曲古抑菌素A 對沙棘扦插苗響應干旱和復水及相關基因表達的影響

李佳益，魏繼華，宋婭婷，陳 寧，張國昀，羅紅梅，劉湘杰，何彩云＊

(1. 國家林業和草原局林木培育重點實驗室，中國林業科學研究院林業研究所，北京 100091；2. 中國林業科學研究院沙漠林業實驗中心，內蒙古 磴口 015200)

沙棘(Hippophae rhamnoidesL.)是中國重要的荒山荒坡造林、治理水土流失、改善生態環境的先鋒樹種[1]，但干旱環境仍然限制著沙棘的生長和功能的發揮。葉片作為植株光合和蒸騰作用的重要器官，其表型變化是干旱脅迫下最為直觀的重要特征。表觀遺傳修飾通過改變染色質狀態和招募各種轉錄調節因子來控制基因的表達，從而影響植物對干旱脅迫等環境的響應[2]。組蛋白修飾包括組蛋白核心蛋白H2A、H2B、H3 和H4 的N 末端特定氨基酸殘基的甲基化、乙酰化、磷酸化和泛素化等[3]。組蛋白乙酰化參與染色質解縮和基因激活從而影響基因轉錄[4]，作為一個動態可逆過程，組蛋白乙酰化和去乙酰化分別由組蛋白乙酰轉移酶(HATs)和組蛋白脫乙酰酶(HDACs)催化。而HDACs 已被證明在高粱(Sorghum bicolorL.)[5]、棉 花 (Gossypium hirsutumL.)[6]、 擬 南 芥(Arabidopsis thalianaL.)[7]和大豆(Glycine maxL.)[8]等植物中參與逆境響應和生物脅迫防御。有研究發現番茄(Solanum lycopersicum)組蛋白脫乙酰酶基因SlHDA3參與了番茄對干旱脅迫的響應，干旱脅迫和脫落酸處理顯著誘導了SlHDA3的表達，沉默SlHDA3后植株對干旱脅迫的耐受性降低，干旱脅迫下脫落酸(ABA)、葉綠素、丙二醛(MDA)和脯氨酸(Pro)含量增加[9]。

曲古抑菌素A(trichostatin A, TSA) 是一種強效可逆的組蛋白去乙酰化酶抑制劑，可通過抑制HDAC 而影響基因的表達[10]。研究發現TSA 可以在干旱脅迫條件下顯著上調花生(Arachis hypogaeaL.)AhDREB1基因的表達，從而提高抗旱性[11]。在花生中組蛋白去乙酰化酶基因AhHDA1可以通過與其啟動子結合來抑制AhGLK1的表達，TSA 處理后AhGLK1的表達增加，H3 乙酰化減少，證實AhGLK1受組蛋白去乙酰化修飾的調節[12]。在低溫脅迫下，TSA 處理強烈抑制了ZmDREB1和ZmCOR413等玉米(Zea maysLinn.Sp.)冷響應基因的表達[13]。另外，TSA 還可以提高植物的抗寒性，并影響At1g55960、At3g50970和At5g57560等擬南芥冷誘導基因的表達[14]。

前期研究共篩選到沙棘ABF2、NAC2、C4H2、CHS4、HDA6和HDA19等干旱脅迫響應核心基因[15]，揭示了以 ABA 依賴信號途徑為主的信號傳遞途徑和以類黃酮途徑為主的氧自由基清除途徑的耐旱分子機制[16]，然而在外施TSA 處理沙棘扦插苗響應干旱時，組蛋白去乙酰化酶基因表達水平的變化以及抗旱相關的ABA 和類黃酮合成相關基因表達的影響不清楚。本研究探討TSA 預處理后沙棘葉片對干旱脅迫響應的表型和生理變化以及組蛋白乙酰化相關基因表達水平的變化，將為后續深入研究沙棘抗旱基因調控機制奠定基礎。

1 材料和方法

1.1 植物材料與培養

本試驗使用的材料采自中國林業科學研究院沙漠林業實驗中心，將引進蒙古大果沙棘‘向陽’(H.rhamnoidesL. subsp.mongolica, ‘Xiangyang’,XY) 2 年生扦插苗種植于中國林業科學研究院科研溫室大棚，生長條件為自然光照，晝/夜溫度為20～30 ℃/10～15 ℃，相對濕度在60%～70%，正常生長2 個月。在試驗前一周將苗木移至恒溫培養箱中，設定條件為：溫度為（25 ± 1） ℃，光照度為（4 500 ± 500）LX，光照時間12 h，濕度70% ±10%，使扦插苗穩定適應環境。

