NLR、LDH、CEA、NSE及CYFRA21-1單獨及聯(lián)合檢測對非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后的預(yù)測價值*

趙麗楠,王昆侖,魏明喬,盧倩楠,李樹敏**

(1.赤峰學(xué)院附屬醫(yī)院 檢驗科,內(nèi)蒙 赤峰 024000; 赤峰學(xué)院附屬醫(yī)院 消化科,內(nèi)蒙 赤峰 024000)

肺癌是全球范圍內(nèi)較為常見的癌癥之一,其中非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)占肺癌的80%～85%,多數(shù)患者就診時已處于晚期,5年生存率較低[1-2]。有研究表明,中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)是全身性炎癥反應(yīng)的潛在生物標(biāo)志物,參與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展,且與多種腫瘤的臨床結(jié)局緊密相關(guān);乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase,LDH)能夠反映惡性腫瘤缺氧及代謝狀態(tài),在多種惡性腫瘤中表達(dá)升高,與多種惡性腫瘤的發(fā)生、進(jìn)展和預(yù)后密切相關(guān)[3]。近年來,肺癌相關(guān)腫瘤標(biāo)志物癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)及細(xì)胞角蛋白片段19(cytokeratin 19-fragments,CYFRA21-1)已被廣泛應(yīng)用于肺癌臨床輔助診斷和療效監(jiān)測中[4-5],但關(guān)于NLR、LDH聯(lián)合預(yù)測NSCLC根治性放化療預(yù)后效能的報道較少,本研究選取行根治性放化療治療的進(jìn)展期NSCLC患者作為研究對象,根據(jù)患者3年生存預(yù)后分為生存組和死亡組,采用單因素及多因素logistic回歸分析評價影響NSCLC根治性放化療預(yù)后的相關(guān)因素,同時探究NLR、LDH、CEA、NSE及CYFRA21-1聯(lián)合檢測對NSCLC根治性放化療預(yù)后的預(yù)測價值,現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2017年4月—2019年4月行根治性放化療的進(jìn)展期NSCLC患者125例。納入標(biāo)準(zhǔn):滿足NSCLC診斷標(biāo)準(zhǔn)[6],初次確診,病情處于進(jìn)展期;根據(jù)國際肺癌研究協(xié)會第八版腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(tumor node metastasis,TNM)分期標(biāo)準(zhǔn)判定為Ⅲ～Ⅳ期[7],患者治療方案選擇根治性放化療,美國東部腫瘤協(xié)作組(eastern cooperative oncology group,ECOG)評分0～2分;有記錄完整的臨床病歷資料。排除重要臟器功能損害、其他器官惡性腫瘤患者,急性缺血性腦卒中、糖尿病腎病,免疫系統(tǒng)、血液系統(tǒng)疾病患者,急或慢性感染、炎癥性疾病及相關(guān)用藥患者,非腫瘤原因死亡或失訪患者。

1.2 研究方法

1.2.1臨床信息采集 采集患者入院確診時基本臨床信息,包括年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)(body mass index,BMI)、是否吸煙或嗜酒、ECOG評分、腫瘤類型、腫瘤直徑、分化程度、TNM分期、是否接受靶向治療等資料。

1.2.2NLR、LDH和腫瘤標(biāo)志物檢測 于入院次日早晨,采集患者空腹外周靜脈血5 mL,室溫靜置0.5 h,3 000 r/min離心15 min,上層血清分離后于-20 ℃環(huán)境下保存?zhèn)錅y。使用全自動五分類血細(xì)胞分析儀(深圳邁瑞公司,BC-5500型)及配套試劑檢測中性粒細(xì)胞計數(shù)和淋巴細(xì)胞計數(shù),計算NLR;使用全自動生化分析儀(日本Olympus公司,AU2700型),酶測速率法(試劑盒由北京普朗新技術(shù)有限公司提供)檢測LDH;使用全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(美國雅培公司,Architect i2000型),采用電化學(xué)發(fā)光分析法(試劑盒由四川邁克生物科技股份有限公司提供)檢測CEA、NSE及CYFRA21-1水平。

1.2.3治療方案 患者均接受根治性放化療:(1)放療方案,選擇調(diào)強(qiáng)適型放療技術(shù),根治性放療劑量維持60～70 Gy、2 Gy/次,若患者治療期間出現(xiàn)不耐受或并發(fā)癥,及時實施針對性處理;(2)化療方案,培美曲塞(廣州白云山明興制藥有限公司,國藥準(zhǔn)字H20110059,500 mg/m2)+順鉑(山東鳳凰制藥股份有限公司,國藥準(zhǔn)字H20056422,75 mg/m2)或長春瑞濱(長春遠(yuǎn)大國奧制藥有限公司,國藥準(zhǔn)字H20041927,5 mg/m2)+順鉑(75 mg/m2)化療。

