環境因子對茶樹類黃酮合成調控的研究進展

摘要：類黃酮化合物是茶樹中重要的次級代謝產物，不僅對茶樹具有重要的生理學意義，還具有抗氧化、降脂減肥、保護肝臟等多種健康功能，是茶葉重要的功能成分。茶樹類黃酮組成及含量受環境因素影響顯著，并與結構基因及轉錄因子密切相關。本文圍繞茶樹類黃酮的生物合成過程中涉及的光照、溫度和干旱這3個重要環境因子，從3個層次系統探討了其對茶樹類黃酮物質合成的影響及分子調控機制，為高效利用茶樹類黃酮物質提供了理論和試驗依據。

關鍵詞：類黃酮；茶樹；環境因子；結構基因；轉錄因子

中圖分類號：S571.1；Q946.8" " " " " " " " " " " " " " " " " "文獻標識碼：A" " " " " " " " " " " " " " " " " " 文章編號：1000－3150（2023）03-8-11

Research Progress of Environmental Factors on Biosynthesis and

Regulation of Flavonoids in Camellia sinensis

ZHOU Feifei， DAI Binwei， CHEN Weixuan， LIU Junsheng， LI Bo， HE Puming， TU Youying， WU Yuanyuan*

Tea Research Institute of Zhejiang University， Hangzhou 310058， China

Abstract： Flavonoids are important secondary metabolites in tea plant [Camellia sinensis （L.） O. Kuntze]. These compounds are not only physiological important to tea plants， but also have many health functions such as antioxidation， lipid-lowering， weight loss， and liver protection. Hence， these are important functional components of tea. The composition and content of flavonoids in tea plants are significantly affected by environmental factors， and are closely related to structural genes and transcription factors. This paper introduced the effects of three important environmental factors （light， temperature and drought） on the flavonoid biosynthesis in tea plants and their molecular regulation mechanisms are systematically discussed at three levels. This work provided experimental and theoretical foundation for the comprehensive utilization of tea flavonoids.

Keywords： flavonoids， Camellia sinensis， environmental factors， structural genes， transcription factors

類黃酮不僅在植物體內具有控制生長素的運輸、根系的發育分支和向重性、種子萌發、紫外保護和極端環境抵御作用等重要的生理學意義[1]，對茶樹而言，還是重要的次級代謝產物，具有多種生理活性。已有的研究結果顯示，類黃酮物質的含量受土壤水分、溫度、光強度和波長、機械損傷等多種環境因素影響。

1" 茶樹類黃酮化合物及其合成途徑

1.1" 茶樹類黃酮物質的組成

茶樹[Camellia sinensis （L.） O. Kuntze]中的類黃酮物質主要由兒茶素類、黃酮類和花青素組成，均具有2-苯基苯并吡喃為主體的結構，基本碳架為C6-C3-C6[2]。這些成分不僅與茶葉品質、茶樹生長發育和新陳代謝密切相關，對人體也具有重要的生理活性，是茶樹中重要的次生代謝物。其中兒茶素類是黃烷-3-醇衍生物，占茶葉干重的12%～24%[3]。兒茶素是茶葉重要的功能成分，是許多生理活性或藥理功效的物質基礎[4]，具有降脂減肥[5]、抗氧化和清除自由基[6]、抗癌[7]等多種功能，并具有治療阿爾茲海默癥[8]及心力衰竭[9]的潛力。黃酮類化合物具有抗氧化和舒張血管[10]、延緩糖尿病血栓形成[11]及保護肝臟等[12]健康功能?；ㄇ嗨厥且环N天然的水溶性色素，與花、葉、果實等顏色的形成有密切關系，具有抗氧化[13]、抗結腸癌[14]、降血糖[15]、保護肝臟[16]等功效。目前已知的花青素有23種，普通綠色芽葉中花青素含量約占干重的0.01%，紅紫芽茶樹的花青素含量則能達到1%以上[17]。此外，有些類黃酮物質還會導致茶湯有澀味和收斂性。目前在實際農業生產中可通過栽培環境和條件的管理來降低茶鮮葉中的類黃酮含量[18]。

1.2" 茶樹類黃酮生物合成途徑與轉運

目前已知的茶樹類黃酮生物合成過程主要涉及苯丙氨酸解氨酶（Phenylalanine ammonialyase，PAL）、肉桂酸羥化酶（Cinnamate 4-hydroxylase，C4H）、4-香豆酰CoA連接酶（4-coumaroyl： CoA ligase，4CL）、查爾酮合成酶（Chalcone synthase，CHS）、查爾酮異構酶（Chalcone isomerase，CHI）、黃烷酮 3-羥化酶（Flavanone 3-hydroxylase，F3H）、類黃酮 3'-羥化酶（Flavonoid 3'hydroxylase，F3'H）、類黃酮 3'， 5'-羥化酶（Flavonoid 3'， 5'hydroxylase，F3'5'H）、黃酮醇合成酶（Flavonol synthase，FLS）、黃酮合成酶（Flavone synthase，FSI，FSII）、二氫黃酮醇 4-還原酶（Dihydroflavonol 4-reductase，DFR）、無色花色素還原酶（Leucoanthocyanidin reductase，LAR）、花青素合成酶（Anthocyanidin synthase，ANS）、類黃酮糖基轉移酶（UDPG-flavonoid glucosyl transferase，UFGT）、花青素還原酶（Anthocyanidin reductase，ANR）、表兒茶素沒食子?；D移酶（Epicatechin： 1-O-galloyl-β-D-glucose O-galloyltransferase，ECGT）等。

