不同HBV基因型乙肝相關肝細胞癌患者的臨床特征和血管內皮生長因子及其受體在肝癌組織中的表達

白露,李慶剛

(鄭州大學第一附屬醫院 感染科,河南 鄭州 450000)

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)是一種包含4個重疊的開放閱讀框的球形DNA病毒,感染后能引起急性肝炎、慢性肝炎和重型肝炎等。其中部分慢性肝炎可演變成肝硬化或肝癌。乙型肝炎已成為世界范圍內危害人類健康的疾病,我國現存70萬穩定HBV感染者,給社會和家庭造成沉重負擔。HBV具有病毒復制產量高和突變率高等特征,現已至少形成A～I 9種基因型,根據目前報道HBV基因型和亞基因型具有不同的地理分布,還可能受到社會人口學、種族或遷徙因素的影響,其分型影響許多臨床疾病特征和對治療的反應,盡管關于HBV基因型分布的報道很多,但研究之間存在很大差異[1-2]。目前我國HBV以B型和C型最為常見,其中B型主要分布于南方,而C型則多見于北方、中原和華東地區,兼有少量B+C混合型和D型。臨床研究表明,HBV的基因型與疾病進程、感染后臨床表現、預后和抗病毒治療應答等密切相關。例如,B型患者對普通干擾素和聚乙二醇干擾素為主的治療均敏感,累積生存率高于C型;與B型相比,C型患者血清乙型肝炎表面抗原出現遲,清除慢,核酸復制力強,更易進展為肝纖維化和肝癌,僅對聚乙二醇干擾素治療敏感;D型容易在年輕患者中引發原發性肝細胞癌。因此,對HBV進行基因分型具有重要的臨床意義。臨床上目前對于HBV基因型與乙型肝炎相關肝細胞癌臨床特征和血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和受體(Flt-1,Flk-1)在肝癌組織中表達關系的研究較少,本研究基于此對其展開研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

前瞻性納入2020年10月至2022年10月在鄭州大學第一附屬醫院就診住院的200例乙型肝炎相關肝細胞癌患者作為研究對象,根據HBV基因型檢測結果將患者分為HBV基因型B型組101例,HBV基因型C型組90例,HBV基因型D型組9例。納入標準:(1)年齡>18歲;(2)乙型肝炎核心抗體陽性和表面抗原陰性;(3)臨床資料、病程等相關資料完整可查。剔除標準:(1)合并其他腫瘤、心力衰竭、心肌梗死、嚴重感染、免疫系統疾病及嚴重心、肝、腎功能不全;(2)依從性差或溝通障礙等條件脫落研究。本研究經醫院醫學倫理委員會審批同意,患者對此研究知情同意。3組一般資料見表1。

表1 3組患者一般資料比較

1.2 研究方法

采集病史并檢測各組肝功能相關指標以及VEGF和受體(Flt-1,Flk-1)的表達,分析肝功能相關指標[甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)水平以及HBV載量、Child-Pugh評分]以及VEGF和受體(Flt-1,Flk-1)的表達的差異。VEGF和受體(Flt-1,Flk-1)在肝癌組織中的表達:抽提肝癌組織樣本RNA,利用NCBI網站設計VEGF和受體(Flt-1,Flk-1)引物并合成樣本模板DNA,進行實時定量PCR。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 不同HBV基因型肝癌患者的腫瘤標志物、病毒載量以及肝功能比較

HBV基因型C型肝細胞癌患者AFP以及HBV病毒載量、肝功能評分較HBV基因型B型肝細胞癌與HBV基因型D型肝細胞癌更高,差異有統計學意義(P<0.05),見表2。

表2 不同HBV基因型肝癌患者的腫瘤標志物、病毒載量以及肝功能比較

2.2 VEGF、VEGFR(Flt-1,Flk-1)在不同HBV基因型肝癌組織中表達比較

HBV基因型C型肝細胞癌患者VEGF及其受體(Flt-1,Flk-1)表達較HBV基因型B型肝細胞癌與HBV基因型D型肝細胞癌更高,差異有統計學意義(P<0.05),見表3。

