銀馬解毒顆粒 肺力咳合劑 桔貝合劑復(fù)方鮮竹瀝液鎮(zhèn)咳作用研究

黃廉展 王 真 高宏錦 陳正偉 丁選勝

咳嗽為呼吸系統(tǒng)疾病的常見(jiàn)臨床癥狀,是機(jī)體清除呼吸道分泌物和有害因子的防御性動(dòng)作,其病因復(fù)雜[1,2],多見(jiàn)于上呼吸道感染、流行性感冒等呼吸系統(tǒng)疾病。咳嗽通常分為急性咳嗽、亞急性咳嗽和慢性咳嗽,其中以慢性咳嗽最為常見(jiàn)[3,4]。然而長(zhǎng)期頻繁的咳嗽嚴(yán)重影響患者的工作和生活[5,6]。目前臨床常用的鎮(zhèn)咳藥物主要有中樞和外周性鎮(zhèn)咳藥[1,5],但這些藥物存在作用時(shí)間短、易反復(fù)和易發(fā)生神經(jīng)系統(tǒng)不良反應(yīng)的缺點(diǎn)[7]。

中醫(yī)藥對(duì)咳嗽的治療具有悠久的歷史和豐富的經(jīng)驗(yàn),中醫(yī)認(rèn)為咳嗽是肺系疾病中的一個(gè)癥狀,也是一種獨(dú)立的疾病[8]。銀馬解毒顆粒具有清熱瀉肺、止咳祛痰功效,用于咳嗽屬熱邪犯肺證,而證見(jiàn)咳嗽、咳痰等癥狀者,具有抗炎、解熱、平喘和祛痰作用[9,10],能顯著減少患者咳嗽時(shí)間,更快改善臨床癥狀[11]。銀馬解毒顆粒、肺力咳合劑、桔貝合劑和復(fù)方鮮竹瀝液功效主治相似,臨床報(bào)道表明,該4種制劑均能有效改善呼吸系統(tǒng)疾病的咳嗽癥狀[12-14]。鑒于臨床用于治療呼吸系統(tǒng)疾病引起咳嗽的中成藥品種多樣,臨床用藥如何合理選擇,仍缺乏有效可靠的證據(jù)。因此,筆者通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn),對(duì)銀馬解毒顆粒、肺力咳合劑、桔貝合劑、復(fù)方鮮竹瀝液的鎮(zhèn)咳作用進(jìn)行對(duì)比研究,以期為臨床合理用藥選擇提供基礎(chǔ)理論參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康ICR小鼠,SPF級(jí)(購(gòu)自揚(yáng)州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心),體質(zhì)量18～22 g,雌雄各半,共計(jì)210只。健康豚鼠(購(gòu)自南京市浦口區(qū)萊芙養(yǎng)殖場(chǎng)),體質(zhì)量210～260 g,雌雄各半,共計(jì)200只。

1.2 藥物與試劑銀馬解毒顆粒(揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)有限公司),肺力咳合劑(貴州健興藥業(yè)有限公司),桔貝合劑(太極集團(tuán)重慶桐君閣藥廠有限公司),復(fù)方鮮竹瀝液(江西天施康中藥股份有限公司),濃氨水(南京化學(xué)試劑有限公司),維生素C片(東北制藥集團(tuán)沈陽(yáng)第一制藥廠),枸櫞酸(南京化學(xué)試劑股份有限公司)。

1.3 試驗(yàn)儀器電子分析天平(SARTORIUS公司,型號(hào)CPA225d),純水儀(Millipore公司,型號(hào)Direct-Q5),超聲霧化器(江蘇魚(yú)躍醫(yī)療器械公司,型號(hào)402B)。

1.4 方法

1.4.1 小鼠濃氨水引咳法適應(yīng)性飼養(yǎng)后,隨機(jī)分為連續(xù)給藥3、5、7 d的3個(gè)亞組,每個(gè)亞組又根據(jù)試驗(yàn)研究分為以下7組:模型對(duì)照組(以下簡(jiǎn)稱(chēng)模型組),銀馬解毒顆粒低、中、高劑量組(以下簡(jiǎn)稱(chēng)銀馬低、中、高劑量組),肺力咳合劑組(以下簡(jiǎn)稱(chēng)肺力咳組),桔貝合劑組(以下簡(jiǎn)稱(chēng)桔貝組),復(fù)方鮮竹瀝液組(以下簡(jiǎn)稱(chēng)鮮竹瀝液組),共計(jì)21組,每組10只,雌雄各半。

