2018—2022年山東省采集臍帶血產婦血液檢測結果分析

李艷婷 宋安娜 宋麗丹 王忠，2 雒猛，2 賈曉鵬，2 劉心然

臍帶血干細胞的移植或輔助治療是一種重要的治療方法，近年來應用的案例越來越多，為臨床提供無傳染源的臍帶血是臍帶血庫的重要工作[1]。臍帶血庫作為特殊血站，除應遵循血站系統的相關法律法規、技術規范外，還需要遵守臍帶血庫自己的法律法規和技術規范；考慮傳染病存在母嬰傳播的風險及嬰兒抗體抗原表達不全造成檢測假陰性的可行性，臍帶血庫需對臍帶血相應的母血進行相關傳染病的檢測。本研究對山東省2018年1月—2022年12月采集臍帶血產婦的血液檢測結果進行回顧性分析，為本省內采集臍帶血的工作提供科學依據，確保臍帶血的安全入庫，以便更好地服務于臨床；同時本文的研究結果為國家后續修訂《臍帶血造血干細胞技術操作規程》中臍帶血及母親外周血的檢測項目或質量標準提供一定的參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月—2022年12月于山東省臍帶血造血干細胞庫簽訂臍帶血采集協議的561 423例產婦為研究對象，產婦年齡均在規范允許的18～45歲。采集臍帶血的產婦均符合健康征詢的要求，在臍帶血采集的前后7 d內[2]，采集每位產婦的2支靜脈血，1支為8 mL的血清學檢測，1支為帶有分離膠的5 mL核酸檢測。血清學檢測項目包括乙肝表面抗原（hepatitis b surface antigen，HBsAg）、丙肝抗體（anit hcv hcvab，抗-HCV）、梅毒螺旋體抗體（treponema pallidum antibody，抗-TP）、人類免疫缺陷病毒抗體（human immunodeficiency virus antibody，抗-HIV）、巨細胞病毒抗體（cytomegalovirus antibody，HCMV-IgM）。核酸檢測項目包括乙肝病毒DNA（hepatitis B virus DNA，HBV DNA），丙肝病毒RNA（hepatitis c virus RNA，HCV RNA）和人類免疫缺陷病毒RNA（human immunodeficiency virus RNA，HIV-1 RNA）。

1.2 儀器與試劑

全自動加樣儀（瑞士，Hamilton Micro lab star），全自動酶免分析儀（瑞士，Hamilton Micro lab Fame 24/20），核酸檢測設備（上海浩源，湖南圣湘）。

HBsAg檢測試劑盒（2019.12.31前采用珠海麗珠，上海科華，2020.01.01起采用英科新創，北京萬泰），抗-HCV檢測試劑盒（珠海麗珠，北京萬泰），抗-TP檢測試劑盒（2019.12.31前采用珠海麗珠，上海科華，2020.01.01起采用英科新創，北京萬泰），抗-HIV檢測試劑盒（2021.12.31前英科新創三代，2022.01.01起采用英科新創四代，珠海麗珠），HCMV-IgM檢測試劑盒（2018.12.31前采用北京高達，2019.01.01起采用珠海麗珠，2022.01.01后采用北京貝爾、濰坊康華）。核酸檢測試劑為上海浩源或湖南圣湘配套的試劑。

1.3 方法

1.3.1 血清學檢測

所有檢測均嚴格按照說明書要求進行操作，初檢篩查出有反應性樣本，采用雙孔雙試劑復檢。復檢樣本的4孔中，全部為無反應性，則判為樣本該項目無反應性，只要有1孔及以上有反應性，則判為檢測樣本該項目有反應性。同時針對復檢HBsAg有反應性的產婦對應的臍帶血進行相應項目的血清學檢測。抗-HIV篩查復檢有反應性的樣本，由專人專車送至濟南市疾控中心實驗室進行抗體確證實驗。

1.3.2 核酸檢測

血清學檢測結果無反應性的產婦，進行8人份（上海浩源）或6人份（湖南圣湘）的核酸混檢，混檢有反應性的樣本進行單人份拆分檢測。

1.4 統計學方法

采用 SPSS 26.0 統計學軟件進行數據分析。計數資料用n（%）表示，行χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清學檢測結果

2018—2022年酶免血清學檢測總不合格率為3.052%（17 135/561 423），且總不合格率逐年降低，年度間差異有統計學意義（P＜0.001）；HBsAg陽性率為2.218%（12 451/561 423），且總不合格率逐年降低，年度間差異有統計學意義（P＜0.001）；產婦HBsAg陽性，同時臍血HBsAg陽性率為1.791%（223/12 451）， 年度間差異有統計學意義（P＜0.001）；抗-TP陽性率為0.160%（900/561 423），年度間差異有統計學意義（P＜0.001）；抗-HIV篩查陽性率為0.046%（257/561 423），年度間差異有統計學意義（P＜0.001），經濟南市疾控中心確認抗-HIV抗體陽性1例；HCMV-IgM陽性率為0.573%（3 216/561 423），年度間差異有統計學意義（P＜0.001）；抗-HCV陽性率為0.055%（311/561 423），年度間差異無統計學意義（P＝0.119），見表1。

