胸水細胞蠟塊結合免疫組織化學染色技術診斷肺癌的臨床意義

張玉春，戴陸春

睢寧縣人民醫院呼吸與危重醫學科，江蘇睢寧 221200

肺癌在多年來一直作為高發惡性腫瘤存在，且 病死率較高。雖然在臨床醫療技術不斷進步下，對于肺癌可行手術、放化療等手段治療，但依然無法確保絕大多數患者獲益[1]。尤其肺癌早期不具有特異性表現，難以引起患者關注，多數患者在體檢時被發現，或出現癥狀后檢查發現進入晚期[2]。但對于手術治療而言，早期確診時手術預后良好，若為晚期則可失去手術時機[3]。因此，對于肺癌的早期診斷長久以來較為受到關注，包括早期篩查的影像學檢測技術、免疫組化染色技術、胸水檢測等[4]。影像學技術可輔助進行腫瘤早期篩查，但因部分腫瘤所處部位難以檢出，容易出現漏診情況，且難以進行腫瘤類型鑒別。而免疫組化染色技術近年來在肺癌診斷中呈現出一定優勢[5]。本研究選取2021年5 月—2023 年3 月睢寧縣人民醫院收治的疑似肺癌患者67 例為研究對象進行回顧性分析，分析胸水細胞蠟塊結合免疫組織化學染色技術診斷肺癌價值。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院收治的疑似肺癌患者67 例為研究對象。其中男35 例，女32 例；年齡56～79 歲，平均（66.52±5.38）歲。

1.2 納入與排除標準

納入標準：均疑似肺癌，行病理檢查。排除標準：①肺癌未合并胸水；②臨床資料不完整；③中途退出研究。

1.3 方法

免疫組化檢查：采集患者胸水100 mL 放到保存液內，混勻，取50 mL 離心處理5 min，去上清液，加5 mL 細胞固定液，混勻后離心5 min，去上清液，加1 mL 緩沖液，混勻。取800 μg 于沉降倉靜置20 min，去沉降液，加1 mL 沖洗液反復沖洗2 次。取其中1 mL 緩沖液2 次，以蘇木素染液1 mL染色，靜置90 s，倒掉，后以1 mL 沖洗液與1 mL 緩沖液沖洗2 次，以伊紅染液1 mL 染色10 s，沖洗2 次，取出玻片，以無水乙醇2 min，二甲苯2 min 后封片。

胸水細胞蠟塊檢查：薄層液基細胞學沉降制片后，將其他胸水加保存液，于4℃環境下靜置，觀察細胞充分沉淀后去上清液，離心5 min。取沉淀加5 mL 福爾馬林溶液震蕩，離心5 min，取沉淀，加10 mL 的95%乙醇脫水，離心5 min，放到取材盒內，脫水3 h 常規包埋，切片。以MaxVision 二步法對細胞蠟塊免疫組化染色。蠟塊切片厚度3 μm，二甲苯脫蠟，梯度乙醇至水，高壓修復，3% H2O2室溫環境靜置10 min。一抗37℃環境下孵育1 h，二抗37℃環境15 min，以DAB 顯色。

1.4 觀察指標

以病理檢查結果為金標準，比較不同檢查方法的診斷結果精準度。陽性預測值=真陽性例數/（真陽性例數+假陽性例數）×100%。陰性預測值=真陰性例數/（真陰性例數+假陰性例數）×100%。準確性=（真陽性例數+真陰性例數）/總例數×100%；特異度=真陰性例數/（真陰性例數+假陽性例數）×100%；靈敏度=真陽性例數/（真陽性例數+假陰性例數）。

1.5 統計方法

采用SPSS 21.0 統計學軟件分析數據，計數資料用例數（n）和率（%）表示，行χ2檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同方法診斷效能分析

67 例患者中經病理檢查確診肺癌47 例、良性病變20 例，細胞蠟塊結合免疫組織化學染色檢查靈敏度、特異度、準確性、陽性預測值、陰性預測值均高于液基細胞學檢測結果，見表1、表2。