合成途徑為，PAL連接莽草酸途徑和苯丙烷途徑，苯丙氨酸在PAL、C4H和4CL等酶的催化下，形成4-香豆酰CoA。4-香豆酰CoA又與來自乙酰CoA的丙二酰CoA在CHS的作用下形成查爾酮，黃色的查爾酮被CHI催化，C環閉合形成無色的柚皮素，柚皮素在F3H、F3'H、F3'5'H的作用下，分別在C環3位、B環3'位和5'位上羥基化形成二氫黃酮醇（二氫槲皮素、二氫山奈素、二氫楊梅素），它們是合成黃酮醇類物質的直接前體，也是合成兒茶素和花青素的中間產物。DFR是類黃酮合成途徑中的關鍵酶，二氫黃酮醇會在DFR的作用下被還原為對應的無色花青素。LAR和ANR又分別可以將花青素轉化為非酯型兒茶素（C）、沒食子兒茶素（GC）以及表兒茶素（EC）、表沒食子兒茶素（EGC）。酯型兒茶素的合成則需要ECGT的參與，經酶學特性及蛋白質譜分析，ECGT可能屬茶樹絲氨酸羧肽酶類蛋白（SCPL）家族成員[19]，非酯型兒茶素在ECGT的作用下，可將沒食子基團轉移到非酯型兒茶素的C環3位上，形成對應的酯型兒茶素（圖1）。為了挖掘更多參與兒茶素合成的酶，可對茶樹基因組中的SCPL家族基因進行進一步的篩選、鑒定與分析。FLS催化二氫黃酮醇C環的2位和3位脫氫，從而形成黃酮醇。UFGT又以黃酮、黃酮醇和花青素為底物使其形成對應的糖苷化合物。

隨著近幾年研究的不斷深入，關于LAR和ANR的功能又有了新的發現，LAR既參與非表型兒茶素的合成也參與表型兒茶素的合成，這取決于其底物，底物是C類型或EC類型無色花青素，則生成對應C類型或EC類型兒茶素。ANR可催化花青素生成EC類型無色花青素或EC類型兒茶素中間體，接著由LAR催化其生成EC。當茶樹CsANRa在煙草中過表達時，一類兒茶素的中間體（兒茶素碳正離子）含量顯著上升，兒茶素碳正離子在植物體內極不穩定，可以與EC類型無色花青素相互動態轉化，茶樹ANR可催化無色花青素生成EC類型無色花青素或EC類型兒茶素中間體，接著又由LAR催化形成EC[20-21]。

與合成通路相比，關于類黃酮物質在植物體內的運輸研究相對較少。類黃酮主要在細胞質的不同位點上合成（如內質網），再轉移到液泡等位置儲存，運輸系統中涉及MATE轉運蛋白，谷胱甘肽?；D移酶（Glutathione S-transferases，GST）等，茶樹CsGSTs對花青素有很強的親和力，并能參與花青素、黃酮醇的調控，在類黃酮物質的轉運與積累中發揮重要作用[22]。

2" 環境因子對茶樹類黃酮化合物合成的影響

2.1" 光

光作為生長發育的能量來源以及調控信號因子，對植物有著重要的意義，光照和光質對大多數植物類黃酮化合物的合成都存在影響[21]。

2.1.1" 光照

光照強度的降低不利于兒茶素的積累，遮陰處理會導致茶樹總兒茶素、EC、EGC、表兒茶素沒食子酸酯（ECG）、表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）的含量下降[23-26]，并且光照強度降低對非酯型兒茶素的影響大于酯型兒茶素[25，27]。C、GC、兒茶素沒食子酸酯（CG）、沒食子兒茶素沒食子酸酯（GCG）含量在總兒茶素中占比較低，遮陰條件下這幾種物質的研究結果存在較多差異[23-24，26]。

遮陰處理會降低黃酮醇的糖基化，顯著抑制黃酮醇苷的積累[25，28]，遮陰不僅使茶葉大部分黃酮醇及其苷類物質含量顯著降低[29]，同時還改變了不同母核糖苷的比例，槲皮素糖苷比例顯著降低，但山奈酚糖苷比例增加。另外，從糖基的數目來看，黑網遮陰處理可提高黃酮醇三糖苷的占比[26]。

