陳伯祥 趙子惠 李元新 楊明 成偉偉 薛健



摘? 要:2020年5月至2021年3月對甘肅省5市10縣規?;i場和散養戶共116家(戶)進行了豬病毒性腹瀉病的流行病學調查及抽樣樣本及臨床樣本的檢測。調查顯示:甘肅省部分縣(區),豬腹瀉的發病率為8.5%,死亡率4.5%;發病豬場(散養戶)保育仔豬的腹瀉率為40%,發病率為3.5%,死亡率為1%;腹瀉的發生主要在小型規?;i場和散養戶,發病季節多發生于每年的第一季度和第四季度,特別是冬春季交替之際。對所采樣本檢測顯示,豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒、豬輪狀病毒陽性率分別為30%、35%、20%。結果表明,目前甘肅省豬病毒性腹瀉的病原體主要以豬流行性腹瀉病毒為主,混合感染較多,主要發生冬春季交替之際。
關鍵詞:豬病毒性腹瀉;流行病學;調查
中圖分類號:S855.3 文獻標志碼:A 文章編號:1001-0769(2023)04-0078-04
豬病毒性腹瀉通常包括豬流行性腹瀉(porcine transmissible gastroenteritis,PED)、豬傳染性胃腸炎(transmissible gastroenteritis,TGE)和豬輪狀病毒(porcine rotavirus,PRV)病。這三種病分別是豬流行性腹瀉病毒(PRD virus,PEDV)、豬傳染性胃腸炎病毒(TGE virus,TGEV)和豬輪狀病毒(PRV)引起的以豬嘔吐、腹瀉、脫水為特征的傳染病,具有較高的致死率,給養豬業帶來了重大的損失。這三種疾病在臨床癥狀上極為相似,豬群中一旦出現發病豬,疾病會快速波及全群,尤其在感染仔豬后會出現高發病率和高死亡率,給養豬企業或散養戶帶來巨大經濟損失;同時,還存在多種病原體混合感染的情況,已成為一個引人注目的世界性的新問題。為摸清甘肅省豬病毒性腹瀉的流行情況,通過對甘肅省部分縣(區)豬群腹瀉疫病的流行狀況、流行特點等進行調查分析,掌握本轄區疫病流行態勢,為豬群病毒性腹瀉疾病的科學防治提供科學依據。
1? 材料與方法
1.1 材料
2×Taq反應緩沖液、Bst DNA聚合酶、dNTP混合液、反轉錄酶AMV均購自蘭州希瑞科技有限公司;核酸檢測試紙條由杭州憂思達生物技術有限公司提供;TGEV、PEDV、PRV的RT-PCR引物分別由金開瑞生物工程有限公司合成。
1.2 方法
1.2.1 調查對象、樣本采集及處理
根據各縣(區)豬的飼養量不同,按照隨機抽樣的原則,于2020年5月、9月、11月至2021年3月,對甘肅省慶陽市、平涼市、白銀市、定西市、隴南市部分縣(區)的規模化豬場及散養戶進行調查,共計10個縣(區)的規模化豬場及散養戶116家(戶)。每家豬場或散養戶用棉簽采集10份不同窩的仔豬糞便樣本,置于4 mL離心管中,-20 ℃保存,共計1 160份糞便樣本;同時,采集因腹瀉而死亡的仔豬腸道組織樣本20份。
1.2.2 現場調查與問卷
設計了調查問卷,內容包括:豬場(散養戶)名稱、聯系人、地址、電話等基本信息;存欄量、飼養方式、仔豬來源、仔豬斷奶日齡等基本情況;防疫設施、欄舍通風、消毒、除糞、免疫等防疫情況;病死豬無害化處理方式;腹瀉發病豬群、發病率、死亡率、腹瀉發病原因、是否進行實驗室診斷等情況。每家(戶)被調查的豬場(散養戶)填寫1份調查表。
1.2.3 檢測樣本處理
不同樣本按以下方法處理:①糞便棉拭子:在仔豬糞便棉試子離心管中加入1 mL無菌生理鹽水稀釋,混勻后反復凍融3次,
5 000 r/min離心5 min,吸上清備用。②腸道組織:取1~2 cm小腸于研缽中,加入少許石英砂和1 mL無菌生理鹽水,研磨成勻漿,然后收集于離心管中,反復凍融3次,12 000 r/min離心5 min,取上清備用。
1.2.4 樣本RT-PCR方法檢測
按照建立的TGEV、PEDV、PRV的RT-PCR檢測方法進行樣本檢測,包括1 160份糞便樣本和20份病死仔豬的腸道組織樣本。
3? 結果
3.1 問卷調查豬腹瀉發生情況
共計調查了省內5個市10個縣(區)規?;i場及散養戶116家(戶),結果見表1。由表1可知,其中采用自繁自養生產模式的豬場(散養戶)106家(戶),規?;i場19家,散養戶97戶,發生過腹瀉的豬場或散養戶32家(戶),未發生過腹瀉的豬場或散養戶84家(戶)。116家均未進行過實驗室診斷。免疫接種過豬傳染性胃腸炎-豬流行腹瀉二聯疫苗或豬傳染性胃腸炎-豬流行性腹瀉-豬輪狀病毒三聯活疫苗的有42家(戶),占36.2%。在發生腹瀉的原因中,由單獨感染TGEV、PEDV或PRV引起腹瀉的豬場(散養戶)分別占31.03%、20.69%、10.34%,由混合感染兩種或兩種以上病毒后發病的占27.59%,其他原因引起的占37.93%。其他原因主要包括大腸埃希氏桿菌感染、其他未檢出的且能引發腹瀉的病毒感染及晝夜溫差大、母豬乳汁不足、斷奶應激等引起的仔豬腹瀉。使用抗菌素治療腹瀉效果明顯的有10家(戶)豬場(散養戶),用抗菌素治療腹瀉無效的有22家(戶)。在發生腹瀉的豬場(散養戶)中,隨著防疫措施的加強,發生腹瀉的仔豬比例逐漸下降。調查發現,規?;i場的仔豬腹瀉率較低,而散養戶的較高,這與規?;i場強化生物安全和落實防疫措施相關;采用了自繁自養或“全進全出”制生產模式后,豬場(散養戶)的仔豬腹瀉發生率較低。
