灰樹花工廠化瓶栽菌株篩選試驗

陳詩杰 宋昀程 陳 靜 錢正祥 李金鑫

（上海豐科生物科技股份有限公司，上海 奉賢 201401）

灰樹花Grifola frondosa，又名舞茸，隸屬擔子菌亞門Basidiomycota、層菌綱Hymenomycetes、無隔擔子菌亞綱Holobasidiomycetidae、非褶菌目Aphyllophorales、多孔菌科Polyporaceae、樹花菌屬Grifola[1]，因其口感獨特，風味好，營養豐富，藥用價值高等，逐漸成為當前可食的新興食用菌種類[2-3]。灰樹花持續增長的市場需求刺激其人工栽培趨于規模化，陸續形成設施化地栽、工廠化袋栽及工廠化瓶栽三大主要栽培模式，工廠化生產產量更高，品質更好，發展空間較大[4-5]。

不同生產模式因在生產環節、栽培環境和栽培工具等方面的差異[6]，使得相應生產模式專用菌株的選用要求更高。李紅梅等[7]進行引進和自主分離野生的灰樹花菌株林地仿野生栽培試驗，從中篩選出適合冀中南地區林下栽培的3個灰樹花菌株。彭學文等[8]從6 株野生灰樹花菌株中篩選出適合唐山當地覆土栽培的1 個灰樹花菌株。金宇昌等[12]采取工廠化袋栽模式篩選出1 個灰樹花袋栽潛力菌株。為從現有菌株中篩選出適宜工廠化瓶栽的灰樹花潛力菌株，筆者進行8 個灰樹花菌株的瓶栽比較試驗，為提升灰樹花規模化瓶栽生產整體效能，搭建灰樹花瓶栽專用品種選育提供數據支撐。

1 材料與方法

1.1 供試菌株及培養基

（1）供試灰樹花菌株

供試8個菌株編號和來源見表1。

表1 供試灰樹花菌株編號及來源

（2）供試培養基

PDA 培養基：馬鈴薯800 g，葡萄糖20 g，瓊脂條20 g，水1.0 L，pH 自然。培養基滅菌后取直徑90 mm玻璃平皿倒板，備用。

三角瓶培養基：木屑85%，麩皮15%。料含水量65%，pH自然，滅菌后冷卻，備用。

栽培種培養基：木屑60%，棉籽殼20%，麩皮10%，玉米芯5%，豆渣5%。料含水量65%，pH 自然，瓶裝濕料585～590 g，滅菌后冷卻，備用。

1.2 試驗方法

1.2.1 供試灰樹花菌株菌絲生長速度

使用打孔器打孔已活化的灰樹花菌株純培養物以制備直徑5 mm 菌餅，將菌餅接于PDA 培養基中央，置于25 ℃恒溫培養箱中避光培養。每日觀察菌絲生長狀態，3 d后劃線，直至菌絲長滿平板，計算菌絲生長速度，每個菌株設3個重復。

1.2.2 供試灰樹花菌株農藝性狀

將供試灰樹花菌株接種于三角瓶培養基內，每個菌株接種4 瓶，25 ℃培養15 d 培養原種。將原種接入裝有培養料850 mL規格塑料瓶中，每個菌株16瓶。置于23～25 ℃，空氣相對濕度65%～70%，二氧化碳質量分數小于2 000 mg/kg 的培養房中黑暗培養，菌絲長滿栽培瓶后給予150～200 lx 散射光刺激以促進原基生長。待原基隆起吐水后及時揭蓋，移入18～20 ℃，空氣相對濕度85%～95%，二氧化碳質量分數小于1 000 mg/kg，光照強度200～400 lx 的出菇房內進行出菇管理。待子實體長至八成熟時及時采收。記錄子實體的菌蓋顏色、形狀、數量等農藝性狀，每瓶僅采收1潮。

1.2.3 供試灰樹花菌株子實體生產性能

記錄從接種到搔菌的天數，即為菌齡；從接種到采收的天數，即為栽培周期。采收后稱量單朵灰樹花，記錄單產；計算出菇率和污染率。

出菇率=（每個菌株開片總朵數/每個菌株接種總瓶數）×100%

污染率=（每個菌株污染總瓶數/每個菌株接種總瓶數）×100%

1.3 數據分析

采用Microsoft Office Excel 2017 處理數據；運用SPSS2.0軟件分析比較供試配方之間的差異顯著性。

2 結果與分析

2.1 供試灰樹花菌株菌絲生長速度及菌落形態

由表2、圖1 可知，8 個灰樹花菌株菌絲生長速度有顯著差異（P＜0.05，下同），同時，菌絲長勢、菌絲質地及菌落特點也各有差異。菌株GF-6 生長速度最快，為0.68 cm/d，其次是菌株GF-4，生長速度為0.58 cm/d，再次是菌株GF-1、GF-5，生長速度為0.48 cm/d，均與對照菌株152 差異顯著；其他菌株菌絲生長速度與對照菌株152差異不顯著。菌絲生長勢及菌落質地，除菌株151、GF-2 較對照菌株弱外，其他菌株菌絲長勢均較強，并基于自身特性形成邊緣和隆起度有異的潔白菌落。

