固相萃取-氣相色譜/質譜聯用法檢測茶葉中15種農藥殘留

李 琳，馬淑青，代飛飛，聶丹丹

（濰坊市疾病預防控制中心，山東濰坊 261061）

山東省作為江北茶區之一，所產日照綠茶、嶗山綠茶、莒南茶、沂蒙綠茶等受到廣大消費者的歡迎。近年來，由于茶葉飲用安全問題，其多類農藥殘留的分析檢測成為行業關注的焦點[1-2]。考慮到茶葉基質復雜，建立了固相萃取[3]-氣相色譜/質譜聯用法[4-5]（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC/MS）測定茶葉中15種農藥殘留的分析方法。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

15種農藥標準品（100 μg·mL-1），均購自農業農村部環境保護科研監測所；乙腈、丙酮、正己烷和二氯甲烷，美國Fisher；氯化鈉（優級純）、無水硫酸鎂（分析純），國藥集團；Cleanert PC/NH2-SPE固相萃取柱（500 mg/500 mg/6 mL），美國Agela。

1.2 儀器與設備

手動固相萃取儀（北京萊伯泰科）；ISQ單四極桿GC/MS聯用儀（美國賽默飛）；N-EVAP氮吹儀（美國Organomation）；渦旋振蕩器（德國Heidolph）；LYNX400高速落地離心機（美國賽默飛）；ARA520電子天平（奧豪斯）。

1.3 標準儲備溶液與標準溶液配制

將置于室溫平衡后的15種農殘標準溶液全部移入50 mL容量瓶中，用正己烷溶液（色譜級）少量多次清洗各標準溶液小瓶合并洗液至容量瓶中，定容至50 mL，配制成濃度為2.0 μg·mL-1的混合標準儲備液。再將標準儲備液稀釋成濃度為0.2 μg·mL-1、0.4 μg·mL-1、0.6 μg·mL-1、0.8 μg·mL-1和1.0 μg·mL-1的標準系列溶液。

1.4 實驗條件

1.4.1 色譜條件

色譜柱：TG-5MS（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；載氣：高純He；柱流量：1.0 mL·min-1；進樣口溫度：280 ℃；采用不分流進樣，進樣量：1 μL；程序升溫：40 ℃保持1 min，之后以30 ℃·min-1升溫至130 ℃，再以5 ℃·min-1升溫至250 ℃，最后以10 ℃·min-1升溫至300 ℃并保持5 min；接口溫度：280 ℃。

1.4.2 質譜條件

轟擊電子能量：70 eV；全掃描范圍：40～550 amu；采用全掃描模式和選擇離子監測模式采集信號；電離源溫度：230 ℃。

1.5 樣品提取與凈化

準確稱取1.0 g均勻粉碎的茶葉樣品于50 mL離心管中，加水10 mL渦旋混勻并浸泡30 min，再加入10 mL乙腈和1 g氯化鈉，渦旋振蕩0.5 min，待液液分層后加入4 g無水硫酸鈉，迅速旋上瓶蓋，振蕩渦旋1 min，10000 r·min-1離心5 min，取5.0 mL上清液于45 ℃水浴中氮吹至近干，10 mL丙酮分3次加入，提取液采用二氯甲烷（1∶1）洗脫樣品，洗脫液經過PC/NH2-SPE固相萃取柱凈化提取，收集于KD濃縮瓶中，氮吹至0.5 mL，待GC/MS分析測定。

2 結果與分析

2.1 色譜條件的優化

根據“相似相容”原理，選擇適合各待測組分化學性質的TG-5MS色譜柱分離15種農藥殘留；40 ℃保持1 min，以30 ℃·min-1升溫至130 ℃，以5 ℃·min-1升溫至250 ℃，再以10 ℃·min-1升溫至300 ℃保持5 min；進樣方式選擇不分流進樣。通過全掃描方式確定每種待測目標物的保留時間和定性定量離子，見表1。總離子流圖（見圖1）顯示，在TG-5MS色譜柱中15種農藥殘留能有效分離。

圖1 15種農藥的總離子流圖（TIC圖）

表1 15種農藥的保留時間和特征定性定量離子

2.2 方法的線性范圍、標準曲線和檢出限

混合農藥殘留標準系列配制5個濃度，濃度在0.2～1.0 μg·mL-1，以濃度為橫坐標、以峰面積為縱坐標繪制標準曲線并進行線性回歸分析。15種農藥標準溶液的回歸方程、相關系數、檢出限見表2。

表2 15種農藥標準溶液的回歸方程、相關系數、回收率、精密度

2.3 方法的精密度與回收率

準確稱取1.0 g空白茶葉樣品6份，分別加入0.8 μg·mL-1的混合標準溶液，混勻后靜置1 h，按上述1.5試驗步驟提取凈化后上機測定，分別計算其加標回收率與相對標準偏差（Relative Standard Deviation，RSD），結果見表2。結果表明，方法的平均加標回收率為85.3%～92.8%，各待測組分相對標準偏差（n=6）為3.8%～8.6%，符合農藥殘留分析的要求。

2.4 樣品測定

用本文建立的方法對80份茶葉進行檢測，檢出農藥殘留46份，檢出率57.5%；超標樣品5份，超標率6.25%。

3 結論

本文建立了同時測定茶葉中15種常見農藥殘留的固相萃取-氣相色譜/質譜聯用分析方法，方法回收效果好，操作簡便快速，準確度與精密度均較高，適用于茶葉中多種農藥殘留的測定。