非小細(xì)胞肺癌并發(fā)肺栓塞患者微小核糖核酸-1233、血清堿性成纖維細(xì)胞生長因子、血細(xì)胞參數(shù)變化及與患者預(yù)后關(guān)系

解寶泉,姚仲欣

(1.華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科,河北 唐山 063000;2.秦皇島市中醫(yī)醫(yī)院放射科,河北 秦皇島066000)

肺癌是全球范圍內(nèi)最常見的惡性腫瘤之一[1]。調(diào)查研究顯示,肺癌人群發(fā)病率達(dá)11.6%,病死率達(dá)18.4%,是全球發(fā)病率、病死率最高的癌癥之一[2-3]。非小細(xì)胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)是一種常見的且具有高度致死性的肺癌類型,在肺癌發(fā)病中占據(jù)了大部分比例[4]。主要包括腺癌、鱗癌和大細(xì)胞癌等亞型[5]。急性肺栓塞(Acute pulmonary embolism,APE)是NSCLC的一種嚴(yán)重并發(fā)癥,是由血栓栓塞肺動脈或其分支引起的疾病,常常導(dǎo)致肺循環(huán)的急性血流阻塞,嚴(yán)重時甚至危及生命[6-7]。早起識別APE的危險分層及預(yù)測其預(yù)后,對指導(dǎo)臨床治療,提高患者生存治療、降低死亡風(fēng)險具有重要意義。miR-1233作為一種微小RNA分子,在腫瘤發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。研究表明,微小RNA與NSCLC的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)[8]。血清堿性成纖維細(xì)胞生長因子(Basic fibroblast growth factor,bFGF)是一種重要的細(xì)胞因子,與腫瘤的血管生成和侵襲轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系[9]。此外,血小板計數(shù)、白細(xì)胞計數(shù)和紅細(xì)胞計數(shù)等血細(xì)胞參數(shù)也可以反映出機(jī)體的炎癥狀態(tài)和血液凝結(jié)功能。為探究并發(fā)急性肺栓塞的NSCLC患者以上指標(biāo)的變化與危險分層及短期預(yù)后的關(guān)系,本研究對比了合并肺栓塞與未合并肺栓塞患者的bFGF、miR-1233、血細(xì)胞參數(shù)差異,現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 采取病例對照研究方法,選取華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院2018年6月至2021年6月確診的110例非小細(xì)胞肺癌合并肺栓塞患者作為栓塞組、另外選取該院同期收治的非小細(xì)胞肺癌但未合并肺栓塞的患者110例作為對照組,兩組患者一般資料比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05),見表1。病例納入標(biāo)準(zhǔn):①肺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《中華醫(yī)學(xué)會肺癌臨床診療指南(2018版)》[10]中的標(biāo)準(zhǔn),以肺部CT、MRI及纖維支氣管鏡檢查結(jié)果確診;②肺栓塞診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《急性肺栓塞診斷與治療中國專家共識(2015)》[11],以彩色多普勒超聲結(jié)果進(jìn)行診斷,顯示靜脈管腔增寬、血流信號減弱或消失;③患者均在我院接受治療;④患者年齡50～79歲;⑤研究方案獲得醫(yī)學(xué)倫理委員會審查并批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn):①患者合并精神疾病或老年癡呆等;②患者伴有血液系統(tǒng)感染;③患者合并肺結(jié)核、支氣管擴(kuò)張、肺纖維化等其他基礎(chǔ)肺部疾患;④資料缺失,無法完成統(tǒng)計的患者。

表1 兩組患者一般資料比較

1.2 檢測方法 所有受試者于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下,采集外周肘靜脈血。使用TAKARA公司的RNA提取試劑盒,按照說明書中的步驟提取外周全血RNA,使用反轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),根據(jù)SYBR RT-PCR試劑盒說明書(中國杭州博日科技有限公司)進(jìn)行RT-PCR實驗,選擇內(nèi)參為 U6,采用 2-ΔΔCt法來測定miR-1233相對表達(dá)量,重復(fù)測量3次,取平均值;采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELASA)檢測bFGF、氨基端前腦鈉素(NT-proBNP)水平,試劑盒購自于上海羅氏公司;采用全自動生化分析儀(701 上海羅氏)檢測血清白蛋白(ALB)、血小板(PLT)、尿素氮(BUN)水平;采用全自動凝血分析儀(750LAS 沃芬)檢測PT、APTT水平。采用全自動血細(xì)胞分析儀(UniCel DxH 600 美國貝克曼庫爾特),檢測全血紅細(xì)胞分布寬度(RDW)、血小板分布寬度(PDW)、血小板平均體積(MPV)、血小板淋巴細(xì)胞比率(PLR)、中性粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞比率(NLR)水平。