1.2.4隨訪與分組 患者出院后1個月開始展開隨訪,以電話訪談、門診復(fù)診等形式隨訪3年,隨訪率達(dá)100%,以隨訪期間患者死亡或至隨訪結(jié)束為隨訪終點,末次隨訪截止時間為2022年4月,中位隨訪時間為18(1～36)個月。根據(jù)患者3年生存預(yù)后分為生存組44例、死亡組81例。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 NSCLC根治性放化療預(yù)后的單因素分析

結(jié)果顯示,2組患者年齡、性別、BMI、吸煙、嗜酒、ECOG評分、腫瘤類型、腫瘤直徑、分化程度(中分化)比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);生存組的分化程度為高分化、靶向治療占比高于死亡組(P<0.05),TNM分期為Ⅳ期占比低于死亡組(P<0.05),NLR、LDH、CEA、NSE及CYFRA21-1低于死亡組(P<0.05)。見表1。

表1 NSCLC根治性放化療預(yù)后的單因素分析

2.2 NSCLC根治性放化療預(yù)后的多因素logistic回歸分析

將分化程度、TNM分期、靶向治療和外周血NLR、LDH、CEA、NSE、CYFRA21-1納入多因素logistic回歸模型予量化賦值,結(jié)果顯示TNM分期和NLR、LDH、CEA、NSE、CYFRA21-1是NSCLC根治性放化療預(yù)后的獨立危險因素(P<0.05),分化程度、靶向治療是NSCLC根治性放化療預(yù)后的獨立保護(hù)因素(P<0.05)。見表2和表3。

表2 NSCLC根治性放化療預(yù)后危險因素賦值

表3 NSCLC根治性放化療預(yù)后的多因素logistic回歸分析

2.3 外周血NLR、LDH、CEA、NSE、CYFRA21-1單獨及聯(lián)合預(yù)測NSCLC根治性放化療預(yù)后的效能

結(jié)果顯示,外周血NLR、LDH、CEA、NSE、CYFRA21-1對NSCLC根治性放化療預(yù)后均有一定預(yù)測效能,AUC分別為0.780、0.886、0.863、0.766、0.779;五項指標(biāo)聯(lián)合預(yù)測NSCLC根治性放化療預(yù)后的AUC為0.946。見表4和圖1。

圖1 外周血NLR、LDH、CEA、NSE、CYFRA21-1單獨及聯(lián)合預(yù)測NSCLC根治性放化療預(yù)后的ROC曲線

表4 NLR、LDH、CEA、NSE、CYFRA21-1單獨及聯(lián)合預(yù)測NSCLC根治性放化療預(yù)后的效能分析

3 討論

肺癌已成為全世界惡性腫瘤死亡的主要原因,其中NSCLC占多數(shù),雖然近年來多學(xué)科綜合治療模式在NSCLC治療中發(fā)揮著重要作用,但其總體預(yù)后仍較差,早期尋找可靠的NSCLC預(yù)后評估指標(biāo)尤為必要。盡管目前臨床已證實NLR、LDH、CEA、NSE、CYFRA21-1可能參與了肺癌進(jìn)展過程[8-9],但關(guān)于上述指標(biāo)聯(lián)合預(yù)測NSCLC根治性放化療預(yù)后的效能未見相關(guān)臨床報道,而本文創(chuàng)新之處在于繪制NLR、LDH、CEA、NSE、CYFRA21-1聯(lián)合預(yù)測NSCLC根治性放化療預(yù)后的ROC曲線,為NSCLC預(yù)后判斷提供更多依據(jù)。

NLR是中性粒細(xì)胞激活程度的可靠反映指標(biāo),通常在炎癥反應(yīng)激活或炎癥細(xì)胞浸潤情況下腫瘤細(xì)胞增殖活性可顯著升高,促使癌細(xì)胞復(fù)發(fā)風(fēng)險增加;而NLR過度升高可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞生物學(xué)特征惡化,導(dǎo)致肺癌病灶組織壞死與鄰近正常組織浸潤[10]。有研究表明,NLR在肺癌中呈異常表達(dá),是肺癌不良預(yù)后的危險因素[11]。還有研究指出,治療前NLR與進(jìn)展期NSCLC患者總生存期顯著相關(guān),且是進(jìn)展期NSCLC患者總生存期的獨立預(yù)測因素[12]。本研究中,生存組NLR明顯低于死亡組,提示NLR升高可能與NSCLC根治性放化療預(yù)后相關(guān);進(jìn)一步多因素logistic回歸分析顯示NLR是NSCLC根治性放化療預(yù)后的獨立危險因素,且ROC曲線分析顯示其對NSCLC根治性放化療預(yù)后有一定預(yù)測效能,提示NLR可作為預(yù)測NSCLC根治性放化療預(yù)后的生物標(biāo)記物。推測原因,NLR升高間接反映體內(nèi)可能有一種利于腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的炎癥微環(huán)境形成,通過抑制細(xì)胞凋亡、促血管生成等途徑推動腫瘤發(fā)生發(fā)展;而基于此種環(huán)境下,中性粒細(xì)胞大量增殖并被釋放入血,致使外周血中粒細(xì)胞計數(shù)顯著升高,導(dǎo)致炎癥反應(yīng)增強(qiáng)、淋巴細(xì)胞受抑,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞浸潤、轉(zhuǎn)移,導(dǎo)致抗腫瘤免疫反應(yīng)受抑,這可能是該指標(biāo)預(yù)測預(yù)后的可能機(jī)制。

