疫苗免疫劑量及次數對鴨病毒性肝炎母源抗體的影響

近年來，隨著中國養鴨產業快速發展，規模化鴨場也逐漸增多，由于部分鴨養殖場管理不當、養殖技術水平有限、疫苗使用不當等導致鴨容易感染鴨病毒性肝炎；該病由鴨肝炎病毒引起，屬于高度致病性的傳染性疾病，發病沒有季節特征，隨著鴨的年齡增加死亡率逐漸降低，主要導致20日齡內的雛鴨死亡，給鴨業養殖造成重大經濟損失，目前，對于該病的防治主要采用疫苗免疫；對于疫苗的免疫劑量和次數對該病的母源抗體的影響研究較少，本研究通過注射不同劑量和次數鴨病毒性肝炎弱毒苗，探討對患有鴨病毒性肝炎母源抗體的影響，旨在為鴨病毒性肝炎防治提供參考。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗動物

試驗鴨選自某規模翻鴨養殖場，2月齡150只鴨作為試驗組，1日齡無母源抗體雛翻鴨120只作為對照組。

1.2 試驗藥物及試劑

CH60 株鴨病毒性肝炎弱毒疫苗購于某生物疫苗有限公司；鴨病毒性肝炎抗體檢測試劑盒購于上海雅吉生物科技有限公司；AV2111 株鴨肝炎病毒購于中國獸藥監察所。

1.3 試驗方法

1.3.1 疫苗免疫

將購買的2月齡150 只翻鴨進行隨機分組，分為免疫1 組、免疫2 組和免疫3 組，每組各50只；各組按不同的免疫程序免疫鴨病毒性肝炎弱毒疫苗；免疫1 組在留種蛋的21 d 前腿部注射0.5 mL 疫苗免疫；免疫2 組在留種蛋的35 d和21 d 腿部注射0.5 mL 疫苗免疫；免疫3 組在留種蛋的35 d 和21 d 前免疫0.5 mL 和1 mL 疫苗。免疫完后收獲的第1 周和第4 周種產的種蛋進行孵化。

1.3.2 試驗分組

將上述免疫1 組、免疫2 組和免疫3 組免疫后第1 周種蛋孵出的雛鴨隨機挑選150 只，分為A 組，然后在隨機分為A1 組、A2 組和A3 組，每組50 只；然后購買50 只沒有母源抗體的雛翻鴨為對照組。對照組和試驗組的雛鴨分別在1、3、6、9 d 時心臟采血，采集的血液進行血清分離后按ELISA 抗體檢測試劑盒的說明書進行操作；同時于1、3、6、9 d 在每組隨機挑選25 只，皮下注射鴨肝炎病毒進行攻毒試驗，注射劑量0.1 mL，剩余的25 只雛鴨和對照組則皮下注射同劑量的生理鹽水。隔離飼養并做好觀察記錄雛鴨發病和死亡只數。

免疫1 組、免疫2 組和免疫3 組免疫后收獲的第4 周種蛋孵出的雛鴨隨機挑選150 只，分為B 組，然后在B1 組、B2 組和B3 組，每組50 只；試驗方法同上。

1.4 數據處理

利用試驗記錄的攻毒后死亡只數計算保護率，保護率=（試驗只數-死亡只數）/試驗只數*100%。

2 結果

2.1 A 組的抗體水平檢測和攻毒保護結果

由表1 可以看出對照組沒有母源抗體的保護，所取的1 周種蛋孵出的雛鴨肝炎病毒的抗體效價為0，攻毒后的保護率幾乎為0；A3 組的抗體效價和保護率水平均高于A1、A2 組，說明A3 組獲得的母源抗體較高，與起始免疫3 組的疫苗免疫劑量增加有關。

表1 A 組的抗體水平檢測和攻毒保護結果

2.2 B 組的抗體水平檢測和攻毒保護結果

由表2 可以看出所取的4 周種蛋孵出的雛鴨肝炎病毒的抗體效價B1 組、B2 組和B3 組的抗體效價低于1 周種蛋孵出的雛鴨，符合母源抗體的消失規律；B3 組的母源抗體效價高于B1和B2 組，攻毒后的保護率也高于B1 和B2 組，與起始免疫3 組的疫苗免疫劑量增加有關。

表2 B 組的抗體水平檢測和攻毒保護結果

3 結論

鴨肝炎病毒主要感染20日齡尤其是10日齡內的雛鴨，因此，對于做好20日齡以內雛鴨的鴨肝炎病毒的防疫工作非常重要。目前，用于該病的疫苗為滅活苗和弱毒苗。相關研究發現，對孵出的雛鴨進行免疫，雛鴨在產生保護抗體的過程中還易感染鴨肝炎病毒；對于雛鴨來說，越多的母源抗體雛鴨獲得保護的可能性越高。本試驗說明種鴨在留種前采用合理免疫方法，可以提高雛鴨的母源抗體含量。