血清Cyr61、MHR、LHR 水平及聯(lián)合檢測(cè)與冠心病的相關(guān)性分析

錢人杰，丁振江

（承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院心臟內(nèi)科，河北 承德 067000）

心血管疾病（cardiovascular disease）長(zhǎng)期占據(jù)城鄉(xiāng)居民總死亡原因的首要位置，并給居民和社會(huì)帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)日漸加重，已成為重大的公共衛(wèi)生問(wèn)題，同時(shí)因冠心病而住院的患者占心血管內(nèi)科住院患者的首位[1，2]，因此盡早發(fā)現(xiàn)并篩查出潛在的冠心病并預(yù)測(cè)其風(fēng)險(xiǎn)程度是非常必要的。CCN 蛋白家族成員1（CCN1），又稱富含半胱氨酸蛋白61（Cyr61），是內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和心肌細(xì)胞分泌的富含半胱氨酸的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白[3]，其在動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中參與了促炎以及調(diào)節(jié)膽固醇代謝作用，是一種新興的治療靶點(diǎn)。單核細(xì)胞與高密度脂蛋白膽固醇比值（MHR）、低密度脂蛋白膽固醇/高密度脂蛋白膽固醇比值（LHR）作為新出現(xiàn)的基于炎癥以及氧化應(yīng)激的指標(biāo)，可以有效反映患者的抗炎及抗氧化能力，可能成為心血管疾病新的預(yù)測(cè)及預(yù)后因子[4]。本研究旨在本研究將探討血清Cyr61、MHR、LHR 水平與冠心病臨床診斷及冠狀動(dòng)脈病變程度的關(guān)系，以期為冠心病的診斷和治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021 年11 月-2022 年6 月承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院住院治療并行冠狀動(dòng)脈造影檢查的患者198 例作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①無(wú)冠狀動(dòng)脈造影檢查禁忌；②臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①先天性心臟病、心肌病、原發(fā)性瓣膜性疾病、感染性心內(nèi)膜炎、心肌炎、心包炎等患者；②嚴(yán)重創(chuàng)傷或臨床確診為惡性腫瘤患者；③感染性疾病患者；④臨床確診為全身免疫系統(tǒng)疾病患者；⑤臨床確診為血液病患者；⑥臨床確診為患有肝、腎疾病的患者。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過(guò)。

1.2 方法 基線人口學(xué)特征: 通過(guò)查閱入選患者的住院病歷收集資料，包括年齡、性別、高血壓病、糖尿病、吸煙史、冠心病家族史。實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)：所有納入患者均于冠狀動(dòng)脈造影術(shù)前抽取動(dòng)脈血約5 ml，以3000 r/min 離心10 min，收集上清液存放至-80℃冰箱中待用。血清Cyr61 水平采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)，試劑盒購(gòu)自廣州剪刀手基因科技有限公司。同時(shí)患者的總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、血糖、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、肌酐、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血小板計(jì)數(shù)等相關(guān)臨床指標(biāo)的檢測(cè)均于入院后采集靜脈血由我院檢驗(yàn)科完成檢測(cè)，計(jì)算MHR、LHR。冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度評(píng)估：采用目前國(guó)際公認(rèn)的Gensini 評(píng)分作為評(píng)估冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程的方法，冠狀動(dòng)脈狹窄程度0%～25%為1 分；冠狀動(dòng)脈狹窄程度26%～50%為2分；冠狀動(dòng)脈狹窄程度51%～75%為4 分；冠狀動(dòng)脈狹窄程度76%～90%為8 分；冠狀動(dòng)脈狹窄程度91%～99%為16 分；冠狀動(dòng)脈狹窄程度100%為32分；左主干×5，左前降支近段×2.5，中段×1.5，遠(yuǎn)段×1；第一對(duì)角支×1，第二對(duì)角支×0.5；左回旋支近段×2.5，中段×1，遠(yuǎn)段×1，后降支×1，后側(cè)支×0.5；右冠狀動(dòng)脈近段×1，中段×1，遠(yuǎn)段×1，后降支×1。所有病變冠狀動(dòng)脈積分之和即為該研究對(duì)象的Gensini 評(píng)分，并按照中分位法分為低分組、高分組。依據(jù)冠狀動(dòng)脈造影結(jié)果，即左主干、左前降支、回旋支、右冠狀動(dòng)脈或其主要分支的血管管腔狹窄≥50%作為冠心病組，其余作為非冠心病組。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料符合正態(tài)分布的以（）表示，采用檢驗(yàn)或單因素方差分析，偏態(tài)分布的以[（25，75）]表示，檢驗(yàn)方法采用非參數(shù)檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以[（%）]表示，采用2檢驗(yàn)。通過(guò)Logistic回歸分析冠心病的影響因素。通過(guò)Mann-Whitney秩和檢驗(yàn)分析不同Gensini 分組間Cyr61、MHR、LHR水平。通過(guò)Spearman 相關(guān)分析Cyr61、MHR、LHR 水平與Gensini 評(píng)分的關(guān)系。通過(guò)繪制ROC 曲線計(jì)算AUC 及約登指數(shù)分析Cyr61、MHR、LHR 水平對(duì)冠心病的診斷價(jià)值和最佳診斷界值。以＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 冠心病組、非冠心病組臨床資料比較 兩組年齡、家族史、收縮壓、TC、血糖、血小板、BMI 比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義（＞0.05），而兩組性別、高血壓病、糖尿病、吸煙史、HDL-C、LDL-C、白細(xì)胞、MHR、LHR、Cyr61、Gensini 評(píng)分比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.05），見表1。

