雙歧桿菌與無癥狀高尿酸血癥的鐵蛋白水平相關性分析

龔化蘭 何佳 蔣銀淼 任晴葉 高海女

長期高尿酸血癥會誘發痛風發作，未發生過痛風的高尿酸人群為無癥狀高尿酸血癥（asymptomatic hyperuricemia，AH）［1］。AH是多種代謝疾病的危險因素［2］。AH對機體的典型損害機制包括氧化應激、促炎因子［3］。其中氧化應激是肥胖、動脈粥樣硬化等疾病的重要致病因素［4］。鐵蛋白對體內鐵穩態至關重要［5］。氧化應激水平升高會上調鐵蛋白的表達［6］。研究已證實鐵蛋白可用于預測體內氧化應激狀況［7］。腸道菌群影響代謝的機制也包含氧化應激［8］。高尿酸血癥患者的腸道菌群失調主要表現為雙歧桿菌［9］、乳酸桿菌、普拉梭菌的豐度異常［10］。大約25%的尿酸通過腸道代謝［11］，腸道菌群對血尿酸水平至關重要。本研究探討AH的6種腸道菌群與鐵蛋白的相關性。

1 資料與方法

1.1 研究設計與對象 本研究是基于2018年3月至2021年12月本院VIP體檢中心的數據進行的回顧性研究。采用qPCR方法檢測10種腸道細菌來評估客戶的腸道狀況。客戶在體檢前填的健康調查表包含關節疼痛、痛風發作等病史。其它臨床數據包括鐵蛋白、C反應蛋白（CRP），總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、空腹血糖（FBS）從體檢結果中收集。此研究得到了醫院倫理委員會的批準，并按照1964年《赫爾辛基宣言》及后來的修正案中規定的倫理標準進行。

1.2 入選標準 所有檢測了6種腸道菌群（雙歧桿菌、乳酸桿菌、普拉梭菌、丁酸梭菌，柔嫩梭菌、腸桿菌）、鐵蛋白、CRP，且年齡＞18歲的患者是初步研究人群。排除有痛風發作史、近1個月有急性感染病史、近3個月內有高嘌呤飲食、近3個月內服用抗生素和益生菌者。排除有肝腎功能不全、腫瘤標志物水平高、肝炎病毒感染者。排除孕期或哺乳期婦女。

1.3 分組的定義 根據血尿酸水平分為AH組和健康對照組。成人高尿酸血癥（HUA）的診斷標準：在正常飲食條件下，空腹血尿酸水平男性≥420 μmol/L，女性≥360 μmol/L［12］。AH的標準為血尿酸水平達到高尿酸血癥標準，但無急性關節炎癥狀［13］。

1.4 統計學方法 采用SPSS 23.0軟件。正態分布的連續變量以（±s）表示，組間比較采用t檢驗；非正態分布的數據以［M（P25，P75）］表示，組間比較采用Mann-Whitney秩和檢驗。計數資料以n或%表示，組間比較采用χ2檢驗。應用Logistic回歸分析評估AH的危險因素。采用相關性分析評估腸道菌群、鐵蛋白、尿酸三者之間的相關性。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組臨床和代謝指標的比較 共有708例患者同時檢測了六種腸道細菌、鐵蛋白和CRP。其中31例有明確的痛風發作史，45例因明顯肝功能異常、乙肝病毒感染、腫瘤標志物水平高被排除。最后共632例納入研究，其中AH組189例、健康對照組443例。見表1。

表1 兩組人群的臨床和代謝特征

2.2 兩組腸道細菌計數的比較 這六種腸道細菌（雙歧桿菌、乳酸桿菌、普拉梭菌、丁酸梭菌，柔嫩梭菌、腸桿菌）的計數在AH組均下降，但只有雙歧桿菌的計數差異有統計學意義（P＜0.05）。雙歧桿菌在AH組的中位數為7.34×104copies/g，健康對照組為1.91×105copies/g，P=0.025。見表2。

表2 兩組腸道細菌計數的比較

2.3 Logistic回歸及相關分析 將雙歧桿菌、性別、年齡、鐵蛋白、BMI、TC、TG、LDL、HDL納入回歸模型。結果顯示鐵蛋白和BMI均是AH的危險因素（鐵蛋白：OR=1.002，95%CI：1.000～1.003；BMI：OR=1.156，95%CI：1.034～1.292）。采用Pearson相關分析比較鐵蛋白分別與尿酸、BMI的相關程度，結果顯示鐵蛋白與尿酸的相關程度（r=0.523，P＜0.001）高于鐵蛋白與BMI（r=0.313，P＜0.001）。進一步采用Sperman相關分析評估雙歧桿菌與鐵蛋白的相關性，結果顯示雙歧桿菌與鐵蛋白呈顯著負相關（r=-0.134，P=0.001）。

3 討論

尿酸不僅是抗氧化劑［14］也是促氧化劑［15］。尿酸在細胞內可通過NADPH氧化酶促進細胞的氧化應激反應和活性氧（ROS）的生成［16］。鐵蛋白是主要的鐵儲存蛋白，其可緩沖Fe3+對細胞的氧化損傷［5］。ROS可增加細胞內鐵離子水平，上調鐵蛋白的表達［17］。當細胞內氧化應激水平增加時，轉錄因子Nrf2與ARE結合也可上調鐵蛋白的轉錄［18］。鐵蛋白在急性炎癥時會升高［19］。本研究通過選擇無關節炎發作的AH和比較兩組CRP的水平排除了急性炎癥對鐵蛋白的影響。盡管鐵蛋白與BMI存在相關性，但鐵蛋白與UA的相關性更強。既往的研究也發現UA可以劑量依賴的方式刺激鐵蛋白的表達，而且此作用能被苯溴馬隆所抑制［20］。

體內大約25%的尿酸通過腸道代謝排出［11］，腸道菌群對血尿酸水平至關重要［9-10］。本研究也發現AH組的雙歧桿菌明顯下降。雙歧桿菌是益生菌，可直接用于緩解高尿酸血癥［21］。富含益生元的飲食也可通過增加雙歧桿菌的豐度來降低血尿酸的水平［22］。進一步研究發現雙歧桿菌因含有Sir2基因家族而直接具有抗氧化活性［23］。口服雙歧桿菌可顯著抑制皮膚細胞內紫外線誘導的ROS水平及黃嘌呤氧化酶活性［24］。雙歧桿菌還可通過調節鐵信號來抑制TLR4/NF-kB通路相關的炎癥標志物［25］。總之，雙歧桿菌不僅可通過降尿酸來影響鐵蛋白，還可直接因其具有的抗氧化活性來影響鐵蛋白水平。雙歧桿菌可被推廣成為降低AH對機體氧化應激損害的新方法。