1.3 肺栓塞危險分層判斷標(biāo)準(zhǔn) 肺栓塞危險分層判斷標(biāo)準(zhǔn)參考《急性肺栓塞診斷與治療中國專家共識(2015)》[11],主要考慮患者的既往肺栓塞病史、心率≥100次/min、過去4周患者是否存在手術(shù)或制動史、咯血、腫瘤活動期、深靜脈血栓的臨床表現(xiàn)、其他臨床癥狀等。既往有肺栓塞或DVT病史記1分,心率75～100次/min、心率≥100次/min,過去4周患者存在手術(shù)或制動史記1分,有咯血癥狀記1分,腫瘤活動期記1分,單側(cè)下肢痛記1分,下肢深靜脈觸痛和單側(cè)腫脹記1分,年齡大于65歲記1分。評分范圍≤6分為中低風(fēng)險、≥7分為高風(fēng)險。

2 結(jié) 果

2.1 栓塞組和對照組的bFGF、miR-1233及血細(xì)胞參數(shù)比較 栓塞組患者的bFGF、miR-1233、RDW、MPV、PLR、NLR水平均顯著高于對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05),見表2。

表2 栓塞組和對照組bFGF、miR-1233及血細(xì)胞參數(shù)比較

2.2 不同風(fēng)險分層的栓塞組患者bFGF、miR-1233及血細(xì)胞參數(shù)比較 根據(jù)血栓風(fēng)險分層,高風(fēng)險組患者的bFGF、miR-1233、RDW、MPV、PLR、NLR水平均顯著高于中低風(fēng)險組患者,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05),見表3。

表3 不同風(fēng)險分層的栓塞組患者bFGF、miR-1233及血細(xì)胞參數(shù)比較

2.3 不同預(yù)后結(jié)局栓塞組患者bFGF、miR-1233及血細(xì)胞參數(shù)比較 根據(jù)治療30 d患者的預(yù)后結(jié)局情況進(jìn)行分組,其中15例患者因肺栓塞死亡納入死亡組,其余患者納入生存組,死亡組患者的bFGF、miR-1233、RDW、MPV、PLR、NLR水平均顯著高于生存組患者,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。見表4。

表4 不同預(yù)后結(jié)局栓塞組患者bFGF、miR-1233及血細(xì)胞參數(shù)比較

2.4 不同預(yù)后結(jié)局栓塞組患者各項資料的單因素分析 死亡組患者的ALB、APTT低于對照組,NT-proBNP、房顫發(fā)生率、肺部感染率高于生存組患者,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05),見表5。

表5 不同預(yù)后結(jié)局栓塞組患者各項資料單因素分析

2.5 影響NSCLC合并肺栓塞患者預(yù)后結(jié)局的多因素分析 以單因素分析具有統(tǒng)計學(xué)意義的bFGF、miR-1233、RDW、MPV、PLR、NLR、ALB、APTT、NT-proBNP、是否合并房顫、是否合并肺部感染作為自變量,以患者30 d治療的預(yù)后結(jié)局作為因變量建立Logistic回歸模型,結(jié)果顯示:ALB降低、NT-proBNP升高、合并房顫、合并肺部感染、bFGF升高、miR-1233升高、PLR升高、NLR升高是NSCLC合并肺栓塞患者不良預(yù)后結(jié)局的獨立危險因素(均P<0.05)。見表6。

表6 影響NSCLC合并肺栓塞患者預(yù)后結(jié)局的多因素分析

3 討 論

NSCLC是最常見的肺癌類型,隨著疾病進(jìn)展容易導(dǎo)致各種并發(fā)癥的發(fā)生,急性肺栓塞是NSCLC嚴(yán)重的并發(fā)癥,具有較高的死亡風(fēng)險[12]。目前研究認(rèn)為NSCLC并發(fā)急性肺栓塞與多種機(jī)制相關(guān),其中血液高凝狀態(tài)、血管內(nèi)皮損害、腫瘤栓塞是導(dǎo)致APE的主要因素。癌癥可以引起機(jī)體血液高凝狀態(tài),進(jìn)一步引起血小板增多、凝血因子異常活化,導(dǎo)致血栓形成的風(fēng)險增加。NSCLC可以直接侵犯肺血管壁,導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷和破裂,激活凝血系統(tǒng),引起血小板聚集,導(dǎo)致血栓形成。此外,腫瘤組織在肺循環(huán)中脫落可形成栓子,這些癌栓可以阻塞肺動脈或其分支,導(dǎo)致急性肺栓塞的發(fā)生[13-15]。合并APE會加重機(jī)體缺血缺氧,影響NSCLC治療效果[16]。因此,對NSCLC患者,早期評估其危險分層、預(yù)測預(yù)后,以盡早采取積極的治療,可以減少并發(fā)癥的風(fēng)險并改善預(yù)后。本研究對比合并肺栓塞與未合并肺栓塞患者的bFGF、miR-1233、血細(xì)胞參數(shù)的差異,從而探討其與急性肺栓塞的NSCLC患者危險分層及短期預(yù)后的關(guān)系。

