）通過二次氮吹濃縮制備完成后（過程約5 h），需使用自動進(jìn)樣器、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行進(jìn)樣及分析檢測。進(jìn)樣前，實(shí)驗(yàn)教師再次講授GC-MS 原理及設(shè)備，對照實(shí)物講解，極大地提升學(xué)習(xí)興趣，加深印象。學(xué)生通過GC-MS數(shù)據(jù)采集軟件，自行編寫進(jìn)樣序列，邏輯上得到充分鍛煉，進(jìn)樣器按照所編序列自動進(jìn)樣，學(xué)生也獲得極大成就感。GC-MS運(yùn)行后，學(xué)生也認(rèn)真仔細(xì)觀察進(jìn)樣口溫度、駐溫箱升溫過程、保留時(shí)間及譜圖等儀器分析過程。

2.6 養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，養(yǎng)成良好的習(xí)慣，主動打掃衛(wèi)生，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室清理工作；廢液分別入有機(jī)、無機(jī)廢液桶，實(shí)驗(yàn)室固體廢物如使用過的槍頭、一次性吸管等投入危險(xiǎn)廢物垃圾，增強(qiáng)環(huán)保意識，提高自身的素質(zhì)，提升科學(xué)實(shí)驗(yàn)觀。設(shè)備使用完畢所有器材歸位，拔掉設(shè)備電源插頭等，減少安全隱患的同時(shí)，培養(yǎng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)室安全意識，為今后研究生階段實(shí)驗(yàn)室安全操作打下良好的基礎(chǔ)。

2.7 加強(qiáng)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析能力的培養(yǎng)

由于每個樣本需要分析測試30 min，標(biāo)準(zhǔn)品5 個，樣品4 個，再加上降溫程序，設(shè)備單次運(yùn)行5 h 左右，學(xué)生對結(jié)果進(jìn)行分析并獨(dú)立完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。實(shí)驗(yàn)要求學(xué)生獨(dú)立使用GC-MS數(shù)據(jù)分析軟件，操作并讀取離子譜圖數(shù)據(jù)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度及積分峰面積值制作校正曲線，通過外標(biāo)法對樣本進(jìn)行定量分析并計(jì)算相應(yīng)加標(biāo)回收率；從實(shí)驗(yàn)操作人員自身（人）、測試過程中用到的儀器設(shè)備（機(jī)）、所用到的試劑與耗材（料）、所選擇的檢測方法（法）、實(shí)驗(yàn)操作各個環(huán)節(jié)（環(huán)）5 個方面對影響樣品中農(nóng)藥殘留量檢測準(zhǔn)確性因素進(jìn)行分析；儀器分析測定流程中在儀器裝置、方法等方面提出改進(jìn)與創(chuàng)新的建議。若實(shí)驗(yàn)加標(biāo)回收率偏差較大，還需加以分析，總結(jié)實(shí)驗(yàn)失敗的原因。實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求填寫實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵性證據(jù)、數(shù)據(jù)分析、質(zhì)譜圖、思考題等，任務(wù)布置上結(jié)構(gòu)合理，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)知識的掌握。

3 結(jié)語

氣相色譜-質(zhì)譜法測定蔬菜中苯胺靈殘留量，該實(shí)驗(yàn)時(shí)間長、流程復(fù)雜、步驟多、綜合性強(qiáng)、實(shí)驗(yàn)難度較大，但可以大大提升學(xué)生動手實(shí)操能力、統(tǒng)籌規(guī)劃能力、團(tuán)結(jié)協(xié)作能力，以及邏輯能力等。對實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教師要求較高，不僅具備專業(yè)知識，還需有愛心，耐心、細(xì)心和責(zé)任心，實(shí)驗(yàn)中不僅指導(dǎo)學(xué)生還要鼓勵學(xué)生，以增強(qiáng)學(xué)生自信心。通過該實(shí)驗(yàn)，認(rèn)識、使用并了解色譜儀、質(zhì)譜儀等大型儀器的工作原理，在之后的專業(yè)實(shí)習(xí)過程中，再次接觸到此類設(shè)備時(shí)，學(xué)生們普遍反映熟悉設(shè)備操作并加深了對分析儀器原理的理解。通過該實(shí)驗(yàn)，促進(jìn)了學(xué)生實(shí)驗(yàn)技能提升的同時(shí)，也加強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)室安全意識，提高分析及解決問題的能力并學(xué)會對實(shí)驗(yàn)進(jìn)行總結(jié)，為今后科研階段打下堅(jiān)實(shí)的實(shí)驗(yàn)操作基礎(chǔ)。