兒童特應性皮炎患兒血清IP-10和CXCR3水平及臨床意義*

許 穎,尉景娟,孫 偉

首都醫科大學附屬北京友誼醫院臨床檢驗中心,北京 100050

特應性皮炎(AD)又稱特應性濕疹,是兒童最常見的慢性炎癥性皮膚病,臨床表現為從最初的急性期(以瘙癢和紅斑-囊泡/丘疹為特征)向慢性期的演變,在此期間,皮膚出現地衣化,這是皮膚炎癥和抓撓引起的組織重塑和真皮纖維化的結果[1-2]。大部分兒童患AD后會反復發作,嚴重影響患兒的生活質量[3]。AD影響5%～20%的兒童[4],醫療費用較高和生活質量下降等給患兒、家庭和社會帶來沉重負擔[5]。因此,尋找與AD有關的生物標志物具有重要的臨床意義。趨化因子是調節抗病毒免疫的重要因素,干擾素-γ誘導蛋白-10(IP-10)也稱為C-X-C基序配體10(CXCL10),在不同的細胞類型(如肝細胞、內皮細胞、單核細胞和活化T細胞)中高度表達,在調節抗病毒免疫中發揮關鍵作用[6]。趨化因子受體3(CXCR3)蛋白是一種七跨膜的G蛋白偶聯受體,具有1個細胞外結構域、3個胞外環(ECL1-3)、3個胞內環(ICL1-3)和1個C端胞內結構域[7]。研究表明,CXCL10/CXCR3信號軸與多種疾病(包括胰腺炎)的炎癥發生有關[8]。CXCR3在兒童發育和疾病發展中發揮重要的作用,如傷口愈合、各種神經炎癥及心血管疾病[9]。而AD作為一種炎癥疾病,其發病與炎癥因子密不可分,筆者推測IP-10和CXCR3可能與AD的發生、發展存在聯系。本研究通過對比AD患兒與體檢健康兒童IP-10、CXCR3水平,探討IP-10和CXCR3在AD中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年3月至2022年3月在本院診斷為AD的114例患兒作為AD組,其中男65例,女49例;年齡1～10歲,平均(3.50±0.86)歲。選擇同期在本院體檢健康的108例兒童作為對照組,其中男59例,女49例;年齡1～11歲,平均(3.75±1.13)歲。本研究經本院倫理委員會審批通過,所有研究受試者及其家屬知情并同意。AD患兒納入標準:(1)診斷符合《特應性皮炎的診斷標準》[10]中有關AD的標準;(2)首次患病。排除標準:(1)伴嚴重心、肺功能異常;(2)自身免疫性疾病;(3)研究前使用免疫抑制劑治療;(4)精神異常,不能正常交流。

1.2方法

1.2.1收集資料 收集嗜酸性粒細胞絕對值、嗜酸性粒細胞百分比、鈣離子、總lgE、體質量指數(BMI)等指標。

1.2.2特應性皮炎評分(SCORAD) 根據SCORAD將AD組患兒分為輕度組(評分<25分,38例)、中度組(評分25～50分,42例)、重度組(評分>50分,34例)。

1.2.3血清IP-10和CXCR3水平檢測 AD患兒檢查當天和對照組體檢當天清晨空腹抽取靜脈血10 mL,以4 500 r/min離心20 min,離心半徑為10 cm,取其上清液置于-20 ℃冰箱待用。采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清IP-10和CXCR3水平,IP-10檢測試劑盒(貨號:YM-PD9468)購自上海遠慕生物科技有限公司,CXCR3檢測試劑盒(貨號:CSB-E08850h-1)購自上海恒斐生物科技有限公司,試驗過程按照試劑盒說明書進行。使用EnVision酶標儀(珀金埃爾默企業管理有限公司)檢測吸光度值,繪制標準品的回歸曲線,按照曲線方程計算血清IP-10和CXCR3水平。

2 結 果

2.1兩組基本資料的比較 兩組年齡、性別、BMI、鈣離子比較差異無統計學意義(P>0.05);與對照組比較,AD組嗜酸性粒細胞絕對值、嗜酸性粒細胞百分比、總lgE水平均升高(P<0.05)。見表1。

表1 兩組基本資料比較或n/n)

2.2兩組IP-10和CXCR3水平比較 AD組血清IP-10和CXCR3水平均較對照組升高(P<0.05)。見表2。

表2 兩組IP-10和CXCR3水平比較

2.33組血清IP-10、CXCR3水平和SCORAD比較 重度組IP-10、CXCR3水平和SCORAD均高于中度組和輕度組(P<0.05),中度組高于輕度組(P<0.05)。見表3。

