術中冰凍切片技術診斷甲狀腺乳頭狀癌的價值

楊曉波，李俊，張愛兵

高郵市人民醫院病理科，江蘇揚州 225600

目前由于國內居民生活、工作壓力的增加，甲狀腺癌發生率不斷上升。甲狀腺癌為常見頭頸惡性腫瘤，主要表現為頸部腫塊、結節，多數無痛，隨著病情進展，可造成局部占位，將明顯影響患者吞咽功能[1-2]。甲狀腺乳頭狀癌發病率高，在甲狀腺癌中占比超過70%，各個年齡階段均可發生，且普遍分化較好，在甲狀腺組織中可局限數年，通過早期診斷與治療，能有效提高患者生存率[3-4]。既往對甲狀腺乳頭狀癌多采用石蠟切片病理檢查，準確性高，但操作過程復雜且用時很長，術中難以準確判定切除狀態，部分患者甚至需要二次手術[5]。術中冰凍切片病理檢查近年來在臨床中已經有了較多應用，操作快速、診斷準確，能夠為手術方案的制訂提供可靠依據，可指導精準治療工作的開展[6-7]。本研究選取高郵市人民醫院2021 年6 月—2023 年5月收治的疑似甲狀腺乳頭狀癌患者57 例為研究對象，就常規石蠟切片與術中冰凍切片技術的應用進行對比，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院收治的疑似甲狀腺乳頭狀癌患者57例為研究對象，其中男22 例，女35 例；年齡32～69歲，平均（46.23±8.35）歲；病灶直徑0.4～1.3 cm，平均（0.57±0.14）cm。本研究已獲得本院醫學倫理委員會批準。

1.2 納入與排除標準

納入標準：①高頻超聲檢查提示疑似甲狀腺乳頭狀癌；②予手術切除治療；③臨床資料完整；④知情同意。排除標準：①預測生存時間＜3 個月者；②凝血功能障礙者；③合并嚴重代謝疾病者；④妊娠或哺乳期者；⑤依從性極差者。

1.3 方法

石蠟切片檢查前，先常規完善實驗室檢查、頸部超聲檢查等，明確病灶形態、大小、輪廓等，手術切開，觸摸甲狀腺質地、均勻度。而后順著相應方向平行切開，對組織的切面加以觀察，而后將組織切片使用10%中性福爾馬林固定，乙醇梯度脫水，而后再加入二甲苯透明劑，在標本組織變透明后，浸蠟并包埋，以切片機對石蠟包埋組織進行切片，厚度4～5 μm 即可。再以二甲苯脫蠟，再使用梯度酒精沖洗，并予蘇木精-伊紅染色，再使用顯微鏡加以觀察。

術中冰凍病理切片檢查時，患者體位取仰臥位，頸過伸，充分暴露頸部，在肉眼可見、最為疑似惡性病變的組織位置采集1～4 塊，如果存在鈣化需要優先開展取材。使用冰凍切片機切片，切片時溫度控制在-22～-20℃，厚度4～5 μm；并做兩個平行對照切片。對切片使用95%的甲醇進行固定，1 min后可予蘇木精染色3～5 min 進行分化，在堿水中返藍20 s，而后使用伊紅再次染色10～20 s，脫水透明，再使用三目生物顯微鏡進行觀察。

所有切片均由兩名高年資醫師處理與閱片，做出診斷。如仍診斷困難，需第3 名高年資醫師主持討論，以給出最終診斷。

1.4 觀察指標

分析術中冰凍切片診斷結果。以常規石蠟切片診斷結果為金標準，評估術中冰凍切片診斷準確率、靈敏度、特異度，并分析術中冰凍切片與金標準的一致性。甲狀腺乳頭狀癌為陽性，其余為陰性。準確率=（真陽性例數+真陰性例數）/總例數×100%，靈敏度=真陽性例數/（真陽性例數+假陰性例數）×100%，特異度=真陰性例數/（真陰性例數+假陽性例數）×100%。

1.5 統計方法

采用SPSS 21.0 統計學軟件處理數據，計數資料以例數（n）和率（%）表示，給予χ2檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

57 例受試者經常規石蠟切片檢查證實陽性45例，陰性12 例。以常規石蠟切片為金標準，術中冰凍切片檢查準確率96.49%（55/57）、靈敏度95.56%（43/45）、特異度100.00%（12/12），與金標準一致性較好（Kappa=0.90）。見表1。

表1 術中冰凍切片與常規石蠟切片診斷結果（n）

3 討論

甲狀腺癌為臨床常見頭頸部惡性腫瘤，其中乳頭狀癌則為占比最高的病理類型，對患者健康有嚴重威脅，故需要早期明確診斷，積極治療[8-9]。石蠟切片病理檢查是診斷甲狀腺乳頭狀癌的金標準，通過取樣、固定、脫水、透明、包埋等步驟進行處理，能夠清晰觀察細胞結構，準確率高，但操作步驟較為繁瑣，診斷時間較長，診斷結果只能在術后得出，無法在術中提供參考信息[10-11]。術中冰凍切片近年來在臨床中也有了較多應用，能夠在術中迅速完成病灶組織的取材，并進行冰凍活檢，能夠為手術方案的制訂提供依據，也有助于明確術中切除的范圍，可實現精準手術的目標[12-13]。該技術在-20℃的低溫下進行切片，通過快速冷卻，病理組織有較好的硬度、柔韌性，操作簡單方便，在0.5 h 內即可獲得診斷結果。但該技術準確率會受到設備、操作者以及取材方式等的影響，對此在該方式檢查后，術后也有必要再次開展石蠟切片檢查[14-15]。此外，為保障冰凍切片技術應用價值，也有必要熟悉冰凍切片的特有形態，①乳頭狀結構是本病的重要特征，乳頭復雜且存在多級分支，細胞排列不規則、重疊、擁擠[16-17]。②細胞核可出現增大，核排列擁擠，且輪廓不規則，可見核構、毛玻璃樣等。③部分也可出現砂礫樣鈣化。

在診斷結果上，本次以常規石蠟切片為金標準，術中冰凍切片檢查準確率96.49%、靈敏度95.56%、特異度100.00%，與金標準一致性較好（Kappa=0.90），提示術中冰凍病理切片檢查診斷準確率高。張宏巖[18]研究中，術中冰凍切片病理檢查準確率96.67%、誤診率1.11%、漏診率2.22%，可見該方案診斷價值高，也可佐證本研究結論。

綜上所述，對甲狀腺乳頭狀癌采用術中冰凍病理切片檢查診斷效率高，且診斷準確性與石蠟切片相當。為進一步發揮出該技術的價值，相關人員應當規范操作，并熟悉掌握冰凍切片鏡下特征，以提高診斷準確率。