血清SCC M-CSF Chemerin水平對宮頸上皮內瘤變患者診斷評估價值

孫 莉, 宋玉榮, 胡 頻, 傅柳陶

(安徽醫科大學第二附屬醫院, 安徽 合肥 230001)

宮頸上皮內瘤變(Cervical intraepithelial neoplasia,CIN)是宮頸癌的癌前病變,高危型HPV感染是引起本病的重要因素之一。多數CIN患者無特異表現,部分患者可出現白帶異常、宮頸糜爛等癥狀和體征[1]。陰道鏡、病理學檢查是臨床診斷CIN的主要方法,但陰道鏡檢查受到操作人員的主觀因素影響較大,可能出現誤診或漏診。病理檢查客觀性強,但獲取標本時屬于有創操作,患者的依從性較差。而血清實驗室檢查具有標本獲取簡便、創傷小、結果較客觀等優點,在CIN的診斷中具有重要價值,但目前對于最佳血清學診斷指標尚無統一認識[2]。鱗狀細胞癌抗原(Squamous cell carcinoma antigen,SCC)是鱗狀上皮細胞膜產生的特異性腫瘤抗原,在宮頸癌前病變期即出現異常表達[3]。巨噬細胞集落刺激因子(Macrophage colony stimulating factor,M-CSF)具有多種生物學功能,參與多種惡性腫瘤的發生、發展[4]。趨化素(Chemokinin; diagnosis,Chemrin)是一種脂肪因子,可促進腫瘤細胞生長、增殖[5]。本研究探討CIN患者血清SCC、M-CSF、Chemrin的變化及其對CIN的診斷價值,現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料:選取我院2019年4月至2022年4月經病理學檢查確診的101例宮頸上皮內瘤變(CIN)患者作為CIN組、同期經病理學檢查證實為早期宮頸癌患者50例作為宮頸癌組,兩組患者的基線資料比較,差異無統計學意義,具有較好的均衡性和可比性,詳見表1。納入標準:①本研究診斷的早期宮頸癌患者、CIN患者診斷標準參考《宮頸癌及癌前病變規范化診療指南(試行)》[6]中的標準;②年齡19～59歲;③CIN患者及早期宮頸癌患者均經過取宮頸組織進行病理學活檢證實,宮頸癌均為原位癌,病理學類型為鱗癌或腺癌;④本研究相關檢查實施前獲得研究對象的知情同意并簽署相關協議書,保護研究對象的隱私。排除標準:①近3個月使用免疫抑制劑;②放化療病史;③宮頸環切手術病史;④合并其他類型惡性腫瘤患者;⑤伴有生殖系統及泌尿系統其他病毒感染;⑥HIV感染。

表1 兩組研究對象的基線資料情況

1.2血清指標檢測:在手術前、手術后3個月時抽取患者空腹狀態下靜脈血標本3mL,室溫靜置0.5h后離心處理。離心機參數:轉速4000r/min,離心半徑6cm,離心時長10min。取血清采用酶聯免疫吸附法檢測血清SCC、M-CSF、Chemerin水平,試劑盒為美國雅培公司產品。檢測儀器:羅氏E170全自動電化學發光免疫分析儀。

1.3HR-HPV病毒載量檢測:于患者入院時采用專用細胞采集器采樣,將配套刷子置于宮頸口,均勻用力旋轉5周,取樣后置于試管中,采用第二代雜交捕獲技術定量檢測HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68型等13種HPV-DNA病毒載量。檢測儀器:美國Digene公司DML2000基因雜交信號擴大儀。標準陽性對照臨界值(CO)的比值(RLU/CO)表示樣本中HPV-DNA含量,檢測值≥1為陽性。

1.4手術方法:CIN患者于月經干凈后3～7d后接受利普刀手術治療,術前至少7d禁止性生活,囑患者術前排空膀胱,向宮頸周圍注射2%利多卡因行宮頸周圍局部麻醉。患者取膀胱截石位,常規消毒鋪巾,置入陰道鏡至宮頸,鏡下觀察病灶。采用碘染宮頸,宮頸部位涂抹碘伏,棕色為正常區域,芥末黃色或不著色為病變區域。置入利普刀,設置功率30～40W。對病變部位外緣3～5mm由內向外行逆時針椎切,椎切深度為15～20mm,創面電凝止血。切除組織送病理檢查。

2 結 果

2.1CIN組和宮頸癌組患者的SCC、M-CSF、Chemerin測定值比較:宮頸癌組患者的血清SCC、M-CSF、Chemerin測定值顯著高于CIN組患者,差異具有統計學意義(P<0.05),見表2。

表2 CIN組和宮頸癌組患者的SCC M-CSF Chemerin測定值比較

2.2SCC、M-CSF、Chemerin鑒別診斷CIN的價值:以病理學結果作為診斷金標準,以患者病理學結果是否CIN作為狀態變量(否=0、是=1)血清SCC、M-CSF、Chemerin測定值繪制ROC曲線,SCC、M-CSF、Chemerin鑒別診斷CIN的ROC曲線下面積分別為0.906、0.846、0.791,見圖1、表3。

圖1 SCC、M-CSF、Chemerin鑒別診斷CIN的ROC曲線

表3 SCC M-CSF Chemerin鑒別診斷CIN的診斷價值

2.3不同分期的CIN患者SCC、M-CSF、Chemerin測定值比較:經病理學檢查,101例CIN患者中有Ⅰ期患者21例、Ⅱ期患者46例、Ⅲ期患者34例,隨著CIN分期的增高,患者的SCC、M-CSF、Chemerin水平逐漸增高,各組之間差異具有統計學意義(P<0.05);表4。

