吡侖帕奈治療兒童難治性癲癇的效果及機制

趙 妍,李夢珂,凌 云,郭俊范,白雪蕾

1.南陽南石醫院神經內科,南陽 473031;2.南陽市第一人民醫院肝膽外科,南陽 473000

癲癇是臨床常見的反復突發性大腦神經元異常同步放電慢性疾病,同時伴有短暫大腦功能障礙[1]。對于難治性癲癇患兒來說,癲癇反復發作可導致其正常生長和行為出現障礙[2]。吡侖帕奈可選擇性抑制α-氨基-3-羥基-5-甲基-4-異喃噁唑丙酸(α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole propionic acid,AMPA)受體,從而抑制神經元的過度興奮[3-4]。本研究應用吡侖帕奈治療兒童難治性癲癇,并通過與卡馬西平對比,闡述其應用價值。

1 一般資料

選取收治的84例難治性癲癇患兒,隨機分為觀察組與對照組,每組42例。觀察組:男28例,女14例;年齡為5～12歲,平均(8.16±1.29) 歲;病程為6個月～5年,平均(2.56±0.68) 年;癲癇分類:全面發作2例,部分發作2例,復雜部分發作15例,未能明確分類12例,癲癇綜合征11例。對照組:男27例,女15例;年齡為5～12歲,平均(8.30±1.18) 歲;病程為6個月～6年,平均(2.64±0.59) 年;癲癇分類:全面發作2例,部分發作1例,復雜部分發作17例,未能明確分類11例,癲癇綜合征11例。2組一般資料比較,差異無統計學意義(P>0.05)。

納入標準:①符合國際抗癲癇聯盟制定的癲癇診斷標準[5];②符合難治性癲癇診斷,正規使用2種及以上藥物,有效治療期內合理用藥不能終止發作,或臨床證實為難治性癲癇;③年齡為4～12歲;④影像學檢查顱內未出現結構性病變;⑤患兒家屬知情同意。

排除標準:①合并顱內占位性病變、腦外傷等其他類型的腦部疾病;②合并心、肝、腎等其他嚴重器質和功能性疾病;③合并內分泌、血液、免疫疾病;④有神經系統退行性疾病史;⑤合并焦慮、抑郁癥等;⑥合并嚴重感染性疾病;⑦合并惡性腫瘤。

本研究經醫院倫理委員會審核并批準通過。

2 方法

2.1 治療方法

對照組口服卡馬西平片(規格為0.2 g·片-1,北京諾華制藥有限公司),起始給藥劑量為10～20 mg·kg-1·d-1,每周在原始劑量的基礎上增加5～10 mg·kg-1·d-1,直至增加至20～30 mg·kg-1·d-1,加量期為3～7周。治療6個月。

觀察組口服吡侖帕奈[規格為4 mg·片-1,Eisai Co.,Ltd.(Kawashima Factory)],起始給藥劑量為1～2 mg,每日1次,每隔14 d增加劑量1～2 mg,單日劑量維持在2～8 mg,根據治療情況調整劑量。治療6個月。

2.2 觀察指標

2.2.1療效評估 于治療后6個月評估臨床療效。評價標準[6]:癥狀完全緩解、腦電圖檢測結果顯示正常、觀察期內沒有發作為控制;癥狀基本緩解、腦電圖檢測結果基本正常、發作頻率減少幅度在70%～99%為顯效;癥狀改善明顯、腦電圖檢測結果改善、發作頻率減少幅度在30%～70%為有效;癥狀和腦電圖無明顯改善、發作頻率減少幅度<30%為無效。有效率=[(控制例數+顯效例數+有效例數)/總例數]×100%。

2.2.2腦電圖 治療前及治療6個月后用腦電波測量儀(德國SIGMA公司,NEUROWERK EEG)檢測腦電背景活動,評估α、θ、δ波活動情況和棘波數量。

2.2.3認知功能 于治療前及治療6個月后,用中國修訂版韋氏兒童智力量表(Wechsler intelligence scale for children revised in China,WISC-RC)[7]評估患兒的認知功能。WISC-RC包括言語及操作分量表,將結果輸入測試系統,計算言語智商(verbal inte-lligence quotient,VIQ)、操作智商(performatnce intelligence quotient,PIQ)、全量表智商(full scale intelligence quotient,FIQ),得分越高表示認知功能越好。

2.2.4外周血指標 于治療前及治療6個月后取患者空腹肘靜脈血5 mL,抗凝,其中3 mL以4 000 r·min-1離心10 min,用酶聯免疫吸附試驗檢測神經元特異性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、層黏連蛋白(laminin,LN)和神經肽Y(neuropeptide Y,NPY)的水平,試劑盒購自北京易科攀搏生物科技有限公司。另外2 mL分離單個核細胞,用Trizol法提取總RNA,逆轉錄合成cDNA,用RT-PCR法擴增MRP1 mRNA和MRP2 mRNA目標片段。反應體系(20 μL):RNA模板6 μL,2×RNA Reaction Buffer Mix 10 μL,1 mg·mL-1BSA 2 μL,RNA Prime Script RT Enzyme Mix 2 μL。反應條件:94 ℃ 3 min,94 ℃ 30 s,54 ℃ 30 s,73 ℃ 28 s,35個循環后,73 ℃ 10 min,以β-action作為內參,用2-ΔΔct法計算MRP1 mRNA和MRP2 mRNA的相對表達水平,引物由南京擎科生物科技有限公司合成。