本研究結(jié)果顯示,合并APE的NSCLC患者bFGF、miR-1233、RDW、MPV、PLR、NLR水平均顯著高于未合并APE的NSCLC患者。說明NSCLC患者發(fā)生APE與bFGF、miR-1233及血細(xì)胞參數(shù)具有相關(guān)性。這與張倩等[17]的研究結(jié)果相一致。bFGF是一種促進(jìn)細(xì)胞生長和血管生成的細(xì)胞因子。在合并急性肺栓塞的NSCLC患者中,肺血栓導(dǎo)致的肺組織缺血和缺氧狀態(tài)刺激了腫瘤細(xì)胞和周圍組織釋放bFGF,從而引起bFGF水平升高。急性肺栓塞的NSCLC患者中炎癥反應(yīng)激活、炎癥因子釋放增加,如核因子-κB(NF-κB)、絲裂原活化蛋白(AP-1)等[18],這些轉(zhuǎn)錄因子可以結(jié)合miR-1233基因啟動子區(qū)域,促進(jìn)其轉(zhuǎn)錄活性[19],從而直接或間接地增加miR-1233的合成和表達(dá)。合并APE的NSCLC患者由于炎癥反應(yīng)的激活與血小板的活化,中性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞及血小板水平升高,從而導(dǎo)致PLR、NLR水平升高。血栓形成后,血小板消耗增加,導(dǎo)致血小板體積增大,MPV水平升高。此外,肺栓塞引起的肺循環(huán)障礙和缺氧狀態(tài)可能導(dǎo)致紅細(xì)胞的變形和早衰,從而使RDW水平增加。

本研究結(jié)果顯示,合并APE的NSCLC高風(fēng)險患者的bFGF、miR-1233、RDW、MPV、PLR、NLR水平均顯著高于中低風(fēng)險患者。說明NSCLC合并APE的高風(fēng)險與bFGF、miR-1233、RDW、MPV、PLR、NLR水平升高具有相關(guān)性。當(dāng)患者發(fā)生 APE 后,機(jī)體處于應(yīng)激狀態(tài),體內(nèi)炎癥反應(yīng)、血小板及凝血系統(tǒng)激活。隨疾病嚴(yán)重程度的升高,患者應(yīng)激反應(yīng)明顯增強(qiáng),炎癥反應(yīng)、血小板及凝血系統(tǒng)激活越明顯,從而使得bFGF、miR-1233的表達(dá)增加,炎癥細(xì)胞水平、血小板處于較高水平,RDW、MPV、PLR、NLR水平升高。王少飛等[20]的研究結(jié)果表明,NLR 異常升高與 APE 危險分層增加相關(guān),與本研究結(jié)果相一致。

本研究結(jié)果顯示,死亡組的bFGF、miR-1233、RDW、MPV、PLR、NLR水平均顯著高于生存組患者。進(jìn)一步多因素分析顯示,ALB降低、NT-proBNP升高、合并房顫、合并肺部感染、bFGF升高、miR-1233升高、PLR升高、NLR升高是NSCLC合并肺栓塞患者不良預(yù)后結(jié)局的獨立危險因素。低白蛋白血癥可以導(dǎo)致患者免疫功能下降和身體的負(fù)擔(dān)增加,加重機(jī)體代謝紊亂、營養(yǎng)不良或全身炎癥狀態(tài),從而影響患者的恢復(fù)和生存率。當(dāng)合并APE的NSCLC患者出現(xiàn)NT-proBNP升高、合并房顫時,意味著心血管系統(tǒng)的受累,合并靶器官損害提示著預(yù)后不良。合并肺部感染會導(dǎo)致炎癥反應(yīng)加劇和免疫功能下降,加重患者的病情,影響預(yù)后。bFGF升高可促進(jìn)腫瘤血管生成,反映了腫瘤的生長和侵襲能力增強(qiáng),這與肺癌的惡性程度和預(yù)后不良密切相關(guān)。此外,PLR、NLR升高,提示體內(nèi)炎癥水平升高,其可能與腫瘤侵襲性相關(guān),從而導(dǎo)致預(yù)后不良。本研究表明,miR-1233的升高可能與腫瘤的預(yù)后不良相關(guān),其具體機(jī)制目前尚未十分明確,推測可能為miR-1233的升高與炎癥反應(yīng)加重相關(guān)。

綜上所述,bFGF、miR-1233及血細(xì)胞參數(shù)與NSCLC發(fā)生肺栓塞有關(guān),并且與患者治療的不良預(yù)后結(jié)局關(guān)系密切。