榆林市某肉牛場球蟲感染情況的調查研究

沈娜，麻文靜，蘇紅萍，李直，馮平

（榆林學院，陜西榆林 719000）

榆林市地處陜西省北部，是黃土高原與內蒙古高原的過渡區，四季分明，地域遼闊，北部為風沙草灘區，發展養殖業具有較大的優勢。 近年來，由于政府“3+2+X”產業發展戰略的提出與實施，榆林市肉牛存欄量迅速增長， 肉牛養殖場迅速增多且養殖標準較高，在榆林市畜牧業中的產值占比逐年增加[1]。在肉牛實際生產中， 各種疾病暴發會造成養殖效益不佳，寄生蟲病便是其中之一。 牛球蟲病是肉牛養殖中常見的慢性、消耗性疾病，是指由艾美爾屬球蟲寄生在牛消化道內所引起的寄生蟲病， 通常可引起患畜腸道出血、消瘦、免疫力及生產性能下降等，嚴重可致死。 病牛和帶蟲牛是該病的主要傳染源，成年牛多數呈隱性感染，不表現出臨床癥狀，犢牛因其抵抗力較低，易感性較強，所以發病率和病死率較高[2-3]。

榆林地區肉牛養殖業具有較大的發展潛力，球蟲病會造成養殖效益低下。 在此背景下，球蟲感染情況調研和防治顯得尤為重要。 本研究對榆林某肉牛場的球蟲感染狀況及感染種類進行調查，以期為該牛場球蟲病的防治提供參考，從而提高養殖效益，促進肉牛養殖業發展。

1 材料與方法

1.1 樣本采集

隨機采集榆林地區某規模化肉牛場1～2 月齡犢牛新鮮糞便樣14 份、成年牛新鮮糞便樣40 份，共計54 份， 分別裝入標記好其年齡和編號的自封袋中，置于4 ℃冰箱保存待檢。

1.2 主要儀器與試劑

主要儀器：生物顯微鏡（麥克奧迪實業集團有限公司）、恒溫培養箱（上海博泰實驗設備有限公司）、離心機（上海菲恰爾分析儀器有限公司）。 主要試劑：飽和食鹽水、2.5%重鉻酸鉀溶液、4%氫氧化鈉溶液。

1.3 測定指標與方法

1.3.1 糞樣檢查。 采用飽和食鹽水漂浮法：從樣品的不同部位挑取大小適中的糞便塊，放入干凈且干燥的青霉素小瓶中，加飽和食鹽水至瓶口下方，用細玻璃棒或小鑷子將其充分攪碎，除去液面的雜質，滴加飽和食鹽水使青霉素小瓶內糞液凸出瓶口呈半球形。 靜置15 min，用干凈載玻片蘸取球面最上端糞液，蓋上蓋玻片，置于顯微鏡下進行觀察。

1.3.2 卵囊計數。采用斯陶爾氏法進行卵囊計數進而得出感染強度： 在100 mL 三角燒瓶中加入56 mL 0.4%氫氧化鈉水溶液，加入適量待檢糞樣，使混合液體總容積達到60 mL，再加10 個小玻璃珠，充分振蕩使糞便完全破碎混勻， 然后用膠頭滴管吸取0.15 mL混合糞液，滴于載玻片上，在顯微鏡下進行卵囊計數，觀察時按照“弓”形移動載玻片，避免遺漏或重復。 為保證試驗結果的準確性，每份糞樣檢查3 個玻片，以3個玻片觀察所得卵囊的平均值乘以100， 為每克糞便中含有的卵囊數（oocysts per gramme，OPG），即感染強度。

1.3.3 卵囊收集與培養。 取適量球蟲陽性糞便置于燒杯中，加適量清水進行搗碎并攪拌均勻。 用3 層脫脂棉紗布過濾至離心管中， 置于離心機中3 000 r/min繼續離心10 min，傾倒管內上層液體，加蒸餾水攪拌均勻，離心。如此反復進行2～3 次，直至上清液清亮為止，取沉淀物用膠頭滴管吹吸均勻，移至培養皿中，根據培養皿體積大小注入適量的2.5%重鉻酸鉀溶液混勻，置于27 ℃恒溫箱中培養，每隔4～6 h 對培養皿進行搖晃吹打，直至85%以上球蟲的卵囊孢子化。

1.3.4 卵囊發育形態觀察。 對孢子化卵囊的顏色、大小、形狀和有無卵膜孔等生物學特征進行觀察，并統計不同種類球蟲卵囊孢子化所需要的時間。 參考文獻[4-6]對觀察到的卵囊進行種類鑒定。

2 結果與分析

2.1 肉牛場球蟲感染情況

2.1.1 感染率。 在檢查的54 份肉牛糞便樣品中， 檢出22 份陽性糞便，總感染率達40.74%。 其中14 份犢牛糞便樣品中陽性糞便8 份， 感染率為57.14%；40 份成年牛糞便樣品中陽性糞便14 份，感染率為35.00%。 詳見表1。

