帕金森病患者唾液中α-syn、DJ-1、HO-1、AchE水平變化及其輔助診斷價(jià)值

雷 蕾,王文哲

陜西省延安大學(xué)咸陽(yáng)醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科,陜西咸陽(yáng) 712000

帕金森病,又稱(chēng)震顫麻痹,是一種常見(jiàn)的中老年神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病,主要表現(xiàn)為靜止性或運(yùn)動(dòng)性手、頭及嘴的不自主運(yùn)動(dòng),以及自主神經(jīng)功能紊亂癥狀,多見(jiàn)于65歲以上人群[1]。目前臨床治療帕金森病的主要原則為對(duì)癥治療,但由于帕金森病為不可逆、進(jìn)行性疾病,目前臨床尚無(wú)治愈方法,因此早期診斷并給予及時(shí)干預(yù)有助于延緩帕金森病的發(fā)展,對(duì)改善患者預(yù)后尤為重要[2]。目前帕金森病的診斷基于臨床病史、癥狀和體征的回顧、神經(jīng)系統(tǒng)檢查,以及排除其他疾病診斷,但仍有超過(guò)45%的帕金森病患者在疾病早期可能被誤診[3]。唾液檢測(cè)是一種新興的、熱門(mén)的醫(yī)學(xué)檢查方法,具有取材方便、成本低廉等多種優(yōu)勢(shì),有助于神經(jīng)系統(tǒng)疾病的輔助診斷與早期預(yù)警。既往研究發(fā)現(xiàn),帕金森病患者唾液中α-突觸核蛋白(α-syn)、DJ-1水平呈明顯異常,可能介導(dǎo)帕金森病的發(fā)生及發(fā)展[4]。血紅素加氧酶-1(HO-1)是氧化應(yīng)激敏感指標(biāo),其水平的升高反映腦黑質(zhì)存在氧化應(yīng)激情況[5]。乙酰膽堿酯酶(AchE)水平由β受體調(diào)控,其水平與交感神經(jīng)活性密切相關(guān),可能參與機(jī)體自主神經(jīng)病變[6]。本研究旨在分析帕金森病患者唾液中α-syn、DJ-1、HO-1、AchE水平變化及其輔助診斷價(jià)值?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2021年8月至2022年8月本院收治的帕金森病患者96例作為帕金森病組,另選取同期于本院健康查體中心查體的健康人群80例作為健康對(duì)照組。帕金森病組男46例,女50例;平均年齡(61.08±9.45)歲。健康對(duì)照組男36例,女44例;平均年齡(60.52±6.85)歲。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)符合臨床關(guān)于帕金森的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7];(2)年齡為45～75歲。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)診斷為繼發(fā)性帕金森病;(2)合并重要器官?lài)?yán)重功能障礙;(3)合并惡性腫瘤;(4)合并認(rèn)知功能減退疾病;(5)合并其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病;(6)合并內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病。兩組性別、年齡比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。帕金森病組患者根據(jù)蒙特利爾認(rèn)知量表(MoCA)評(píng)分分為合并認(rèn)知障礙組(MoCA評(píng)分<26分)和無(wú)認(rèn)知障礙組(MoCA評(píng)分≥26分)。所有患者及家屬知情同意并簽署知情同意書(shū)。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意(WYKQ21524)。

1.2方法 采用被動(dòng)流口水法采集兩組受檢者唾液標(biāo)本,采集前禁食1 h、禁酒12 h,唾液標(biāo)本在4 ℃環(huán)境下以2 600 r/min離心15 min,取上清液放入-80 ℃冰箱中冷凍保存。采用 Uranus AE275全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析儀(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))檢測(cè)所有受檢者唾液中HO-1、α-syn、DJ-1水平,采用酶比色法檢測(cè)所有受檢者唾液中AchE水平。