表1 冠心病組、非冠心病組一般資料比較

表1 冠心病組、非冠心病組一般資料比較

2.2 不同Gensini 評(píng)分組間Cyr61、MHR、LHR 水平比較 通過(guò)Mann-Whitney秩和檢驗(yàn)分析，高分組水平Cyr61、LHR、MHR 水平均高于低分組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 不同Gensini 評(píng)分組間Cyr61、MHR、LHR 水平比較

表2 不同Gensini 評(píng)分組間Cyr61、MHR、LHR 水平比較

2.3 Cyr61、MHR、LHR 水平與Gensini 評(píng)分的相關(guān)性分析 通過(guò)Spearman 相關(guān)性分析顯示，Cyr61、MHR、LHR 水平與Gensini 評(píng)分呈正相關(guān)（=0.437、0.178、0.247，＜0.05)，同時(shí)Cyr61 與MHR、LHR 也呈正相關(guān)（=0.171、0.219，＜0.05）。

2.4 冠心病的影響因素分析 以是否為冠心病為因變量，并一般臨床資料中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的因素納入自變量，構(gòu)建二元Logistic 回歸模型后得出性別、糖尿病、Cyr61 以上因素可作為冠心病發(fā)生的影響因素，見表3。

表3 冠心病的影響因素分析

2.5 Cyr61、MHR、LHR 水平對(duì)冠心病的診斷效能 通過(guò)ROC 曲線分析顯示，Cyr61 診斷冠心病ROC 曲線下面積為0.758（=0.000，95%：0.680～0.816）；MHR 診斷冠心病ROC 曲線下面積為0.737（=0.000，95%：0.657～0.816）；LHR 診斷冠心病ROC曲線下面積為0.776（=0.000，95%：0.706～0.847）；而三者聯(lián)合的曲線下面積則提高至0.840（=0.000，95%：0.780～0.901），見表4、圖1。

圖1 Cyr61、MHR、LHR 的ROC 曲線圖

表4 Cyr61、MHR、LHR 水平對(duì)冠心病的診斷效能

3 討論

動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病及動(dòng)脈狹窄閉塞的主要病理機(jī)制，內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞等多種細(xì)胞的黏附、增殖和遷移以及炎癥反應(yīng)均參與動(dòng)脈粥樣硬化的形成和發(fā)展的過(guò)程[5]，因此各種新興炎癥標(biāo)志物成為近年來(lái)的研究熱點(diǎn)。