表1 肉牛球蟲感染率

2.1.2 感染強度。感染強度即為OPG。在檢出的22份糞樣中，平均OPG 為236.36 個/g，犢牛平均OPG 為362.50 個/g，成年牛平均OPG 為164.29 個/g。 詳見表2。

表2 肉牛球蟲感染強度（OPG）

2.2 球蟲感染種類及所占比例

通過觀察100 個孢子化卵囊，并按其蟲種進行分類、計數。 結果顯示，共檢出8 種艾美耳屬球蟲，所占比例分別為牛艾美耳球蟲19%、 邱氏艾美耳球蟲11%、橢圓艾美耳球蟲25%、加拿大艾美耳球蟲9%、柱狀艾美耳球蟲7%、亞球形艾美耳球蟲21%、奧博艾美耳球蟲1%及阿拉巴艾美耳球蟲7%，優勢蟲種為橢圓艾美耳球蟲和亞球形艾美耳球蟲所占比例分別為25%和21%，詳見表3。

表3 球蟲感染種類及所占比例

2.3 各種類球蟲生物學特征描述

本次試驗檢出的8 種艾美耳屬球蟲其孢子化形態詳見圖1。 8 種艾美耳屬球蟲的主要生物學特征詳見表4。

圖1 球蟲卵囊孢子化形態（40×）

表4 各種類球蟲生物學特征描述

3 討論

本研究共檢測54 份樣品，1～2 月齡犢牛新鮮糞便樣14 份、成年牛新鮮糞便樣40 份，其中陽性樣品22份，總感染率為40.74%。 此結果高于寧夏（27.46%）[7]、河北部分地區（33%）[8]的球蟲感染率，接近于新疆庫車縣（40.82%）[9]的球蟲感染率。 造成差異的原因可能與采樣地區、采樣季節和牛場的飼養管理有關，球蟲發育需要較高的溫度和濕度，多發于雨水較多的季節或地區，一般呈季節性流行[10]，各地區間的氣候差異可能會造成感染率的差異，氣候溫潤潮濕的地區球蟲感染率相較于氣候干燥的地區感染率較高；同時，牛場的飼養環境也是影響感染率的一大因素，定期清除堆積的糞便、保持飼養環境干燥通風也會在一定程度上降低感染率。

本次檢測結果發現，榆林地區某肉牛場犢牛與成年牛均存在感染情況，1～2 月齡犢牛的感染率為57.14%、 感染強度為362.5， 均高于成年牛的感染率（35%）和感染強度（164.29），這與葉莉莎等[11]、倪曉婷等[12]和花麗茹[13]的結果基本一致。 這說明犢牛較成年牛更易感染球蟲，符合牛球蟲病的發病特點。 造成此種現象的原因可能是，成年牛感染球蟲后一般不表現臨床癥狀，呈隱性感染，但帶蟲牛是重要的傳染源，而犢牛免疫系統尚未成熟，感染球蟲后自身清除機制較弱，發病率較高。 本研究共鑒定出8 種艾美耳屬球蟲，鑒定種類與馮平等[5]研究結果相似，但由于飼養品種、采樣時間等原因導致優勢蟲種略有差異。

在實際生產中養殖場工作人員應定期將牛舍、飼喂槽和運動場等進行消毒， 保證牛舍內空氣流通，保持牛舍、飼喂槽干燥清潔。 定期清理糞便與墊草，防止糞便污染。 飼喂料草盡量離地飼喂，避免飼料被污染，定期更換飲水，確保飲水干凈。 盡量將成年牛與犢牛分開養殖，哺乳期母牛在哺喂犢牛前后均應當保持其乳房干凈。 合理制定飼料配比，提高機體抵抗球蟲感染的能力。 制定相應的驅蟲方案，定期用氨丙啉、莫能菌素等抗寄生蟲藥物進行藥物預防治療，減少球蟲的感染。 一旦發現病牛，及時隔離、治療。

4 結論

通過對榆林地區某肉牛場感染情況的調查研究發現，該肉牛場球蟲感染情況比較普遍，犢牛的感染率和感染強度均高于成年牛，共檢出并鑒定出8 種艾美爾屬球蟲，分別為牛艾美耳球蟲、邱氏艾美耳球蟲、橢圓艾美耳球蟲、加拿大艾美耳球蟲、亞球形艾美耳球蟲、柱狀艾美耳球蟲、奧博艾美耳球蟲和阿拉巴艾美耳球蟲，其中橢圓艾美耳球蟲和亞球形艾美耳球蟲為該牛場的優勢蟲種。 在實際生產中要注意保持牛舍環境通風干燥，定期清理糞便與墊草，制定安全可行的驅蟲方案，定期驅蟲，盡可能降低寄生蟲對牛只的危害，減少由此產生的損失。