活動(dòng)性肺結(jié)核患者淋巴細(xì)胞變化及診斷價(jià)值

楊 揚(yáng) 楊 慧

安陽(yáng)市第三人民醫(yī)院(河南 安陽(yáng) 455000)

肺結(jié)核是一種慢性感染性疾病,主要致病菌是結(jié)核分歧桿菌,在肺結(jié)核患者中,約8%會(huì)發(fā)展為活動(dòng)性結(jié)核[1]。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展,肺結(jié)核在診斷治療方面取得了巨大進(jìn)步,但隨著人口流動(dòng)性的增加,肺結(jié)核在傳播方面未得到有效控制,控制其傳播需依賴有效的診斷及檢測(cè)方法,臨床常用的微生物檢查、胸部影像學(xué)檢查等方法均具有較大局限性,臨床急需能夠輔助診斷活動(dòng)性肺結(jié)核的新指標(biāo)[2-3]。有研究表明[4],活動(dòng)性肺結(jié)核的病情與淋巴細(xì)胞的功能狀態(tài)密切相關(guān),淋巴細(xì)胞的免疫學(xué)檢測(cè)在診斷活動(dòng)性肺結(jié)核方面具有較大潛力,但相關(guān)研究鮮少,故本研究選取了85例活動(dòng)性肺結(jié)核患者,旨在探究活動(dòng)性肺結(jié)核患者淋巴細(xì)胞變化及診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年2月至2019年2月期間安陽(yáng)市第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科收治的活動(dòng)性肺結(jié)核患者85例。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)患者均符合活動(dòng)性肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)[5];(2)無(wú)抗結(jié)核藥物治療史;(3)近2個(gè)月內(nèi)未服用免疫抑制劑;(4)無(wú)認(rèn)知障礙,可進(jìn)行正常溝通交流;排除標(biāo)準(zhǔn):(1)患血液系統(tǒng)疾病或免疫系統(tǒng)疾病者;(2)年齡<18歲;(3)嚴(yán)重肝腎功能不全者;(4)合并其他肺部感染者;(5)哺乳期或妊娠期婦女;(6)患精神疾病者;(7)伴惡性腫瘤者;(8)不配合研究者。另選取同時(shí)期體檢的85例非活動(dòng)性結(jié)核患者,兩組性別、年齡、體質(zhì)指數(shù)(BMI)等基線資料無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),見表1。

表1 兩組患者一般資料對(duì)比

活動(dòng)性肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]:肺部影像學(xué)提示肺部感染,痰培養(yǎng)、痰涂片或活組織檢查顯示γ-干擾素釋放試驗(yàn)(IGRA)陽(yáng)性、抗酸桿菌陽(yáng)性、血清半乳甘露聚糖(GM)抗原檢測(cè)試驗(yàn)陰性確診。

1.2研究方法 使用寰熙醫(yī)療公司生產(chǎn)的XF-1600型流式細(xì)胞儀,采集所有研究對(duì)象空腹外周血5ml,放入EDTA-K2(乙二胺四乙酸二鉀)真空采集管中待檢,取0.1ml抗凝血加入流式上樣管中,再加入20μl熒光抗體進(jìn)行標(biāo)記,混勻,37℃避光反應(yīng)20min后加入10%溶血素,混勻,再次37℃避光反應(yīng)12min至液體透亮,將樣本加入離心機(jī)中離心5min(轉(zhuǎn)速:1500r/min),棄去上清液,向上樣管內(nèi)加入1mlPBS(磷酸鹽緩沖液),混勻,再次將樣本加入離心機(jī)中離心5min(轉(zhuǎn)速:1500r/min),棄去上清液,向上樣管內(nèi)加入0.5mlPBS,混勻,將樣本加入流式細(xì)胞儀中對(duì)淋巴細(xì)胞亞群進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)均由同組醫(yī)生完成,檢測(cè)過程嚴(yán)格按照說(shuō)明書執(zhí)行。

2 結(jié)果

2.1兩組患者T淋巴細(xì)胞群變化比較 活動(dòng)性肺結(jié)核組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+低于非活動(dòng)性肺結(jié)核組(P<0.05),CD8+高于非活動(dòng)性肺結(jié)核組(P<0.05),見表2。