表3 VEGF和受體(Flt-1,Flk-1)在不同HBV基因型患者的水平比較

3 討論

HBV感染是一種全球性公共衛生問題,其嚴重程度與HBV的基因型有關。而在乙型肝炎患者中,VEGF和受體的水平與肝功能的分級也存在關聯。本研究根據其HBV基因型的不同,將其分為不同組別,研究結果顯示,HBV基因型C型肝細胞癌患者AFP水平以及HBV載量、Child-Pugh評分、VEGF及其受體(Flt-1,Flk-1)表達較HBV基因型B型肝細胞癌與HBV基因型D型肝細胞癌更高。這表明不同HBV基因型可能對VEGF和受體的表達產生不同的調控效應,這暗示了HBV基因型對肝功能的影響可能部分通過調節VEGF和受體的表達來實現。

HBV基因型C型肝細胞癌HCC患者甲胎蛋白AFP水平的升高以及HBV載量和Child-Pugh評分的增加可能與以下機制有關。(1)HBV基因型C型是一種較為致病的基因型,與其他基因型相比,HBV基因型C型更容易引起慢性乙型肝炎,并增加患者發展為肝細胞癌的風險;持續的HBV感染可以導致肝細胞的炎癥和損傷,促進肝細胞癌的發展,并導致AFP水平的升高。(2)HBV感染引起的持續肝臟炎癥和損傷可以導致肝功能的損害,從而使Child-Pugh評分升高[3]。Child-Pugh評分是評估肝功能的指標,包括總膽紅素水平、血清白蛋白水平、凝血功能等指標,這些指標的異常可以反映肝臟的損傷程度。加上HBV感染是肝細胞癌的重要危險因素之一[4]。(3)在HBV感染的過程中,病毒基因組的整合和突變可能導致腫瘤抑制基因的失活和腫瘤促進基因的激活,從而促進肝細胞癌的發展。肝細胞癌的發展過程中,AFP水平往往升高,與腫瘤細胞產生AFP的能力增強有關。(4)HBV感染引起的肝臟炎癥和損傷可能導致免疫調節的失衡。免疫調節失衡可能導致免疫抑制功能的降低,使得HBV感染的控制受到影響,HBV載量增加[5]。同時,免疫調節失衡也可能導致腫瘤免疫逃逸,使肝細胞癌的發展更為侵襲性。總之,HBV基因型C型肝細胞癌患者甲胎蛋白水平的升高以及HBV載量和Child-Pugh評分的增加可能是多種復雜機制的結果,包括HBV感染、肝臟損傷、肝細胞癌的發展以及免疫調節失衡等[6-7]。而HBV基因型C與B和D相比,可能具有更高的致病性和癌變潛力。HBV基因型C感染的肝細胞可能會產生更多的病理變化,包括累積的基因突變和異常細胞增殖,從而導致更高水平的VEGF和其受體的表達。HBV感染引起的肝炎和炎癥反應是肝細胞癌發生的重要因素。HBV基因型C患者可能更容易出現持續性炎癥反應,導致持續性的VEGF表達增加[8]。炎癥反應中的細胞因子和炎癥介質也可能通過調節VEGF和其受體的表達來增加腫瘤血管生成。HBV基因型C感染可能導致一系列基因的表達改變。研究發現,HBV基因型C感染與VEGF及其受體的過度表達相關的基因調控元件存在差異。這些基因調控元件的改變可能導致HBV基因型C肝細胞癌細胞更容易產生VEGF和其受體,從而促進腫瘤生長和血管生成[9-10]。此外HBV感染的機制非常復雜,可能受多個因素的影響。例如,病毒突變、宿主基因多態性、免疫反應等都可能與HBV基因型C肝細胞癌中VEGF及其受體的高表達有關。

4 結論

不同HBV基因型患者的腫瘤標志物、病毒載量以及肝功能比較有區別,對于確診的肝細胞癌患者及時進行HBV基因型檢測和VEGF及其受體(Flt-1,Flk-1)表達檢測對于治療以及預后具有指導意義。