各組小鼠按0.15 ml/10 g體質(zhì)量灌胃給藥。各亞組小鼠于末次給藥后1 h進(jìn)行氨水引咳試驗(yàn),用500 ml燒杯配以注入1 ml濃氨水的棉球(放入EP管中),觀察自放入始小鼠的咳嗽潛伏期(自放入起至開(kāi)始出現(xiàn)咳嗽的時(shí)間)和3 min內(nèi)咳嗽次數(shù)(腹肌收縮或縮胸,張大嘴為1次,有咳聲)。每組試驗(yàn)結(jié)束后更換氨水以免因濃度而產(chǎn)生誤差[15]。

1.4.2 豚鼠枸櫞酸引咳法適應(yīng)性飼養(yǎng)后,進(jìn)行豚鼠預(yù)篩選,用超聲霧化器將17.5%的枸櫞酸溶液以最大流速向密封容器(容積4000 ml)噴霧15 s,到容器內(nèi)全部充滿(mǎn)白霧,將豚鼠放入其中接受?chē)婌F30 s,噴霧終止,記錄自豚鼠接受?chē)婌F起5 min內(nèi)豚鼠咳嗽次數(shù)(豚鼠張開(kāi)嘴并聽(tīng)到響亮咳聲為1次咳嗽),低于10次者棄除。

取留用的豚鼠,根據(jù)給藥時(shí)間及咳嗽次數(shù)隨機(jī)分為連續(xù)給藥3、5、7 d的3個(gè)亞組,每個(gè)亞組的具體分組同“1.4.1小鼠濃氨水引咳法”,共計(jì)21組,每組8只,雌雄各半。銀馬各組按0.5 ml/100 g體質(zhì)量經(jīng)口給藥。各亞組動(dòng)物于末次給藥后1 h讓豚鼠接受枸櫞酸溶液噴霧刺激,方法同篩選試驗(yàn),觀察豚鼠咳嗽潛伏期(自豚鼠接受?chē)婌F始至開(kāi)始出現(xiàn)咳嗽的時(shí)間)和5 min內(nèi)咳嗽次數(shù)[16]。

1.4.3 劑量設(shè)置銀馬低、中、高劑量分別為臨床成人日等效劑量(ED)的0.5、1、2倍,且肺力咳組、桔貝組、鮮竹瀝液組均采用ED,根據(jù)《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》[17]中劑量換算原則換算,各試驗(yàn)對(duì)應(yīng)給藥組劑量見(jiàn)表1。

表1 實(shí)驗(yàn)給藥組劑量設(shè)置表

2 結(jié)果

2.1 各藥物對(duì)濃氨水引咳小鼠的鎮(zhèn)咳作用對(duì)于咳嗽次數(shù)的影響,與模型組相比,給藥3、5、7 d后,各給藥組均能顯著減少濃氨水致咳小鼠的咳嗽次數(shù)(P<0.001)。與銀馬低劑量組相比,給藥3、5、7 d后,銀馬中、高劑量組均能減少小鼠的咳嗽次數(shù)(P<0.01,P<0.05);與銀馬中劑量組相比,除鮮竹瀝液組在給藥7 d時(shí)小鼠咳嗽次數(shù)差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),肺力咳組和桔貝組在給藥3、5、7 d小鼠咳嗽次數(shù)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)圖1A。

注:與模型對(duì)照組相比,***P<0.001、**P<0.01;與銀馬低劑量組相比,##P<0.01、#P<0.05;與銀馬中劑量組相比,△△P<0.01、△P<0.05。