表2 供試灰樹花菌株菌絲生長速度及菌落形態

2.2 供試灰樹花菌株子實體農藝性狀

供試灰樹花菌株中除菌株GF-4 未形成原基外，其他菌株出菇后子實體性狀如表3、圖2。對照菌株152的朵形橫縱比最高，朵形最為挺拔，與其他菌株差異顯著；其次是菌株151、GF-5、GF-6，菌株GF-3 的朵形最為平展。另外，菌株151、GF-1、GF-3、GF-6 長寬比較對照菌株152 高，其朵形更為圓潤。供試菌株菌蓋顏色以深色品系為主，除菌株GF-5 為白色外，其他6 個菌株均為褐色。所有供試菌株菌蓋邊緣平滑，菌柄較長呈匙形，菌株GF-1 和GF-3 菌蓋面積更大，呈扇形。菌株GF-1、GF-2、GF-3、GF-6 較菌株152 的菌蓋數量更多，朵形更為密集。不同菌株農藝性狀各有差異，這為滿足消費需求提供多樣的選擇性。

圖2 供試部分灰樹花菌株瓶栽子實體形態

表3 供試灰樹花菌株子實體農藝性狀

2.3 供試灰樹花菌株子實體的生產性能

由表4 可知，對照菌株152 的瓶栽均產為84.76 g，菌株GF-1 均產較對照菌株高，為94.56 g，其次為菌株GF-6，均產為90.96 g。其他菌株的均產均低于對照菌株152，菌株GF-5 最低，瓶栽均產為71.56 g，與菌株GF-1 相差20 g 以上。由此可見，單就瓶單產而言，菌株GF-1、GF-6優勢較為明顯。

表4 供試灰樹花菌株生產性能

對照菌株152 的瓶栽出菇率為100%，其次為菌株GF-6，瓶栽出菇率為96.88%；除菌株GF-3、GF-5出菇率為87.5%、50%且表現最差外，其他菌株的出菇率均在90%以上。菌株151 污染率與對照菌株152 相同，為0，其次為菌株GF-1、GF-6，污染率為3.13%，其他菌株污染率較高，菌株GF-5 污染率最高，為37.5%。由此可見，單就出菇率、污染率而言，除對照菌株152 外，菌株151、GF-1、GF-6 表現均較優。

菌株GF-1、GF-2、GF-3 的栽培周期為38 d，最短，比對照菌株152 少1 d；菌株GF-5 的栽培周期為44 d，最長。菌株GF-1、GF-2 的菌絲培養周期為24 d，最短，比對照菌株152少5 d；菌株GF-5的菌絲培養周期為30 d，最長。對照菌株152及菌株151的出菇期均為10 d，最短，其次是菌株GF-3，出菇期為12 d，其他菌株出菇期為14～15 d。由此可見，單就栽培周期而言，較對照菌株152，菌株GF-1、GF-2、GF-3優勢明顯。

3 小結

工廠化瓶栽灰樹花的選擇適配菌株至關重要，是提升工廠化生產產能和產值重要因素[9]。目前廣泛使用（野生馴化或人工選育）的灰樹花菌株，多為應用于地栽和袋栽模式[10]，瓶栽研究鮮有報道。試驗結果表明，試驗灰樹花菌株瓶栽也能出菇，且具有一定的單產和出菇率，表明現有菌株進行工廠化瓶栽是可行的。

綜合分析結果表明，菌株GF-1、GF-6在瓶栽條件下表現較為突出，瓶栽均產高，污染率低，栽培周期短，可作為進一步規模化示范栽培的菌株。但相較國外瓶栽專用灰樹花菌株的表現來看，國內菌株在朵形、單產和出菇率等性能上仍存在較大的改良空間[11]。因此，今后有必要基于潛力菌株持續進行改良和選育，同時也需要對相應菌株的配套配方、栽培工藝等加以研究和精選，以進一步提高適配菌株工廠化生產性能。