2.2 核酸檢測結果

HBV DNA陽性率為0.030%（150/495940），年度間差異無統計學意義（P＝0.887）；HCV RNA和HIV-1 RNA均為陰性，見表2。

表2 2018—2022年核酸檢測結果[例（%）]

3 討論

臍帶血為與孕婦和新生兒血容量和血循環無關的，由新生兒臍帶扎斷后遠端所采集的胎盤血，在過去是當醫療廢物進行處理。隨著科學技術的發展，臍帶血干細胞的應用已從當初的單純移植向多種疾病的治療發展，包括白血病、地中海貧血、再生障礙性貧血等血液疾病，以及腦癱、孤獨癥、免疫缺陷、糖尿病等非血液疾病[1]。臍帶血庫是指以人體造血干細胞移植為目的，具有采集、處理、保存和提供造血干細胞的能力，并具有相當研究實力的特殊血站。作為特殊的血站，既要遵守血站系統的法律法規技術規范，同時也要遵照臍帶血庫相關的法律法規技術規范；為確保臍帶血庫提供給臨床無傳染病的臍帶血，入庫前要對產婦的血液進行乙肝病毒、丙肝病毒、艾滋病病毒、梅毒螺旋體和巨細胞病毒的相關標志物進行檢測[2-4]。

乙肝病毒是我國目前流行最為廣泛且危害比較嚴重的一種傳染病，獻血者感染該病毒，有可能造成乙肝病毒的傳播。孕婦感染乙肝病毒，危害相當大。有研究報道與孕前未感染乙肝病毒女性相比，既往感染過乙肝病毒的女性，其子代發生先心病的風險可升高23%；與夫妻雙方孕前均未感染乙肝病毒的家庭相比，單純父方既往感染乙肝病毒也會增加子代罹患先心病的風險[5]。

關于產婦的HBsAg陽性感染，國內也有報道。王愛蘭等[6]報道南方醫科大學南海醫學檢驗科17 722例產婦的HBsAg陽性率為5.46%。張潔[7]報道鹽城市第三人民醫院檢驗科產婦的HBsAg陽性率為5.81%。杜亞琴[8]報道武漢市某基層醫院孕婦的HBsAg陽性率為6.70%。本研究發現山東地區采集臍帶血產婦HBsAg感染率也有相當高的比率，2018—2022年HBsAg感染率分別為2.513%（2 899/115 338）、2.245%（2 998/133 564）、2.227%（2 435/109 334）、2.091%（2 324/111 139）、1.950%（1 795/92 048），5年內HBsAg總感染率為2.218%（12 451/561 423），這與國內報道的產婦HBsAg陽性率較低。推測原因為采集臍帶血前要對產婦進行健康調查，如果產婦感染了乙肝，不允許捐獻臍帶血。

母嬰垂直傳播是乙肝病毒的重要傳播途徑。感染乙肝的孕婦，在懷孕期間進行母嬰阻斷，能夠達到90%以上的阻斷效果[9-10]。本研究發現2018—2022年HBsAg母嬰垂直傳播率為1.828%（53/2 899）、1.901%（57/2 998）、1.971%（48/2 435）、1.463%（34/2 324）、1.727%（31/1 795），5年內HBsAg母嬰垂直傳播率為1.791%（223/12 451），遠遠低于報道的水平。推測可能的原因為HBsAg陽性的孕婦，在懷孕期間進行了很好地阻斷，或者臍帶血為新生兒出生時采集，也有可能存在乙肝病毒已發生母嬰垂直傳播，但嬰兒體內HBsAg的量低于現有檢測方法的下限，而造成檢測結果的假陰性。關于對HBsAg陽性的孕婦阻斷母嬰垂直傳播的時機或阻斷失敗后新生兒HBsAg陽性出現的時間，是筆者后續調研的關注點。

丙肝主要通過血液暴露、性傳播、母嬰傳播等方式傳播的感染性疾病。全國一般人群丙肝陽性率約為0.60%；兒童抗-HCV陽性率為0.09%～0.26%；孕產婦抗-HCV陽性率為0.08%～0.50%[6-8，11]。本研究發現，山東省采集臍帶血產婦的抗-HCV的陽性率2018—2022年處于較低的水平，分別為0.056%（65/115 338）、0.060%（80/133 564）、0.062%（68/109 334）、0.039%（43/111 139）、0.060%（55/92 048），5年內抗-HCV總感染率為0.055%（311/561 423），鑒于丙肝母嬰傳播的危害，且目前對于丙肝的預防、治療及阻斷尚無有效的方法，所以抗-HCV陽性的產婦不建議儲存臍帶血，以減少未知的因臍帶血的應用導致的HCV的感染。