表2 兩組患者T淋巴細(xì)胞變化比較

2.2T淋巴細(xì)胞變化在活動(dòng)性肺結(jié)核中的診斷價(jià)值 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+診斷活動(dòng)性肺結(jié)核的AUC分別為0.859、0.845、0.796、0.873,具有較高特異度和敏感度,(P<0.05)見表3。

圖1 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+診斷活動(dòng)性肺結(jié)核的ROC曲線

表3 淋巴細(xì)胞變化在活動(dòng)性肺結(jié)核中的診斷價(jià)值

3 討論

據(jù)流行病學(xué)統(tǒng)計(jì),在所有傳染病死因中,結(jié)核病位居第一[7],其主要原因之一是缺少有效地診斷方法。臨床有效診斷結(jié)核感染的方法是γ-干擾素釋放試驗(yàn),但無(wú)法準(zhǔn)確區(qū)分潛伏性結(jié)核和活動(dòng)性結(jié)核[8]。何麗麗等[9]研究顯示,肺結(jié)核的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移過程與患者自身的免疫功能密切相關(guān),肺結(jié)核的致病菌結(jié)核分歧桿菌是一種胞內(nèi)寄生菌,能夠?qū)C(jī)體產(chǎn)生持續(xù)細(xì)胞免疫應(yīng)答。血液中的淋巴細(xì)胞在細(xì)胞免疫中起到非常重要的作用,淋巴細(xì)胞分化成不同亞型細(xì)胞并分泌出免疫因子,提高機(jī)體抗感染能力,達(dá)到保護(hù)機(jī)體的目的[10]。

本研究結(jié)果顯示,活動(dòng)性肺結(jié)核組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+低于非活動(dòng)性肺結(jié)核組(P<0.05),活動(dòng)性肺結(jié)核組CD8+高于非活動(dòng)性肺結(jié)核組;提示了活動(dòng)性肺結(jié)核患者淋巴細(xì)胞水平發(fā)生明顯變化。在CD4+是一種輔助性/誘導(dǎo)性T淋巴細(xì)胞,通過產(chǎn)生β細(xì)胞生長(zhǎng)因子,誘導(dǎo)β細(xì)胞分化為漿細(xì)胞,起到抑制抗體形成的作用[11]。劉慧君等[12]人研究指出,結(jié)核患者CD4+淋巴細(xì)胞水平及功能狀態(tài)顯著降低,與本研究結(jié)果相符。CD3+在細(xì)胞免疫應(yīng)答過程中起到重要作用,活動(dòng)性肺結(jié)核患者CD3+水平下降可能原因?yàn)?機(jī)體受結(jié)核分歧桿菌感染后CD3+分化,分泌免疫因子而被大量消耗[14]。CD8+能溶解感染后無(wú)免疫活性的靶細(xì)胞,可調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能,增強(qiáng)機(jī)體識(shí)別和清除結(jié)核分歧桿菌能力,對(duì)機(jī)體起到保護(hù)作用[15]。劉雙紅等[16]研究表明,活動(dòng)性肺結(jié)核發(fā)生進(jìn)展過程會(huì)誘導(dǎo)CD8+增殖分化,是CD8+淋巴細(xì)胞水平顯著升高,于本研究結(jié)果相符。ROC曲線分析結(jié)果顯示,CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+診斷活動(dòng)性肺結(jié)核的AUC分別為0.859、0.845、0.796、0.873,且具有較高特異度和敏感度,提示了活動(dòng)性肺結(jié)核患者淋巴細(xì)胞水平變化在診斷活動(dòng)性肺結(jié)核中具有較高價(jià)值,臨床可根據(jù)患者淋巴細(xì)胞構(gòu)成改變,判斷免疫功能是否正常,作為輔助診斷活動(dòng)性肺結(jié)核的一項(xiàng)重要指標(biāo)。因病原學(xué)確診難度較大,且本研究樣本數(shù)較少,具有一定局限性,對(duì)活動(dòng)性肺結(jié)核淋巴細(xì)胞的變化在肺結(jié)核診斷及治療中價(jià)值有待進(jìn)一步探究。

綜上,活動(dòng)性肺結(jié)核患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平顯著降低,CD8+水平顯著升高,淋巴細(xì)胞變化對(duì)活動(dòng)性肺結(jié)核具有較高診斷價(jià)值。