表4 不同CIN分期的CIN患者SCC M-CSF Chemerin測定值比較

2.4不同HR-HPV DNA的CIN患者SCC、M-CSF、Chemerin測定值比較:HR-HPV DNA陽性CIN患者的SCC、M-CSF測定值高于陰性組患者,各組之間差異具有統計學意義(P<0.05);HR-HPV DNA陽性與陰性患者的Chemerin水平比較,差異無統計學意義(P>0.05),見表5。

表5 不同HR-HPV DNA的CIN患者SCC M-CSF Chemerin測定值比較

2.5CIN患者手術前后的SCC、M-CSF、Chemerin測定值比較:在手術后3個月,CIN患者的SCC、M-CSF、Chemerin測定值均降低,差異具有統計學意義(P<0.05),見表6。

表6 CIN患者手術前后的SCC M-CSF Chemerin測定值比較

3 討 論

宮頸癌是婦科常見的惡性腫瘤之一,世界衛生組織的調查發現,每年約有宮頸癌新增病例53萬,中國的新發病例數約占全球總數的29%[7]。HPV感染是引起宮頸上皮內瘤變的危險因素,其中以HPV16、18最為常見,被稱之為高危型HPV感染。HPV感染后首先累及復層鱗狀上皮中的基底細胞,逐漸累及上層細胞而致感染到達基底層,引起復層鱗狀上皮細胞異常分化而致惡變[8]。基礎研究發現,宮頸癌的發生歷經癌前病變、早期浸潤、浸潤癌等三個階段。在癌前病變階段早期診斷和治療可有效控制或逆轉病情,避免進展至宮頸浸潤癌[9]。目前臨床仍在不斷探索CIN的早期診斷方法。

血清學檢查取樣方便,結果相對客觀,還能避免因視野局限或取樣位置不準確等造成的漏診或誤診。因此血清學檢測已成為臨床診斷CIN的新的研究熱點[10]。SCC是存在于子宮、肺、頭頸部等部位鱗狀上皮細胞的一種糖蛋白,在上述部位的鱗狀上皮細胞發生惡變后,SCC大量釋放至血中,因此血清SCC水平可作為鱗狀細胞癌的特異性診斷指標之一[11]。M-CSF具有多種生理功能,低水平時能抑制腫瘤細胞生長,高水平時可促進腫瘤細胞侵襲和轉移[12]。Chemerin可活化G蛋白耦聯受體,誘導免疫細胞向腫瘤區域遷移,參與腫瘤細胞免疫反應以及腫瘤細胞增殖過程,可反映腫瘤細胞增殖情況。

本研究發現,宮頸癌組患者的血清SCC、M-CSF、Chemerin測定值顯著高于CIN組患者。SCC、M-CSF、Chemerin鑒別診斷CIN的ROC曲線下面積分別為0.906、0.846、0.791。上述結果提示,與宮頸癌患者相比,CIN患者的SCC、M-CSF、Chemerin測定值更低,可將上述指標作為CIN的鑒別診斷指標。這是由于宮頸癌患者鱗狀上皮細胞的破壞程度大于CIN,因此宮頸癌患者血中SCC水平相對更高。HPV除了會直接引起宮頸癌細胞增生外,還會激活體內M-CSF,共建一個自分泌環,促使CIN向宮頸癌進展,因此M-CSF高表達與宮頸癌的發生密切相關。宮頸癌患者病灶局部應激性免疫反應增強,Chemerin被異常激活而在局部組織和血中高表達。

根據細胞非典型增生程度可將CIN分為3級,Ⅰ期患者病情相對較輕,并可能自愈。Ⅱ期-Ⅲ期患者病情相對較嚴重[13]。本研究發現,101例CIN患者中有Ⅰ期患者21例、Ⅱ期患者46例、Ⅲ期患者34例,隨著CIN分期的增高,患者的SCC、M-CSF、Chemerin水平逐漸增高。HR-HPV DNA陽性CIN患者的SCC、M-CSF測定值高于陰性組患者。該結果提示,CIN分級較高者血清SCC、M-CSF、Chemerin水平更高;HR-HPV DNA陽性CIN患者的SCC、M-CSF水平更高。這是由于CIN分期較高者異型細胞所占比例較大,核分裂相增多。HR-HPV DNA陽性者屬于高危感染,以HPV-16、18最常見,鱗狀上皮細胞惡變程度以及局部腫瘤細胞免疫反應更加嚴重。

利普刀手術是臨床處理CIN的常用方法,本研究發現,在手術后3個月,CIN患者的SCC、M-CSF、Chemerin測定值均降低。該結果提示,利普刀對CIN具有良好的治療效果。手術后鱗狀上皮細胞惡變的組織被切除,局部病毒載量下降,腫瘤細胞免疫反應減輕,因此SCC、M-CSF、Chemerin水平會顯著降低。

綜上所述,與宮頸癌患者相比,CIN患者的SCC、M-CSF、Chemerin測定值更低,但是隨著CIN分級增高、HR-HPV DNA陽性表達患者的SCC、M-CSF、Chemerin水平更高,檢查SCC、M-CSF、Chemerin水平能鑒別診斷CIN與宮頸癌。