LDH作為糖酵解途徑中一種重要的酶,參與丙酮酸和乳酸的相互轉(zhuǎn)化,與腫瘤細(xì)胞增殖和存活緊密相關(guān)[13]。通常受基因突變、外界環(huán)境因素等影響容易導(dǎo)致正常細(xì)胞發(fā)生惡變,加快細(xì)胞新陳代謝速度,促使能量代謝較為活躍,繼而增大細(xì)胞膜通透性并加快細(xì)胞增殖速度,最終導(dǎo)致細(xì)胞對能量的需求增加,可能經(jīng)LDH上調(diào)來增加糖酵解途徑,加速必要的大分子產(chǎn)物和能量供應(yīng);而伴隨著疾病進(jìn)展,外周血中LDH表達(dá)水平呈逐漸上升態(tài)勢[14]。近年來,有研究表明,在多種實體性腫瘤中血清LDH表達(dá)異常升高,且與腫瘤組織高代謝、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和不良預(yù)后有關(guān)[15]。Yang等[16]報道血清LDH異常升高是影響晚期NSCLC患者化療預(yù)后生存的獨立危險因素。本研究中,LDH是NSCLC根治性放化療預(yù)后的獨立危險因素,進(jìn)一步ROC曲線分析顯示LDH對NSCLC根治性放化療預(yù)后有良好預(yù)測作用,證實LDH可作為預(yù)測NSCLC根治性放化療預(yù)后的生物標(biāo)記物。推測原因,在相對乏氧環(huán)境中,NSCLC患者LDH表達(dá)異常升高,催化丙酮酸轉(zhuǎn)化為乳酸,生成大量大分子物質(zhì)以供腫瘤細(xì)胞增殖代謝所需;而癌基因激活可上調(diào)其M亞基組成LDHA表達(dá),影響癌基因致癌活性,二者共同參與細(xì)胞惡變過程;此外,LDHA可通過調(diào)節(jié)細(xì)胞能量代謝刺激細(xì)胞增殖、侵襲、遷移和凋亡,最終影響預(yù)后。

近年來腫瘤標(biāo)志物CEA、NSE、CYFRA21-1已被廣泛應(yīng)用于肺癌早期診斷,雖有研究對上述3項指標(biāo)預(yù)測肺癌的準(zhǔn)確度、靈敏度及特異度進(jìn)行了報道[17-19],但關(guān)于上述3項指標(biāo)與NSCLC根治性放化療預(yù)后的關(guān)系鮮有報道分析。本研究中,生存組CEA、NSE、CYFRA21-1低于死亡組,提示CEA、NSE、CYFRA21-1升高可能與NSCLC根治性放化療預(yù)后相關(guān),這與既往報道[20]相似;進(jìn)一步研究顯示上述3項指標(biāo)是NSCLC根治性放化療預(yù)后的影響因素,且對NSCLC根治性放化療預(yù)后有良好預(yù)測效能,提示上述三項指標(biāo)可作為預(yù)測NSCLC根治性放化療預(yù)后的生物標(biāo)記物。CEA、NSE、CYFRA21-1在NSCLC患者血清中的表達(dá)水平明顯上升,可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞生長、增殖,加速腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移,影響預(yù)后。此外,本研究中,NLR、LDH、CEA、NSE、CYFRA21-1聯(lián)合預(yù)測NSCLC根治性放化療預(yù)后的AUC為0.946,敏感度和特異度均達(dá)90%以上,優(yōu)于上述5項指標(biāo)單獨預(yù)測時所獲敏感度和特異度,提示聯(lián)合上述五項指標(biāo)對NSCLC根治性放化療預(yù)后具有較高的預(yù)測效能。

綜上所述,NLR、LDH、CEA、NSE、CYFRA21-1對NSCLC根治性放化療預(yù)后均有重要的預(yù)測價值,而聯(lián)合預(yù)測效能更高,可作為預(yù)測患者根治性放化療預(yù)后的生物標(biāo)記物,值得臨床驗證。