對(duì)于引起咳嗽潛伏期的影響,銀馬各劑量組和肺力咳組在給藥3、5、7 d均能顯著延長(zhǎng)小鼠咳嗽潛伏期(P<0.001),桔貝組在給藥5 d開(kāi)始顯著延長(zhǎng)小鼠咳嗽潛伏期(P<0.01),鮮竹瀝液組在給藥7 d顯著延長(zhǎng)小鼠咳嗽潛伏期(P<0.001)。與銀馬中劑量組相比,鮮竹瀝液組在給藥3、5、7 d時(shí)小鼠咳嗽潛伏期差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01,P<0.05),桔貝組在給藥3、7 d時(shí)小鼠咳嗽潛伏期差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01,P<0.05),肺力咳組小鼠咳嗽潛伏期差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)圖1B。

2.2 各藥物對(duì)枸櫞酸引咳豚鼠的鎮(zhèn)咳作用對(duì)于咳嗽次數(shù)的影響,與模型組相比,給藥3、5、7 d后,除銀馬低劑量組從給藥7 d顯著減少咳嗽次數(shù)(P<0.001),銀馬中、高劑量組、肺力咳組、桔貝組和鮮竹瀝液組豚鼠咳嗽次數(shù)均減少(P<0.001,P<0.01,P<0.05)。見(jiàn)圖2A。

注:與模型組對(duì)照相比,***P<0.001、**P<0.01、*P<0.05;與銀馬低劑量組相比,###P<0.001、##P<0.01;與銀馬中劑量組相比,△P<0.05。

對(duì)于引起咳嗽潛伏期的影響,與模型組相比,各藥物在給藥3、5、7 d后均能延長(zhǎng)枸櫞酸致豚鼠咳嗽的潛伏期(P<0.001,P<0.01,P<0.05);與銀馬低劑量組相比,銀馬中劑量組在給藥3 d時(shí)顯著延長(zhǎng)豚鼠咳嗽潛伏期(P<0.001),銀馬高劑量組在給藥3、5 d時(shí)顯著延長(zhǎng)豚鼠咳嗽潛伏期(P<0.001,P<0.01)。與銀馬中劑量組相比,鮮竹瀝液組在給藥3 d時(shí)豚鼠咳嗽潛伏期差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)圖2B。

3 討論

與臨床常用鎮(zhèn)咳西藥相比,中藥復(fù)方具有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),其通常由多味中藥經(jīng)過(guò)配伍而成,具有辨證論治、標(biāo)本兼治和多成分、多靶點(diǎn)作用的特點(diǎn)。中醫(yī)認(rèn)為“咳嗽”屬肺系疾病,是由稟賦異常、環(huán)境刺激、鼻咽喉等因素共同作用所致的一類(lèi)疾病[8]。針對(duì)咳嗽“內(nèi)外和邪,互為因果”的病因,諸藥合和,辨證施治,達(dá)到止咳、祛痰的功效[8]。

銀馬解毒顆粒、肺力咳合劑、桔貝合劑和復(fù)方鮮竹瀝液均用于臨床呼吸系統(tǒng)疾病的治療,上述4種中成藥組方中的多味中藥具有清熱解毒、止咳化痰平喘之作用[10,11]。課題組的前期研究結(jié)果亦表明,該4種中成藥均具有解熱、祛痰和平喘的作用,但不同藥物間的鎮(zhèn)咳作用存在差別與否尚無(wú)研究報(bào)道。因此,筆者主要采用經(jīng)典的引咳模型對(duì)該4種制劑的鎮(zhèn)咳藥效進(jìn)行對(duì)比研究。結(jié)果顯示,銀馬各劑量組均能有效減少濃氨水引咳小鼠的咳嗽次數(shù)和顯著延長(zhǎng)咳嗽潛伏期,且能顯著減少枸櫞酸引咳豚鼠的咳嗽次數(shù)和顯著延長(zhǎng)咳嗽潛伏期。此外,筆者發(fā)現(xiàn)隨著銀馬解毒顆粒給藥劑量的增加,模型動(dòng)物咳嗽潛伏期均逐漸延長(zhǎng)、咳嗽次數(shù)均逐漸減少,提示銀馬解毒顆粒對(duì)這兩種引咳模型均具有顯著抑制作用,且呈一定的量效和時(shí)效關(guān)系。肺力咳合劑、桔貝合劑和復(fù)方鮮竹瀝液均對(duì)濃氨水引咳和枸櫞酸引咳動(dòng)物具有抑制作用,且呈時(shí)效關(guān)系。進(jìn)一步分析各藥物對(duì)咳嗽次數(shù)和咳嗽潛伏期的影響發(fā)現(xiàn),與銀馬臨床等效劑量相比,鮮竹瀝液組小鼠咳嗽次數(shù)及咳嗽潛伏期及對(duì)豚鼠枸櫞酸咳嗽潛伏期作用也均存在差異;桔貝組小鼠咳嗽潛伏期存在差異,提示各藥物對(duì)咳嗽次數(shù)改善及咳嗽潛伏期的延長(zhǎng)具有不同的作用特點(diǎn)。銀馬解毒顆粒、肺力咳合劑均能同時(shí)有效減少咳嗽次數(shù)和延續(xù)咳嗽潛伏期,桔貝合劑和復(fù)方鮮竹瀝液則主要改善咳嗽次數(shù),對(duì)咳嗽潛伏期的延長(zhǎng)稍遜于銀馬解毒顆粒和肺力咳合劑,其作用特點(diǎn)的不同,可能與其制劑組成有關(guān)。