Cyr61 又稱CCN1，是CCN 蛋白家族的主要成員[6]，是內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和心肌細(xì)胞分泌的富含半胱氨酸的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，其在心肌細(xì)胞中的表達(dá)是由一系列刺激因素介導(dǎo)的，包括生長(zhǎng)因子、血管緊張素Ⅱ、缺血和組織損傷，并且其在動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中參與了促炎作用[7-9]。心肌相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子（MRTFs）可以通過(guò)Cyr61 誘導(dǎo)激活Tβ4-MRTF 通路，導(dǎo)致血管生成和血管平滑肌細(xì)胞募集增加，并形成可以攜帶側(cè)支血流的功能性血管[10]。Zhao JF 等[11]通過(guò)以載脂蛋白E 缺陷型（apoE-/-）小鼠為體內(nèi)模型，氧化低密度脂蛋白（oxLDL）誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞泡沫細(xì)胞為體外模型，發(fā)現(xiàn)apoE-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化主動(dòng)脈中的泡沫巨噬細(xì)胞中Cyr61 高度表達(dá)，并且Cyr61 加重了高脂血癥、全身炎癥和動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展[11]；此外，Cyr61 降低了膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)能力，下調(diào)了動(dòng)脈粥樣硬化主動(dòng)脈中ATP 結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1（ABCA1）和ABCG1 的蛋白表達(dá)。在巨噬細(xì)胞中，通過(guò)oxLDL 處理可以增加Cyr61 的表達(dá)；而通過(guò)中和性抗體或小干擾RNA 抑制Cyr61 的活性可以減弱oxLDL 誘導(dǎo)的脂質(zhì)積累[7]。同時(shí)，Li W等[12]通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，下調(diào)Cyr61 水平可顯著抑制ox-LDL 誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞（VSMCs）活力和遷移，證實(shí)Cyr61 在調(diào)節(jié)膽固醇代謝和動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展中起關(guān)鍵作用。既往已有研究表明[13，14]，Cyr61可作為最終心肌梗死面積和梗死后左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）的有效預(yù)測(cè)指標(biāo)，也可以作為急性心力衰竭和冠狀動(dòng)脈性心臟病30 d 死亡率的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子。Cyr61 免疫反應(yīng)與心肌纖維的缺血形態(tài)、心肌纖維肥厚、間質(zhì)水腫和冠狀動(dòng)脈粥樣硬化顯著相關(guān)，缺血可誘導(dǎo)Cyr61 的心肌表達(dá)[15]。Deng J 等[16]研究顯示，冠心病患者Cyr61 水平高于非冠心病者，并且急性冠脈綜合征患者Cyr61 水平高于穩(wěn)定型心絞痛患者。本研究中與非冠心病組相比，冠心病組患者血清Cyr61 水平升高（＜0.05），同時(shí)通過(guò)分析其余冠狀動(dòng)脈血管病變嚴(yán)重程度也具有顯著相關(guān)性，這與既往的研究具有一致性[17]。

血常規(guī)及血脂水平作為常用的檢驗(yàn)指標(biāo)，具有獲取簡(jiǎn)便以及可重復(fù)的特點(diǎn)。HDL-C 是人體脂蛋白的基本成分，主要成分包括載脂蛋白A-Ⅰ（apoA-Ⅰ）約70%、載脂蛋白A-Ⅱ（apoA-Ⅱ）約20%，其通過(guò)抑制巨噬細(xì)胞遷移、減少低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）氧化、促進(jìn)膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)參與抗AS 的過(guò)程，并抑制血小板聚集[18]。血液成分如血小板、白細(xì)胞（包括單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞）也參與AS 及炎癥過(guò)程，單核細(xì)胞主要通過(guò)分泌不同的細(xì)胞因子與內(nèi)皮細(xì)胞和血小板相互作用，隨后啟動(dòng)炎癥和血栓形成通道參與其中。MHR、LHR 作為新出現(xiàn)的基于炎癥以及氧化應(yīng)激的指標(biāo)，均參與了AS 的發(fā)展過(guò)程，可以有效反映患者的抗炎及抗氧化的能力，成為心血管疾病新的預(yù)測(cè)及預(yù)后因子[19]。本研究中冠心病組MHR、LHR 水平均高于非冠心病組（＜0.05），提示其與冠心病相關(guān)；不同Gensini 評(píng)分間MHR、LHR 水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＜0.05）；且通過(guò)Spearman 相關(guān)性分析也得出，MHR、LHR 水平與Gensini 評(píng)分呈正相關(guān)（＜0.05），這與既往研究結(jié)果相符[19]。并且Liu HT 等[20]研究發(fā)現(xiàn)，MHR 水平與冠心病患者的長(zhǎng)期死亡率和發(fā)生MACE 事件風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)。Cetin MS 等[21]研究表明，MHR 與支架內(nèi)血栓形成相關(guān)。此外，本研究發(fā)現(xiàn)，Cyr61 水平也與MHR、LHR 水平具有相關(guān)性，也佐證了其參與了動(dòng)脈硬化的過(guò)程。通過(guò)ROC 曲線分析顯示，聯(lián)合應(yīng)用Cyr61、MHR、LHR 與單獨(dú)應(yīng)用Cyr61、MHR、LHR 相比具有更大的曲線下面積，表明其具有更好的診斷預(yù)測(cè)價(jià)值。

綜上所述，冠心病患者血清Cyr61、MHR、LHR水平均明顯升高，且三者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)冠心病的早期診斷及冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度均具有預(yù)測(cè)價(jià)值，監(jiān)測(cè)血清Cyr61、MHR、LHR 水平可成為預(yù)防冠心病的發(fā)生、臨床診斷冠心病以及預(yù)測(cè)冠狀動(dòng)脈病變程度的有效方法。