1.2 材料處理

1.2.1 TSA + PEG 復合處理 選取健康、生長均一的沙棘扦插苗帶根部取出, 用1/2 Hoagland 營養液洗凈土壤，洗凈后的沙棘苗放在營養液中緩苗一周，之后在1 μmol·L-1TSA（TSA, Solarbio）溶液中浸泡12 h，取部分葉片材料保存(單獨TSA 處理，T0)，剩余沙棘苗浸泡于20%聚乙二醇(PEG6000, Solarbio)溶液中模擬土壤干旱脅迫,分別在PEG 處理12 h 和48 h 后取葉片材料保存（TSA + PEG 復合處理，T12 和T48），剩余植株取出后再分別浸泡于1/2 Hoagland 營養液正常培養3 d 取葉片保存(復合處理后復水3 d 處理，T12-3 和T48-3)。以1/2 Hoagland 營養液正常培養植株為對照(CK)。每個分組處理均設置3 次生物學重復。

1.2.2 PEG 模擬干旱處理 將沙棘扦插苗帶根取出洗凈后在1/2 Hoagland 營養液中浸泡12 h, 再轉移至20% PEG 6 000 溶液中, 分別在PEG 處理12 h 和48 h 后取葉片材料保存（干旱脅迫處理，Y12 和Y48），剩余植株取出后再分別浸泡于1/2 Hoagland 營養液正常培養3 d 取葉片保存(干旱脅迫后復水3 d 處理，Y12-3 和Y48-3)。以1/2 Hoagland營養液處理為對照(CK)。每個分組處理均設置3 次生物學重復。

1.3 沙棘扦插苗干旱相關生理指標的測定

在每個干旱處理節點分別選取長勢一致的幼苗10 株，蒸餾水洗凈濾紙吸干后用分析天平稱量扦插苗鮮質量(TB)。在每個處理節點分別選取長勢一致的幼苗 3 株，用 LI-6 400 便攜式光合儀(LICOR，美國)分別測定對照組與試驗處理組沙棘幼苗葉片的凈光合速率(Pn，μmol·m-2·s-1)、蒸騰速率(Tr，mmol·m-2s-1)和氣孔導度(Cond，mol·m-2·s-1)。測定條件：紅藍固定光源，固定光強為1 000 μmol·m-2·s-1，溫度 28 ℃，相對濕度為70%，二氧化碳濃度為溫室中大氣濃度。同時，使用Yaxin-1161G 葉綠素熒光儀分別測量各處理幼苗葉片的PSⅡ最大光化學效率或原初光能轉換效率Fv/Fm值和PSⅡ有效光化學量子產量[Y(Ⅱ)]值，使用SPAD502 葉綠素含量測定儀測定葉片葉綠素相對含量(SPAD)。另外，使用脯氨酸(Pro)含量檢測試劑盒(Solarbio)測定葉片游離脯氨酸含量，使用丙二醛(MDA)含量檢測試劑盒(Solarbio)測定葉片丙二醛含量，使用植物脫落酸(ABA)酶聯免疫分析試劑盒(Jingmeibio) 測定葉片ABA 含量，使用植物類黃酮含量檢測試劑盒(Solarbio)測定葉片類黃酮含量。每個分組處理均設置3 次生物學重復。

1.4 實時熒光定量PCR(qRT-PCR) 檢測基因表達量

使用RNAprep Pure 多糖多酚植物總RNA 提取試劑盒提取沙棘幼苗葉片RNA。使用PrimeScript RT 試劑盒與gDNA Eraser 試劑盒進行反轉錄。選擇干旱脅迫過程中對以脫落酸依賴信號途徑為主的信號傳遞途徑有影響的ABA 合成關鍵基因ABF2和NAC2，對以類黃酮途徑為主的氧自由基清除途徑有影響的類黃酮合成關鍵基因C4H2和CHS4，以及組蛋白去乙酰化酶基因HrHDA6和HrHDA19-1，利用Primer 5.0 軟件設計引物（表1）。使用StepOnePlus RT-PCR 儀器進行實時熒光定量PCR 反應。以18SrRNA 基因為內參，擴增程序為95 ℃預變性30 s；95 ℃變性5 s, 60 ℃退火延伸34 s, 共40 個循環。基因表達量使用2-△△CT方法進行分析[17]。