表3 3組血清IP-10、CXCR3水平和SCORAD比較

2.4IP-10和CXCR3的相關性 相關性分析顯示,AD組血清IP-10與CXCR3水平呈正相關(r=0.671,P<0.001)。

2.5ROC曲線分析血清IP-10和CXCR3對AD的診斷價值 ROC曲線顯示,IP-10和CXCR3診斷AD發生的曲線下面積(AUC)分別為0.893和0.895,二者聯合診斷AD的AUC為0.961,二者聯合診斷的AUC高于IP-10和CXCR3單項診斷(P<0.001)。見圖1。

圖1 血清IP-10、CXCR3診斷AD的ROC曲線

3 討 論

AD是一種多因子異質性疾病,是遺傳和表觀遺傳因素、環境因子、免疫缺陷和上皮屏障功能障礙相互作用的結果[11]。不同地區AD的患病率不同,這種疾病通常發生在兒童早期,大約85%的病例在5歲左右可能發病,到7歲時疾病明顯緩解,在一小部分人群中,該病可能開始于成年期[12]。AD對患兒的心理健康和生活質量有重大影響,通常有哮喘、過敏性鼻結膜炎、食物過敏和精神性疾病等共病,AD的患病率和發病率近年來有所上升[13]。因此,尋找與AD有關的臨床診斷指標具有重要價值。

IP-10的誘導完全依賴于中性粒細胞,已有文獻證明皮膚中存在的一些細胞類型可產生IP-10,包括上皮角質形成細胞、髓樣細胞和感覺神經元[14]。在AD和相關慢性瘙癢障礙的人類和小鼠模型研究中,慢性病變中確實存在中性粒細胞和(或)中性粒細胞趨化因子[15]。研究發現,中性粒細胞通過觸發形成慢性瘙癢病變所需的分子變化,為急性到慢性瘙癢的過渡提供物質基礎,同時導致持續瘙癢[16]。IP-10是促炎趨化因子,是CXCR3的配體,IP-10促發了人類免疫缺陷病毒(HIV)靶細胞向淋巴組織的運輸,從而促進了新一輪感染,并幫助建立病毒庫[17]。研究表明,中性粒細胞在AD早期可誘發瘙癢和炎癥,包括滲透到皮膚時直接觸發瘙癢,或通過改變內源性瘙癢原的表達間接觸發瘙癢[18]。本研究結果表明,AD組血清IP-10水平較對照組升高,表明IP-10與AD的發生有關。重度組的IP-10水平高于中度組和輕度組,中度組明顯高于輕度組,提示隨著AD患兒嚴重程度的增加IP-10水平升高。

CXCR3主要在效應白細胞上表達,包括CD4+和CD8+T細胞、自然殺傷(NK)細胞、NK T細胞和B細胞的亞群,也被稱為CXCR3A,其有3個主要的功能配體:CXCL9、CXCL10和CXCL11,均是干擾素γ誘導型[19]。CXCR3配體CXCL10可引發小鼠急性和過敏性瘙癢,然而,它在慢性瘙癢中的作用此前并不清楚[20]。CXCR3及其配體在介導中樞神經系統炎癥疾病和控制中樞神經系統嗜神經病毒感染方面發揮著至關重要的作用[21]。最近,CXCR3作為共刺激分子的作用被證實,來自CXCR3缺陷小鼠的T細胞效應功能受損[22]。CXCR3已被報道在幾種免疫細胞類型中表達,如效應T細胞、CD4+Foxp3+T細胞、NK細胞和B細胞[23]。研究證明,在克氏錐蟲感染后,CXCR3在特定的CD8+T細胞中表達升高[24]。本研究顯示,與對照組比較,AD組血清CXCR3水平升高,提示CXCR3與AD的發生相關。此外,重度組的CXCR3水平高于中度組和輕度組,中度組高于輕度組,表明CXCR3水平與AD的嚴重程度有關。

相關性分析顯示,AD組血清IP-10與CXCR3水平呈正相關,提示二者共同調控AD的發生發展過程。IP-10和CXCR3聯合診斷AD的AUC高于二者單項診斷,提示IP-10和CXCR3聯合診斷對AD的診斷價值較高。綜上所述,AD患兒血清IP-10和CXCR3呈高表達,且二者呈正相關,二者在AD的發病及進展中發揮重要作用。