梅毒是系統性、慢性傳染性疾病，且存在潛伏期，如果孕婦感染梅毒，則可能導致流產、早產，甚至會導致死胎，是危害性較大的傳染病[7]。針對孕婦的抗-TP的陽性率，國內報道的數據為1.00%～1.35%[6-8]。本研究數據發現山東地區采集臍帶血產婦抗-TP 陽性率2018—2022年分別為0.229%（264/115 338）、0.234%（313/133 564）、0.135%（148/109 334）、0.083%（92/111 139）、 0.090%（83/92 048），5年內抗-TP總感染率為0.160%（900/561 423），抗-TP陽性率低于其他報道，分析原因為其代表了采集臍帶血的產婦，而非整個山東地區的產婦，在采集臍帶血前的健康征詢時，感染梅毒螺旋體的產婦是不允許采集臍帶血；另外，存在產婦感染梅毒后早治療的情況[12]。

抗-HIV篩查陽性率處于較低的水平，連續5年分別為0.042%（49/115 338）、0.043%（57/133 564）、0.066%（72/109 334）、0.059%（66/111 139）、0.014%（13/92 048），5年內抗-HIV總感染率為0.046%（257/561 423），與國內的有關報道基本一致[6，8]。2022年抗-HIV陽性率明顯低于其他年份，主要是2022年前采用的艾滋三代試劑，只檢測HIV抗體，2022年更換為四代試劑，是抗體/抗原聯檢試劑，由此推測，四代試劑篩查陽性率低于三代。本研究5年內抗-HIV確證陽性1例，處于極低的水平，推測為受檢者本身、試劑的原因以及試驗操作的原因等容易產生假陽性結果[13]。產婦作為特殊的人群，其體內的激素水平有別于常人，至于產婦抗-HIV篩查陽性而確證陰性，有待于后續跟蹤分析產生假陽性的原因。

HCMV是人類病毒性疾病的常見病原體之一，人類對HCMV普遍易感，我國超90%的育齡女性血清 HCMV-IgG陽性[14]。HCMV存在一定程度的母嬰垂直傳播，為確保臍帶血的安全性，臍帶血技術規范要求，采集臍帶血前需對產婦進行HCMV病毒抗體的篩查[3]。近5年山東地區采集臍帶血產婦的HCMV-IgM陽性率分別為0.818%（944/115 338）、0.622%（831/133 564）、0.516%（564/109 334）、0.563%（626/111 139）、0.273%（251/92 048），5年內HCMV-IgM總感染率為0.573%（3 216/561 423），處于較高的水平。通過HCMA的篩查可以保證臍帶血安全，告知產婦，能夠降低因母乳喂養帶來的母嬰傳播風險。

核酸檢測在縮短窗口期方面有優勢，只進行ELISA檢測仍存在輸血殘余風險，但核酸檢測又不能完全取代ELISA檢測。這是因為核酸檢測是反映機體病毒復制狀況，而ELISA則反映病毒感染后引起機體免疫應答的狀況，二者對獻血者的篩查缺一不可，均在降低輸血相關病毒感染風險方面發揮重要的互補作用[15]。臍帶血庫作為特殊血站，為確保儲存的臍帶血安全，本單位自2018年5月份正式實施酶免陰性的樣本，進行核酸檢測的策略，2018—2022年HBV DNA陽性率分別為0.036%（26/72 821）、0.030%（39/128 909）、0.028%（29/104 584）、0.029%（30/103 202）、0.030%（26/86 424），5年內HBV DNA總陽性率為0.030%（150/495 940），未出現HCV RNA和HIV-1 RNA陽性的樣本敏感性篩查結果來看，酶免陰性的血液仍能篩查出一定比例的陽性。由于乙型肝炎窗口期較長，隱匿性HBV感染或HBV變異株的存在導致ELISA檢測存在較高的漏檢率，核酸檢測可以直接檢測病毒的遺傳物質，縮短病毒檢測窗口期，敏感性和特異性高，有效彌補了血清學檢測的不足[16]。鑒于臍帶血移植大多在受者免疫力弱或相當低于的情況下應用，比一般人群更能感染病毒，采用酶免和核酸兩種檢測方法，能夠大大提高臍帶血應用的安全性。

綜上所述，山東地區采集臍帶血產婦的傳染病陽性率處于較低的水平，能夠保證臨床用臍帶血的安全。鑒于目前全國只有7家合法的臍帶血庫，檢測的樣本量遠遠低于全國的血液系統；因此定期參加血液系統的質評活動與會議交流，采用先進的檢測方法、先進的設備、敏感性高的檢測試劑，保證臍帶血的安全，才能讓臍帶血更好地造福于需要的患者。