2 結(jié) 果

2.1健康對(duì)照組和帕金森病組唾液指標(biāo)水平比較 帕金森病組患者唾液α-syn、DJ-1、HO-1水平低于健康對(duì)照組, AchE水平高于健康對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 健康對(duì)照組和帕金森病組唾液指標(biāo)水平比較

2.2合并認(rèn)知障礙組和無(wú)認(rèn)知障礙組唾液指標(biāo)水平比較 合并認(rèn)知障礙組有32例,無(wú)認(rèn)知障礙組有64例。合并認(rèn)知障礙組患者唾液α-syn、DJ-1、HO-1水平低于無(wú)認(rèn)知障礙組, AchE水平高于無(wú)認(rèn)知障礙組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 合并認(rèn)知障礙組和無(wú)認(rèn)知障礙組唾液指標(biāo)水平比較

2.3唾液指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)診斷帕金森病的效能 α-syn、DJ-1、HO-1、AchE單獨(dú)檢測(cè)診斷帕金森病的曲線下面積(AUC)分別為0.723、0.781、0.816、0.671,4項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合診斷帕金森病的AUC為0.876。見(jiàn)表3、圖1。

圖1 唾液指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)診斷帕金森病的ROC曲線

表3 唾液指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)診斷帕金森病的效能

3 討 論

帕金森病是常見(jiàn)的慢性進(jìn)展性疾病,早期多無(wú)明顯表現(xiàn),隨著病情發(fā)展逐漸出現(xiàn)肢體震顫、肌肉僵直等癥狀,嚴(yán)重影響患者日常生活。由于其發(fā)病機(jī)制尚未完全明確,目前臨床上針對(duì)不同類(lèi)型帕金森病的治療方案也各不相同。近年來(lái)65歲以上人群的帕金森病發(fā)病率為1.7%,且呈年輕化趨勢(shì)發(fā)展,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[8]。帕金森病的病因尚未明確,目前的研究?jī)A向于該疾病的發(fā)生與年齡增長(zhǎng)、遺傳及環(huán)境等綜合因素有關(guān)。臨床尚無(wú)完全根治的方法,因此早期診斷并給予干預(yù)有助于減輕患者癥狀、改善患者生活質(zhì)量。

目前臨床診斷帕金森病的主要方式為影像學(xué)技術(shù),可有效反應(yīng)疾病進(jìn)展及可能出現(xiàn)的治療并發(fā)癥,但影像學(xué)技術(shù)存在輻射暴露、成本高等缺點(diǎn),同時(shí)影像學(xué)技術(shù)無(wú)法作為篩查手段,因此尋找一種早期輔助診斷帕金森病的方式至關(guān)重要。唾液標(biāo)本檢查相對(duì)于其他檢查方式,具有無(wú)創(chuàng)、易收集、可重復(fù)檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn),可作為篩查帕金森病的手段。DJ-1是氧化應(yīng)激傳感器和抗氧化劑,主要表達(dá)于丘腦、腦黑質(zhì)及海馬等神經(jīng)元,可通過(guò)介導(dǎo)NRF2、p53等多種基因發(fā)揮抵抗氧化應(yīng)激作用[9]。有研究表明,在帕金森病中DJ-1可通過(guò)多種機(jī)制保護(hù)多巴胺能神經(jīng)元[10]。α-syn屬于突觸核蛋白家族成員之一,可在腦黑質(zhì)、大腦皮質(zhì)及海馬等部位中表達(dá),可調(diào)節(jié)神經(jīng)元細(xì)胞膜穩(wěn)定性,參與線粒體功能障礙。有研究表明,在帕金森病患者血液和腦脊液中可檢測(cè)到路易體,而其主要成分為聚集的α-syn[11],這提示α-syn參與了帕金森病患者內(nèi)環(huán)境的改變,與吉家日等[12]研究結(jié)果相符,該研究認(rèn)為血清α-syn可能是帕金森病患者伴抑郁狀態(tài)的生物標(biāo)志物之一,同時(shí)血清α-syn水平升高與運(yùn)動(dòng)功能損害有關(guān)。HO-1可介導(dǎo)清除自由基及生成CO及鐵離子參與抑制氧化應(yīng)激,減輕線粒體損傷,具有一定神經(jīng)元細(xì)胞保護(hù)作用。已有研究通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí),上調(diào)HO-1水平在帕金森病患者中具有神經(jīng)保護(hù)作用,可能成為潛在的治療靶標(biāo)[13]。AchE是由膽堿酯酶分解生成的神經(jīng)遞質(zhì),可參與記憶的形成,當(dāng)膽堿能神經(jīng)損傷時(shí)可表現(xiàn)為其水平升高。本研究結(jié)果顯示,帕金森病組唾液α-syn、DJ-1、HO-1水平低于健康對(duì)照組,AchE水平高于健康對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),說(shuō)明α-syn、DJ-1、HO-1、AchE可能參與了帕金森病的發(fā)生和發(fā)展,監(jiān)測(cè)各指標(biāo)水平對(duì)評(píng)估帕金森病發(fā)生及發(fā)展有一定臨床價(jià)值。