表1 沙棘內參基因和目的基因引物Table 1 Primers for reference genes and target genes in sea buckthorn

1.5 數據處理

使用IBM SPSS Statistics 24 統計軟件中的單因素ANOVA 分析方法，計算qRT-PCR 數據獲得P值，P＜0.05 表示差異具有顯著性。使用Excel軟件作圖。

2 結果與分析

2.1 TSA 對干旱脅迫下沙棘扦插苗生長及表型的影響

圖1 顯示，與對照（CK）相比，單獨干旱處理12 h 后的沙棘植株葉片有下垂和萎蔫現象（Y12），在復水3 d 后部分葉片恢復舒展（Y12-3），而干旱處理48 h 后的沙棘植株葉片明顯變黃且發生嚴重下垂和萎蔫現象（Y48），在復水3 d 后仍無法恢復正常生長，后續發生葉片脫落（Y48-3）；同時，經TSA 預處理12 h 再干旱處理后的沙棘植株的葉片下垂和萎蔫程度明顯低于單獨干旱處理的植株。與對照相比，干旱12 h 后的植株鮮質量顯著下調19.4%，經TSA 預處理后的干旱12 h 植株質量顯著下調9.4%；干旱48 h 后的植株質量顯著下調38.6%，經TSA 預處理后的干旱48 h 植株質量顯著下調21.3%（圖2）。

圖1 TSA 預處理和干旱脅迫下沙棘扦插苗葉片表面形態特征Fig. 1 Leaf surface morphological characteristics of sea buckthorn cuttings under TSA pretreatment and drought stress

圖2 TSA 預處理對沙棘在干旱處理下生物量的影響Fig. 2 Effect of TSA pretreatment on biomass of sea buckthorn under drought stress

2.2 TSA 對干旱脅迫下沙棘扦插苗 干旱相關生理指標的影響

2.2.1 光合生理指標 干旱脅迫會影響沙棘光合生理特性、葉綠素熒光參數和葉綠素相對含量。在TSA 預處理后的干旱處理過程中，凈光合速率(Pn)隨著干旱時間的增加而降低，干旱12 h 后復水3 d，光合速率恢復明顯，但干旱48 h 后復水3 d時光合速率無明顯變化（圖3-A）。干旱顯著影響沙棘的蒸騰速率(Tr)，在干旱12 h 后蒸騰速率顯著下調83.0%，氣孔導度(Cond)顯著下調95.4%，干旱48 h 后蒸騰速率顯著下調98.7%，氣孔導度顯著下調99.0%，而在TSA 預處理后干旱12 h時，蒸騰速率和氣孔導度比干旱處理時顯著提高（P＜0.05），且復水后蒸騰速率和氣孔導度部分恢復顯著（圖3-B, C）。

圖3 TSA 預處理對沙棘干旱處理下和復水條件下葉片光合生理指標的變化Fig. 3 Effects of TSA on Photosynthetic physiological indexes of sea buckthorn under drought and rehydration

葉片葉綠素光系統II（PSII）接受光量子的最大能力Fm與Fo的差值為光合作用的最大能力Fv，Fv/Fm是PSII的最大量子效率，Y(II)為實際光化學量子產量，二者可以作為葉綠素熒光參數衡量葉片光系統活性受損程度[18]。在干旱程度逐漸加深的過程中，Fv/Fm逐漸顯著降低（圖3-D）。在干旱12 h 后Y(II) 顯著下調22.0%，48 h 后顯著下調52.8%，而在TSA 預處理后，Y(II)比干旱處理12 h 時顯著提高46.2%，比僅干旱處理48 h 時顯著提高62.8%，且復水后部分恢復顯著（圖3-E）。在干旱12 h 后SPAD 值顯著下調12.3%，48 h 后顯著下調29.6%，而在TSA 預處理后，SPAD 值比僅干旱處理12 h 時顯著提高6.0%，比僅干旱處理48 h 時顯著提高11.0%（圖3-F）。