進(jìn)一步對(duì)藥物組成進(jìn)行分析,銀馬解毒顆粒由清熱藥山銀花、清熱解毒藥馬齒莧、利水滲濕藥車(chē)前草、瀉下藥大黃和補(bǔ)虛藥甘草組成,具有解熱、抗炎、祛痰、平喘的作用[10,11,18],能有效緩解患者的咳嗽、發(fā)熱及祛痰的癥狀[11]。方中的馬齒莧[19]、車(chē)前草[20]和甘草[21]均具有鎮(zhèn)咳祛痰作用,諸藥配伍,增強(qiáng)其止咳祛痰之效果。肺力咳合劑由清熱藥黃芩、清化熱痰藥前胡、止咳平喘藥百部、祛風(fēng)除濕的梧桐根、清熱解毒藥白花蛇舌草及紅花龍膽、清熱藥紅管藥組成,方中除梧桐根外其余中藥均具有止咳功效,現(xiàn)代藥理研究表明其具有止咳、祛痰、平喘和抗炎作用[22,23]。桔貝合劑由清化熱痰藥桔梗、清化熱痰藥浙貝母、止咳平喘藥苦杏仁、補(bǔ)陰藥麥冬、清熱藥黃芩、止咳平喘藥枇杷葉、補(bǔ)虛藥甘草組成,具有潤(rùn)肺止咳功效,能有效改善患兒的咳嗽癥狀和縮短哮喘患者的咳嗽、喘息癥狀[13]。復(fù)方鮮竹瀝液由清化熱痰的鮮竹瀝、清熱藥魚(yú)腥草、溫化寒痰藥生半夏、發(fā)散風(fēng)寒藥生姜、止咳平喘藥枇杷葉、清化熱痰藥桔梗和發(fā)散風(fēng)熱藥薄荷素油組成,具有清熱化痰、止咳、祛痰作用[24],臨床上能有效減少患者的咳嗽次數(shù)[25]。此外,筆者也對(duì)4種中成藥組方的中藥藥性進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)銀馬解毒顆粒除甘草性平,其他四味中藥均為寒性藥物;肺力咳合劑和桔貝合劑以寒性藥物為主;復(fù)方鮮竹瀝液則以溫寒藥為主。由此可見(jiàn),該4種中成藥雖功效主治相似,但其處方組成及其藥性、藥味存在不同,這也可能是其鎮(zhèn)咳藥效作用發(fā)揮不同的主要原因。因此,臨床上可根據(jù)患者的病情及治療目的選擇合適的藥物進(jìn)行治療。但本研究仍存在不足之處,如未對(duì)4種中成藥制劑鎮(zhèn)咳作用特點(diǎn)差異的可能原因及其潛在的作用機(jī)制進(jìn)行研究,仍需進(jìn)一步研究揭示。