近年來(lái),帕金森病的非運(yùn)動(dòng)性癥狀已得到國(guó)內(nèi)外廣泛的關(guān)注和重視,認(rèn)知障礙是非運(yùn)動(dòng)性癥狀的主要類(lèi)型,包括帕金森病輕度認(rèn)知障礙和帕金森病癡呆,這是影響患者生活質(zhì)量,加速疾病進(jìn)展和增加家庭、社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)的重要原因。臨床研究報(bào)道α-syn可以促進(jìn)tau蛋白毒性低聚體的產(chǎn)生,引起纖維狀淀粉樣蛋白的形成,導(dǎo)致淀粉樣斑塊形成并參與認(rèn)知障礙[14]。有研究認(rèn)為,AchE和多巴胺之間存在平衡,這種平衡是運(yùn)動(dòng)控制的主要特點(diǎn)。帕金森病的病理學(xué)中多巴胺缺乏可觸發(fā)動(dòng)力學(xué)中平衡的嚴(yán)重傾斜,導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)和認(rèn)知障礙的產(chǎn)生,以及膽堿能系統(tǒng)失衡[15]。本研究結(jié)果顯示,合并認(rèn)知障礙組患者唾液α-syn、DJ-1、HO-1水平低于無(wú)認(rèn)知障礙組, AchE水平高于無(wú)認(rèn)知障礙組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。提示α-syn、DJ-1、HO-1、AchE可能參與帕金森患者認(rèn)知功能障礙的發(fā)生。本研究的ROC曲線分析結(jié)果顯示,α-syn、DJ-1、HO-1、AchE 4項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合診斷帕金森病的AUC為0.876。提示α-syn、DJ-1、HO-1、AchE可作為輔助診斷帕金森病的有效指標(biāo),有助于早期輔助診斷帕金森病,幫助醫(yī)師指導(dǎo)治療方案及給予有效干預(yù)手段,但輔助診斷的靈敏度和特異度相對(duì)較低,尚有提升的空間。

綜上所述,帕金森病患者唾液中α-syn、DJ-1、 HO-1、AchE水平呈明顯異常,與患者認(rèn)知功能改變存在一定相關(guān)性,4項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合輔助診斷的效能最高。唾液檢測(cè)也存在一個(gè)很大的劣勢(shì),即尚缺乏特異性的、標(biāo)準(zhǔn)化的方法,使用唾液來(lái)輔助診斷帕金森病可能還需要進(jìn)一步的探索和研究,目前的結(jié)果還無(wú)法大規(guī)模在臨床上使用,未來(lái)將擴(kuò)大實(shí)驗(yàn)對(duì)象及延長(zhǎng)研究時(shí)間再次進(jìn)行深入探究。