3.2 豬腹瀉發生的群間分布情況
在發生腹瀉的豬場(散養戶)中,所有場或戶均出現了哺乳仔豬腹瀉疫情(表2),32家(戶)豬場(散養戶)擁有哺乳仔豬9 551頭,其中發病仔豬812頭,發病率為8.5%,死亡430頭,死亡率4.5%;13家(戶)豬場(散養戶)暴發保育仔豬腹瀉病例,發生率為40%(13/32),但是發病仔豬數少,僅為3.5%,死亡率為1.0%;其他日齡的豬未發生或表現為一過性癥狀。由此表明,豬病毒性腹瀉病主要引起哺乳仔豬發病,保育仔豬次之,成年豬則很少發病。在生產規模上,主要發生于散養戶和小規?;i場,大型規?;i場則很少發病,這可能與豬場的防疫措施和計劃的執行率有關;還與哺乳仔豬的欄舍衛生、保溫情況及母豬的產前免疫有關。
3.3 豬腹瀉發生的時間分布情況
表3列出了 根據問卷調查對哺乳仔豬進行時間分布上的數據分析結果。由表3可知,2020年5月至2021年4月,11月份的發病率最高,6月份發病率最低。結果表明,仔豬病毒性腹瀉病的發生一年四季均可發生,但不同季節差異較大,寒冷的冬春季節發病率最高,特別是冷熱交替時應加強哺乳仔豬的飼養管理。
3.4 豬腹瀉發生的空間分布情況
對問卷調查結果中哺乳仔豬發生豬病毒性腹瀉情況分析后發現,慶陽市寧縣、平涼市涇川縣和崆峒區的仔豬發病率最高,分別為13.6%、10.1%、10.5%,而正寧縣、寧縣、涇川縣的仔豬死亡率分別為5.1%、5.8%、5.3%。
將調查區域按照當地氣候和地理位置劃分為4個區域,按照區域統計調查結果,發現仔豬的發病率以平慶地區的最高(10.44%),平川區的最低(3.00%)。表明不同區域在仔豬病毒性腹瀉病發病率上存在較大的差異,在制定防疫計劃時要有所側重,不同區域制定不同的防疫策略,在日常監測中對仔豬病毒性腹瀉病發生率高的地區應加強檢測和疫苗接種。
3.5 豬病毒性腹瀉病三種病毒的檢測
對116家(戶)豬場(散養戶)共計? ? 1 180份樣本,采用RT-PCR方法檢測TGEV、PEDV、PRV。結果顯示,只有在第一季度和第四季度的樣本中檢測到引起豬病毒性腹瀉的三種病原,即TGEV、PEDV、PRV。對第一季度和第四季度中采集到的糞便樣本和腸道組織樣本,進行檢測,結果見表4。
由表4可知,采集的樣本中PEDV、TGEV和PRV的陽性率分別為35%、30%、20%,表明甘肅省某些豬場(散養戶)存在豬病毒性腹瀉病,仔豬病毒性腹瀉病主要由這三種病毒中的一種或兩種以上感染引起的。
在臨床上,首先要分清引發腹瀉的病原,這要結合臨床癥狀、流行病學特點及實驗檢測結果,以確定致病原因,并及時對癥治療,針對性地制定治療和防控計劃,及時啟動防控措施,盡可能減少經濟損失,控制疫情擴散。
4? 討論
本次調查表明,甘肅省豬場(散養戶)仔豬腹瀉的發生主要在小規模化豬場和散養戶,發病季節多為每年的第一季度和第四季度,特別是冬春季節交替之際;引發豬暴發病毒性腹瀉病的病原以PEDV為主,PEDV、TGEV和PRV混合感染較多。這與韓慶彥等[1]、徐麗華等[2]、牟迪等[3]的報道一致,說明當前我國引起豬病毒性腹瀉病的主要病原仍以PEDV為主。本次調查還發現,由于近年來非洲豬瘟防控形勢嚴峻,甘肅省各養豬企業和散養戶加強了防疫措施,多采用了自繁自養的生產模式,導致豬病毒性腹瀉病的發生率出現下降的趨勢。
本次調查通過調查問卷及實驗室檢測分析,弄清了甘肅省部分區域豬病毒性腹瀉病的流行狀況,為甘肅省豬病毒性腹瀉病的診斷、免疫預防計劃的制定和防控提供了參考依據,為科學防控豬病毒性腹瀉病提供了可靠的理論和技術依據。
參考文獻
[1] 韓慶彥,蘭喜,周峰,等.2011-2012年豬腹瀉疫情中6種病毒在乳豬腸道的感染檢測[J].國外畜牧學(豬與禽),2012,32(9):62-63.
[2] 徐麗華,李軍星,蘇菲,等.2011-2017年浙江省豬病毒性腹瀉病的流行病學調查[J].中國獸醫科學,2018,48(5):625-630.
[3] 牟迪,夏偉.2015-2017年豬流行性腹瀉病毒病原檢測數據統計分析與預防對策[J].養豬,2017(6):89-92.