2.2.2 抗旱生理指標 沙棘受到干旱脅迫時體內脯氨酸含量明顯升高，從而提高沙棘的滲透調節能力。與對照組相比，隨著干旱時間的延長，脯氨酸含量明顯增加，在干旱48 h 時的提高幅度高于干旱12 h（P＜0.05）。在用TSA 預處理后再次干旱同樣時間，發現脯氨酸含量顯著提高了0.57 倍和0.34 倍，復水后含量明顯下降（圖4-A）。丙二醛（MDA）隨沙棘干旱強度的增加而升高，加速膜脂的過氧化程度。丙二醛含量在干旱12 h 后顯著上調8.06 倍，在干旱48 h 后顯著上調12.35倍，在復水過程中逐漸下調。而經過TSA 預處理后，丙二醛含量在干旱12 h 時無顯著變化，但在干旱48 h 后顯著下調（圖4-B）。干旱處理和TSA 處理會影響沙棘葉片脫落酸和黃酮類化合物含量。未使用TSA 預處理的干旱12 h 條件下，相對于對照組脫落酸含量顯著上調，類黃酮含量顯著下調, 復水3 d 后脫落酸含量顯著下調，類黃酮含量顯著上調。干旱48 h 后相對于對照組脫落酸含量顯著上調，類黃酮含量顯著下調，復水3 d 后脫落酸含量無顯著變化，類黃酮含量顯著上調（P＜0.05）。TSA 預處理后的干旱12 h，脫落酸含量相對于對照組顯著上調，與僅干旱處理12 h 相比增長幅度減少，類黃酮含量相對于對照組顯著下調54.4%，與僅干旱處理12 h 相比下調幅度減少。復水3 d 后脫落酸含量顯著下調，類黃酮含量顯著上調。TSA 預處理后的干旱48 h，脫落酸含量相對于對照組顯著上調，與僅干旱處理48 h 相比增長幅度減少；類黃酮含量相對于對照組顯著下調，與僅干旱處理48 h 相比下調幅度減少。復水3 d 后脫落酸和類黃酮含量均無顯著變化（圖4-C, D）。

圖4 TSA 對沙棘在干旱處理下和復水條件下葉片抗旱生理指標的變化Fig. 4 Effect of TSA on the physiological indexes of sea buckthorn leaf drought resistance under drought treatment and rehydration

2.3 TSA 對干旱脅迫過程中沙棘幼苗組蛋白去乙酰化酶基因和相關抗旱基因表達的影響

2.3.1 組蛋白去乙酰化酶基因 組蛋白去乙酰化酶基因HrHDA6和HrHDA19會影響組蛋白乙酰化程度，從而調控組蛋白乙酰化對抗旱的作用。在未經TSA 預處理的干旱條件下，干旱12 h 使HrHDA6基因表達量增加3.32 倍，HrHDA19-1基因表達量顯著增加5.50 倍。干旱48 h 使HrHDA6基因表達量顯著增加6.82 倍，HrHDA19-1基因表達量顯著增加12.69 倍。在TSA 預處理后的干旱條件下，干旱12 h 使HrHDA6基因表達量顯著增加0.48 倍，HrHDA19-1基因表達量顯著增加1.28倍。干旱48 h 使HrHDA6基因表達量顯著增加2.25 倍，HrHDA19-1基因表達量顯著增加2.84 倍（P＜0.05）。兩個基因表達量總體趨勢均為干旱處理時最高，TSA 預處理后的干旱處理處理次之，對照組最低，且隨著干旱時間延長，基因表達量均升高，復水后基因表達量顯著降低。在TSA 預處理后干旱時間延長，基因表達量均顯著升高，干旱12 h 后復水基因表達量無顯著變化，干旱48 h 后復水基因表達量顯著降低（圖5）。表明沙棘干旱葉片受到TSA 影響從而促進了組蛋白去乙酰化酶相關基因的表達。

圖5 TSA 預處理對沙棘在干旱處理和復水條件下葉片組蛋白去乙酰化酶基因表達的影響Fig. 5 Effect of TSA on histone deacetylase gene expression of sea buckthorn under drought and rehydration

