老年下呼吸道感染患者痰液培養細菌分布及新型冠狀病毒感染對其分布的影響

卓 影,李步任,江瑩瑩,張詩顏

福建中醫藥大學附屬福鼎醫院檢驗科,福建寧德 355200

下呼吸道感染主要以細菌性感染為主,成年患者病死率為3%～5%,60歲以上老年患者的病死率更高[1-2]。目前國家對新型冠狀病毒感染(以下簡稱新冠)實施“乙類乙管”措施。由于老年群體多伴有基礎疾病且免疫功能較低,他們感染新冠病毒的概率更高,又常合并下呼吸道細菌感染,為臨床診治增加難度。本研究旨在分析老年下呼吸道感染患者痰液培養細菌的分布情況及新冠病毒對其細菌分布的影響,現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2022年10月至2023年1月在本院診斷為下呼吸道感染的167例老年(年齡≥60歲)住院患者作為研究對象,其中男131例,女36例,年齡60～95歲。納入標準:臨床診斷為下呼吸道感染;年齡≥60歲。排除標準:除細菌外的其他病原菌引起的下呼吸道感染。根據核酸檢測結果將研究對象分為新冠組和非新冠組。兩組年齡、性別等一般資料比較,差異均無統計學意義(P>0.05),具有可比性。本研究經醫院醫學倫理委員會批準(2023001)。所有研究對象均知情同意

1.2方法 收集所有研究對象入院前的痰液標本進行新冠病毒核酸檢測,取痰液方法包括深咳(取第2口深部痰液)、對氣管肺泡進行灌洗以取得灌洗液等,取到的標本立即送至本院檢驗科進行細菌培養。檢驗科參照《全國臨床檢驗操作規程》[3]先予以顯微鏡檢查篩選,對標本實施革蘭染色再以低倍鏡觀察,將單視野鱗狀上皮細胞≤10個、多核白細胞>25個的標本作為合格標本。將合格標本接種于血瓊脂培養基(購自鄭州安圖公司),在35 ℃的培養箱中培養24 h后分離,純化優勢菌株,最后選用法國梅里埃VITECK?MS微生物質譜鑒定系統對病原菌做出鑒定。所用質控菌株包含金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、糞腸球菌ATCC29212及銅綠假單胞菌ATCC27853均來源于福建省臨床檢驗中心。新冠病毒核酸檢測采取反轉錄酶聚合酶鏈反應(RT-PCR)法,陰、陽性對照試劑、全自動核酸提取儀和實時熒光定量PCR檢測儀均購自西安天隆基因有限責任公司,以循環數閾(Ct)值<40為陽性結果。

1.3統計學處理 采用SPSS22.0統計軟件分析數據。計數資料以例數或百分率表示,組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1兩組痰液標本留取量比較 新冠組86例,非新冠組81例,兩組痰液標本留取量比較,差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組痰液標本留取量[n(%)]

2.2兩組下呼吸道感染疾病分布情況比較 新冠組和非新冠組下呼吸道感染疾病分布情況比較,差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 兩組下呼吸道感染疾病分布情況比較[n(%)]

2.3兩組細菌分布情況比較 167例老年住院患者單一細菌感染137例(82.0%),2株細菌混合感染27例(16.2%),3株細菌混合感染3例(1.8%)。其中非新冠組檢出99株細菌,新冠組檢出101株細菌。革蘭陽性菌22株(11.0%),革蘭陰性菌178株(89.0%)。患者感染前10位的病原菌為肺炎克雷伯菌(30.0%,60/200)、銅綠假單胞菌(18.5%,37/200)、鮑曼不動桿菌(12.5%,25/200)、大腸埃希菌(7.5%,15/200)、嗜麥芽窄食單胞菌(7.5%,15/200)、金黃色葡萄球菌(6.5%,13/200)、肺炎鏈球菌(4.5%,9/200)、流感嗜血桿菌(3.0%,6/200)、陰溝腸桿菌(2.0%,4/200)、產氣腸桿菌(2.0%,4/200)。非新冠組感染鮑曼不動桿菌患者比例高于新冠組,而感染嗜麥芽窄食單胞菌患者比例低于新冠組,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 兩組細菌分布情況比較[n(%)]