表1 不同方法檢測結果比較(n)

表2 不同檢測方法診斷效能分析（%）

2.2 不同方法診斷符合率對比

以病理檢查為金標準，細胞蠟塊結合免疫組織化學染色檢查對于腺癌診斷符合率100.00%，高于液基細胞學檢測的78.95%，差異有統計學意義（P＜0.05），見表3。

表3 不同方法診斷符合率對比[n(%)]

3 討論

肺癌既是發生在肺臟的惡性腫瘤，其發生與進展與多因素相關。如長期吸煙可增加肺癌風險，作為常見誘發因素。疾病還具有一定遺傳性特征，家族內成員患有肺癌，則其他人員發生風險較高[6]。近年來環境污染問題在肺癌患病率增長方面也起到一定作用，如吸入過度煙塵、工業廢氣、化學物質等，可引起肺部病變，進而發展為肺癌[7]。對于肺癌目前以手術治療為主，同時可配合放化療等治療手段。患病早期行手術治療，在術后配合化療，多數患者預后良好，但晚期患者可能失去手術時機，或預后不佳[8]。

肺癌作為全球范圍內患病率屈居高位的惡性腫瘤，其臨床診治備受關注。鑒于早期治療與預后之間的密切關聯，肺癌早期診斷尤為關鍵[9]。以胸腔積液檢測為例，腫瘤細胞學檢測可用于肺癌診斷[10]。其具體檢測方法應用中，常規細胞學涂片操作簡單，便于開展及推廣，但容易受到人為因素干擾，且可能出現細胞重疊與結構不清晰等情況影響診斷準確性[11]。后期在相關檢測技術與設備不斷進步下，胸水細胞蠟塊與免疫組化染色技術等得以應用其中。經本次調查發現，液基細胞學診斷靈敏度、特異度、均低于細胞蠟塊結合免疫組織化學染檢測結果。細胞蠟塊與免疫組化染色技術結合應用可凸顯協同優勢，強化診斷準確性，為臨床進行腫瘤來源評估與組織分型等提供指導[12]。若為晚期肺癌患者，胸腔積液作為具有代表性癥狀。以傳統細胞學檢測僅可輔助評估惡性腫瘤，難以識別原發病灶[13]。而細胞蠟塊組織切片可反復與連續操作，無細胞丟失情況，對于極少數惡性細胞識別率也較高，有利于對漏診與誤診的防控[14]。臨床實踐中，若有腫塊表面壞死現象，通過氣管鏡下難以識別腫塊，采集活檢標本難度較高，且無法進行病理組織分型，不利于后期診斷[15]。將其與免疫組化染色技術進行聯合應用則有助于解決此種缺陷，進一步提升肺癌鑒別診斷可靠性。本研究中，以病理檢查為金標準，細胞蠟塊結合免疫組織化學染色檢查對于腺癌診斷符合率100.00%，高于液基細胞學檢測的78.95%（P＜0.05）。張連美等[16]研究結果顯示，細胞蠟塊結合免疫組化染色技術對腺癌診斷符合率為96.00%，較液基細胞學檢測的78.00%更高（P＜0.05），與本文研究結果具有一致性。提示此種檢查方法能夠為肺癌類型鑒別提供可靠依據。兩種檢測技術的聯合應用能夠進行細胞組織分型，為疾病類型鑒別提供參考[17]。其中細胞塊便于保存，能夠連續切片，后續免疫組化染色操作便捷度較高，且免疫細胞化學染色背景清晰，著色均勻，陽性定位精準，相應資料可長時間保存，在此種情況下細胞學也可存在組織病理學特征。若有必要還能夠直接開展基因檢測[18]。在臨床檢查時，為確保其診斷價值，常規要求離心處理轉速不超過2 500 r/min。另外，離心管應采用漏斗狀，若為含血標本，首要工作為去除紅細胞，避免其形成檢測結果干擾。

綜上所述，肺癌診斷中，以胸水細胞蠟塊結合免疫組化染色技術應用價值較高，除進行肺癌檢出之外，還可進行腫瘤類型鑒別。