2.3.2 脫落酸和類黃酮合成相關基因 通過前期研究分析發現，沙棘NAC等基因的表達變化會顯著影響ABA 合成途徑，進而影響下游ABF等基因的表達。在未經TSA 預處理時，干旱12 h 后NAC2基因表達量顯著提高1.65 倍，ABF1基因表達量顯著提高7.09 倍。干旱48 h 后NAC2基因表達量顯著提高5.41 倍，ABF1基因表達量顯著提高12.57 倍。在TSA 預處理后的干旱條件下，干旱12 h 后NAC2基因表達量輕微上調，ABF1基因表達量顯著提高4.83 倍，干旱48 h 后NAC2基因表達量顯著提高2.86 倍，ABF1基因表達量顯著提高8.45 倍（P＜0.05）。各個基因表達量總體趨勢均為干旱處理時最高，TSA 預處理后的干旱處理次之，對照組最低。無論是否經過TSA 預處理，隨著干旱時間延長，NAC2基因表達量增加幅度均增大，ABF1基因表達量增加幅度均減小，復水后兩個基因表達量均顯著降低（圖6-A, B）；肉桂酸4-羥化酶（C4H）和查爾酮合酶（CHS）等基因的表達變化會影響總黃酮合成途徑。未經TSA 預處理時，干旱12 h 和干旱48 h 時C4H2和CHS4基因表達量均下調，且在干旱48 h 時下調更大。經過TSA 預處理后干旱使C4H2和CHS4基因表達量下調趨勢明顯減緩（P＜0.05）。各個基因表達量總體趨勢均為對照組最高，TSA 預處理后的干旱時期次之，干旱時期最低。且無論是否經過TSA 預處理，隨著干旱時間延長，C4H2和CHS4基因表達量均降低，復水后基因表達量均升高（圖6-C, D）。表明沙棘葉片組蛋白乙酰化水平上調促進了類黃酮合成相關基因表達，抑制脫落酸合成相關基因的表達。

圖6 TSA 對沙棘在干旱處理和復水條件下葉片脫落酸合成和運輸相關基因(A, B)和類黃酮合成相關基因(C, D)表達的影響Fig. 6 Effects of TSA on the expression of genes related to abscisic acid synthesis(A, B) and transport and flavonoid synthesis(C, D) of sea buckthorn under drought and rehydration

3 討論

植株處于失水環境會導致其生長緩慢甚至停止生長，莖端和葉片發生下垂及萎蔫現象，影響植物的光合作用、呼吸作用、離子和營養物質的轉運以及植物生長調節劑的活性[19]，植物抗旱性在表型形態、生理生化和基因表達上與滲透調節和減輕干旱損害的相關指標有關，在氣孔運動、光合作用、細胞滲透調節和抗氧化劑等方面會產生明顯的表征[20]。沙棘在干旱脅迫下為了提高水分保持能力、減少蒸騰作用和改善光合作用，葉片發生皺縮減少水分蒸騰，植株含水率降低，在干旱程度較低時復水可部分恢復至對照水平，在干旱程度過大時復水無法恢復至對照水平，說明干旱持續時長越長，植株表型受到的損傷越大，越不易恢復生長，而經過TSA 預處理的植株在面對同等干旱脅迫時表現出更強的耐旱性。在干旱脅迫處理后，凈光合速率、蒸騰速率、氣孔導度、Fv/Fm、Y(II)和SPAD值均下調，在經過TSA 預處理后下調程度明顯減小，說明TSA 在一定程度上緩解了干旱脅迫導致沙棘PSII的損傷，光合作用速率呈恢復趨勢。

植物可通過誘導細胞內的信號級聯反應，進而開啟或關閉基因表達，從而合成能夠對抗壓力的所需蛋白質，并合成脯氨酸、丙二醛、脫落酸和類黃酮等物質，以維持細胞內外平衡和保護細胞的結構完整性[21]。植物為了維持細胞的內外膨壓，會增加胞內滲透調節分子和細胞防御酶活力，從而有效的清除由于干旱環境導致的有害物質的產生[22]。在干旱脅迫下，沙棘葉片脯氨酸含量明顯升高，從而提高滲透保護能力。有研究發現使用25 mg·L-1脯氨酸處理后可以促進干旱脅迫下白榆扦插苗的生長[23]。大豆幼苗在干旱脅迫下擁有著顯著變化的脯氨酸含量，干旱脅迫下植株脯氨酸含量是正常澆水植株的5.29 倍，而復水后，脯氨酸含量下降到干旱脅迫植株的1/3 以下[24]，這與沙棘經歷干旱和復水階段后的脯氨酸水平結果類似。MDA 含量在干旱脅迫后顯著上調8.06～12.35 倍，在復水過程中逐漸下調，表明干旱脅迫導致沙棘MDA 含量增加，加劇沙棘葉片膜脂過氧化程度，膜選擇透性降低，膜完整程度降低，損傷程度呈逐漸增大趨勢，這一結果與中國沙棘[25]和小麥(Triticum aestivumL.)[26]相同。