3 討 論

新冠病毒具有多種蛋白質結構,包括膜糖蛋白、刺突蛋白、核衣殼蛋白、小膜蛋白和血凝素酯酶[4]。新冠病毒外表面糖蛋白刺突主要附著和進入宿主細胞,機體感染該病毒后可引發組織的致命損傷[5]。有研究表明,混合細菌感染和繼發細菌感染是新冠老年患者高病死率的原因[6]。新冠病毒入侵肺部時會引發肺細胞、組織損害,從而吸引中性粒細胞和巨噬細胞到感染部位并促進炎癥反應,最后導致細菌黏附、侵入細胞并增殖[7]。因此,明確老年下呼吸道感染患者的病原菌對臨床診療尤為重要。

本研究老年下呼吸道感染患者的主要病原菌有肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌、大腸埃希菌、嗜麥芽窄食單胞菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌,這與相關文獻的研究結果一致[8-9]。呼吸道培養物鑒定出的常見細菌,以及老年肺部感染患者痰液培養鑒定結果均以革蘭陰性菌感染為主,主要包括肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌等。感染革蘭陽性菌主要包括肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌等,這與SAID等[10]的研究結果相符。

本研究結果顯示非新冠組感染嗜麥芽窄食單胞菌患者比例低于新冠組,差異有統計學意義(P<0.05)。陸桃紅等[11]研究顯示嗜麥芽窄食單胞菌感染的危險因素主要為高齡、有原發肺部基礎疾病、使用廣譜抗菌藥物等,65.8%的嗜麥芽窄食單胞菌感染患者的年齡>60歲,68.4%的患者有原發肺部基礎疾病。有研究發現,在新冠病毒感染的ICU患者中存在繼發性嗜麥芽窄食單胞菌感染[9],這與本研究結果相符。

本研究發現,非新冠組感染鮑曼不動桿菌患者比例高于新冠組,差異有統計學意義(P<0.05)。鮑曼不動桿菌是一種具有較強生命力的機會致病菌,當患者合并病毒性呼吸道感染時,易引起二重感染[12]。然而,新冠病毒合并鮑曼不動桿菌的感染率在各地報道的相差較大,CHEN等[13]報道了武漢99例新冠病毒感染患者,只有1例合并鮑曼不動桿菌感染,合并感染率為1.0%;另有文獻報道,在武漢市住院的1 495例新冠病毒感染患者中,有6.8%的患者發生細菌混合感染,主要致病菌是鮑曼不動桿菌,其合并感染率為3.8%[14]。巴西米納斯吉拉斯州SILVA等[15]研究發現,新冠病毒合并鮑曼不動桿菌的感染率為9.9%;沙特阿拉伯SAID等[10]報道301例新冠病毒感染患者中有34例鮑曼不動桿菌,合并感染率為11.3%。鮑曼不動桿菌在各地的感染率不同,具體原因有待進一步研究。

本研究分析了老年下呼吸道感染患者痰液培養細菌分布和新冠病毒感染對其分布的影響,實驗結果顯示非新冠組感染鮑曼不動桿菌患者比例高于新冠組,非新冠組感染嗜麥芽窄食單胞菌患者比例低于新冠組,差異均有統計學意義(P<0.05)。這可為未來將細菌分布作為輔助診斷新冠病毒感染的指標之一提供了參考依據。本研究依然存在局限性:(1)本課題主要研究新冠病毒合并下呼吸道細菌感染患者的細菌分布差異,未把真菌、支原體、衣原體、寄生蟲及其他病毒等病原體納入研究;(2)本研究納入的病例較少,需開展大規模的臨床研究來調查新冠合并其他病原體感染的發生率、流行率和特征及微生物學分布。本課題組將以此作為繼續研究的方向,從而進一步評估老年下呼吸道感染患者病原菌分布的復雜性。