2.2.5不良反應 比較2組患兒治療期間不良反應的發生情況。

2.3 統計學方法

3 結果

3.1 臨床療效的比較

觀察組的臨床治療有效率為71.43%,高于對照組(50.00%)(P<0.05)。結果見表1。

表1 2組臨床治療有效率的比較 (n=42)

3.2 腦電圖活動情況的比較

治療前,2組腦電圖活動情況比較,差異無統計學意義(P>0.05)。治療后,2組α波、θ波和δ波活動率比較,差異無統計學意義(P>0.05);2組每分鐘棘波數量較治療前減少,且觀察組少于對照組(P<0.05)。結果見表2。

表2 2組腦電圖活動情況的比較 (n=42)

3.3 WISC-CR的比較

治療前,2組WISC-CR比較,差異無統計學意義(P>0.05)。治療后,2組FIQ、PIQ及VIQ維度評分較治療前均升高,且觀察組高于對照組(P<0.05)。結果見表3。

表3 2組WISC-CR的比較

3.4 外周血多藥耐藥相關蛋白表達水平的比較

治療前,2組外周血多藥耐藥相關蛋白MRP1 mRNA、MRP2 mRNA的表達水平比較,差異無統計學意義(P>0.05)。治療后,觀察組外周血MRP1 mRNA、MRP2 mRNA的表達水平較治療前降低,且低于對照組(P<0.05)。結果見表4。

表4 外周血多藥耐藥相關蛋白表達水平的比較

3.5 外周血NSE、LN和NPY水平的比較

治療前,2組外周血NSE、LN和NPY的水平比較,差異無統計學意義(P>0.05)。治療后,2組外周血NSE、LN和NPY的水平均較治療前降低,且觀察組低于對照組(P<0.05)。結果見表5。

表5 2組外周血NSE、LN和NPY水平的比較

3.6 不良反應發生情況的比較

2組不良反應發生率比較,差異無統計學意義(P>0.05)。結果見表6。

表6 2組不良反應發生情況的比較 (n=42)

4 討論

難治性癲癇指經單一或聯合使用抗癲癇藥,且達最大耐受劑量適當療程治療后,癲癇發作仍然控制不了。難治性癲癇的治療難度大,會使患兒出現認知障礙以及心理與社會功能變化,影響患兒的生活質量[8]。

目前,臨床上常用丙戊酸鈉、卡馬西平和苯妥英鈉等藥物治療兒童難治性癲癇,其主要作用為抗驚厥[9]。AMPA的過表達與癲癇發生和發展的關系密切,吡侖帕奈能抑制由AMPA誘導的Ca2+釋放,降低谷氨酸活性,從而降低神經元的興奮性,控制癲癇的發作[10]。研究表明,在抗癲癇治療中,吡侖帕奈是一種安全、有效的藥物[11]。

研究表明,吡侖帕奈的治療有效率、治療后無癲癇發作比例分別為17.3%～67.9%、4.8%～17.7%[12]。本研究中42例患兒用吡侖帕奈治療的有效率為71.43%,無癲癇發作比例為16.67%,與上述研究結果接近,吡侖帕奈的效果優于卡馬西平。腦電圖在癲癇的診斷及預后評估中具有重要作用,抗癲癇藥物的使用會影響腦電波,改變腦電背景[13]。本研究中,難治性癲癇患兒均以α波活動為主,且治療后與治療前比較,2組腦電背景的差異均無統計學意義,表明吡侖帕奈和卡馬西平對腦電背景的影響均較小,但與對照組比較,觀察組治療后每分鐘棘波數量減少,表明吡侖帕奈對癇樣放電的抑制作用優于卡馬西平。相關研究表明,癲癇患者發生認知功能損傷的比例為30%～40%,對患者的生活質量造成影響[14]。難治性癲癇患兒發生認知功能障礙可能與癇樣放電、神經元損傷、細胞因子異常表達、睡眠障礙和神經遞質異常有關[15]。本研究中觀察組治療后WISC-CR高于對照組,表明吡侖帕奈治療有利于難治性癲癇患兒認知功能的恢復。

MRP1、MRP2均是腦內藥物轉運體,可將包括抗癲癇藥物在內的藥物泵出細胞外,使得藥物在細胞中的濃度降低,從而形成耐藥[16]。本研究中,觀察組治療后外周血中MRP1、MRP2的表達水平較治療前降低,且低于對照組,表明吡侖帕奈可抑制患兒MRP1、MRP2的表達,從而提高藥物的效果。NSE特異性存在于神經元細胞中,經糖酵解轉化為神經元活動所需的能量,癲癇發作損傷神經組織,促進神經元NSE的合成與釋放,外周血NSE水平在一定程度上反映癲癇患者神經損傷情況。NPY在神經系統中廣泛分布,具有神經遞質、神經調質相應功能,癲癇發作初期,由NPY介導的神經保護機制被激活,降低癲癇發作頻率。LN是細胞外基質的主要成分之一,參與中樞神經系統發育、軸突生長等過程[17-19]。本研究中,觀察組治療后血清NSE、LN和NPY水平低于對照組,表明吡侖帕奈可抑制NSE、NPY和LN的異常表達以修復受損的神經元,抑制異常放電,促進患兒神經功能恢復,提高療效[20]。本研究中,2組不良反應發生率比較差異無統計學意義,患者常見不良反應包括頭暈、頭痛、嗜睡等,這些不良反應多為輕度,持續的時間也較短。

綜上所述,吡侖帕奈治療兒童難治性癲癇有利于抑制患兒癇樣放電,減輕認知功能損傷,抑制多藥耐藥相關蛋白MRP1、MRP2的表達,降低血清NSE、LN和NPY的水平,修復受損的神經元。