研究發現，大麥(Hordeum vulgareL.)干旱脅迫下 4 種組蛋白乙酰轉移酶 (OsHAC703、OsHAG703、OsHAF701和OsHAM701)的表達顯著增加[27]，而HDA9通過改變擬南芥中逆境響應基因的組蛋白乙酰化水平，從而調節植物對鹽和干旱脅迫的敏感性[28]，說明干旱脅迫能使組蛋白去乙酰化酶表達升高，而TSA 能夠抑制沙棘的組蛋白去乙酰化酶，在干旱脅迫下，TSA 處理顯著降低HrHDA6和HrHDA19-1基因的相對表達量，使沙棘在干旱過程中的組蛋白去乙酰化酶水平降低，進而增強沙棘的抗旱性。

脫落酸等內源植物激素在植株遭受不良環境脅迫時會產生信號響應，從而協調植株能夠在干旱脅迫中維持自身生長需要[29-31]，脫落酸水平與氣孔關閉密切相關[32]，植物可以通過關閉葉片上的部分氣孔使體內水分的流失程度降低，干旱脅迫下葉片中ABA 含量調控氣孔運動，提高ABA 水平可激活生理反應和信號轉導，從而調節植物對脫水的反應和水分利用優化[33]。組蛋白乙酰化已被報道在ABA 介導的使植物適應干旱的基因調控中起關鍵作用[34]。在本研究中發現，未經TSA 預處理時，隨著干旱程度的加深，ABA 合成相關基因NAC2和ABF1表達量逐漸上升，而在TSA 預處理后，基因表達量升高趨勢減緩，在TSA 的作用下脫落酸含量比干旱處理時期增加幅度減少，說明TSA處理加快沙棘葉片氣孔關閉, 使其在干旱脅迫下減緩失水的程度, 以緩解干旱造成的影響，保持體內的充足水分。研究發現干旱脅迫下油茶(Camellia oleiferaAbel.)通過增加葉片ABA 含量以關閉氣孔來減少水分蒸騰，調節自身生長發育和緩解干旱影響[35]，ABA 反應元件結合蛋白ABP9提高了干旱條件下的光合作用能力[36]。有研究者以大豆幼苗為試驗材料，探究干旱脅迫對大豆幼苗生化指標的影響，發現幼苗在經歷長期干旱脅迫后，水分虧缺和復水條件下大豆葉片組織內源ABA 水平發生了顯著變化，ABA 含量在第一次干旱脅迫時呈上升趨勢，在接下來的干旱脅迫中逐漸下降，復水處理后，植株內源ABA 水平降低，與對照植株相似[37]。

而類黃酮可以減少干旱脅迫下氧自由基積累對植物造成的損害[38]，TSA 預處理后的干旱條件下類黃酮含量相對于僅干旱處理時下調幅度減少，類黃酮合成相關基因C4H2和CHS4的表達量有所升高，說明TSA 有效緩解了干旱環境，從而促使氧自由基積累減少，類黃酮合成減少。有研究表明，干旱響應基因SsMYB113通過參與黃酮類化合物和ABA 的生物合成，從而增強木荷(Schima superbaGardn. et Champ.)抗旱性[39]。但青錢柳(Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinsk.)在受到不同程度水分脅迫時，黃酮類化合物合成相關的大部分基因會隨水分脅迫程度加重而下降[40]，這與本研究中干旱48 h后復水3 天時類黃酮含量無顯著變化結果相同，說明沙棘等植物在長時間干旱脅迫下會使黃酮類化合物合成受阻，無法充分去除干旱造成的氧自由基，從而維持自身生命活動穩定。在課題組前期研究中也發現，干旱脅迫下H3K9 乙酰化修飾對6 個脫落酸合成和信號通路相關基因進行正調控，對17 個類黃酮類生物合成相關基因進行負調控，TSA 處理后，干旱脅迫下脫落酸和類黃酮含量及其相關基因表達的變化均有所減緩。

4 結論

本課題研究了TSA 對干旱條件下沙棘葉片形態、光合指標、脯氨酸、丙二醛等生理特性和組蛋白去乙酰化酶、脫落酸和類黃酮合成相關基因表達的影響，發現TSA 預處理的沙棘在光合生理特性和葉綠素相關指標上的體現的耐旱性更強，TSA 通過調節組蛋白去乙酰化酶基因，改變組蛋白乙酰化修飾狀態，作用于類黃酮和ABA 合成相關基因，從而參與沙棘扦插苗葉片對干旱脅迫和復水過程的響應調節，最終增強沙棘的抗旱性。