田間茶樹經遮陰處理后，矢車菊色素、飛燕草色素、花青素-3-O-葡萄糖苷含量均下降[29]，長光照條件則能夠促進茶葉中花青素的積累[30]。

2.1.2" 光質

對于茶樹芽葉，兒茶素對光質的響應隨茶樹品種和生長發育期的不同而變化，龍井43一芽一葉藍膜覆蓋處理兒茶素含量高于白膜覆蓋處理，中茶108則剛好相反，藍光照射處理兒茶素含量低于白光照射，但兩個品種的一芽三葉兒茶素含量均是白光組大于藍光組[27，31]。

對植物而言，一般短波段光（如藍光）可促進黃酮類化合物的積累，而長波段的光（如紅光）會抑制黃酮類化合物的積累。黃酮醇苷對于光照條件的敏感性更高，藍色網覆蓋下的茶葉總黃酮醇苷含量顯著高于黃色和紅色網覆蓋[26]。

光質對花青素的合成有重要的影響，單獨使用藍光或紅光都不能夠支持茶樹的正常生長發育，藍光和綠光能夠促進花青素在茶樹中的積累；其次，光質對花青素的影響并非孤立的，而是與生態環境整體相互聯系[32-33]。

2.1.3" "紫外線

紫外線輻射對防御相關次生代謝產物的生物合成有顯著影響，關于光質對類黃酮化合物的影響中，紫外線是最常見的因素[34-35]，紫外輻射也是影響茶樹芽葉類黃酮化合物積累的關鍵因子之一[36]，高山地區的藍紫色花分布較多可能就是由于紫外輻射強度大。

紫外線輻射根據波長可分：UV-A（315～400 nm）、UV-B（280～315 nm）、UV-C（200～280 nm），UV-C穿透力弱幾乎完全被臭氧層吸收，UV-A和UV-B穿透力強，可穿透臭氧層到平流層，其中針對UV-B研究的試驗較多。類黃酮化合物作為紫外線輻射的保護劑[37]，可通過吸收或消除自由基避免活性氧的積累來降低UV-B的傷害，也可直接吸收植物體內的UV-B輻射物質來有效抵御紫外輻射[38]。

紫外輻射對茶樹的生長發育、物質代謝以及茶園的生態系統都有一定的影響[39]。紫外線輻射對不同類型兒茶素的影響也有所不同，UV-B照射后茶葉中兒茶素總量、EGCG和EGC含量隨照射時間的延長而增加，并且EGCG和EGC受影響程度更大，但當紫外線輻射強度過高時，兒茶素含量又會因葉片的損傷而降低[27，40]。所以UV-B對茶樹中兒茶素的影響與處理方式有關，低強度、短時間UV-B處理可促進兒茶素的積累，高強度、長時間UV-B處理會抑制兒茶素的積累。

黃酮醇和黃酮能提高植物對紫外輻射的耐受性，適當補充UV-B可增加茶葉中黃酮醇的含量，而UV-B缺失則會降低茶葉中黃酮醇苷的積累[41-42]。

花青素的積累也受到紫外線的誘導，經過UV-A、UV-B和UV-AB處理后，茶葉中的總花青素含量均顯著高于單純白光處理，且不同波長的紫外線照射對葉片中花青素積累的誘導作用不同，UV-A和UV-AB誘導花青素積累的能力強于UV-B[43]。

2.2" 溫度

茶樹是一種喜溫畏寒的植物，溫度過高或過低都不利于茶樹的生長。低溫脅迫下，茶樹中與次生代謝產物合成、運輸和分解相關的基因受到顯著影響，特別是類黃酮生物合成途徑[44]，低溫也可能使活性氧過度產生，導致酶失活和脂質過氧化，為了減少損傷，細胞產生類黃酮作為抗氧化劑來清除過量的活性氧[45]。

生長區域不同的茶樹之間兒茶素含量差異大于品種帶來的差異，其中溫度和氣候對兒茶素的生物合成具有重要影響，并且溫度對兒茶素沒食子?；挠绊懣赡艽笥诠庹諒姸萚29，46]。低溫促進總兒茶素、EGCG、EGC、EC的積累，而高溫加速了葉片的生長，稀釋了次生代謝物如兒茶素的含量[47-48]。但也有一些研究表明，隨著溫度的上升，兒茶素呈現積累的趨勢[36]，低溫脅迫可能對兒茶素和沒食子酸的生物合成造成負面影響[45]。關于溫度對兒茶素的影響，不同學者的結論不同可能與茶樹品種、取材部位、試驗區域的海拔高度等因素有關。在低海拔地區溫度升高可能會增強兒茶素的生物合成，在高海拔地區則無此趨勢[49]。更重要的是，上述研究采用的處理溫度差異較大，因此低溫和高溫之間存在著相對性。

一般認為，較低的溫度有利于植物中黃酮及黃酮醇的積累，茶樹受到低溫脅迫，山奈酚和槲皮素會積累，而當試驗溫度相對較高時，楊梅素和槲皮素含量也較高[29]，黃酮的含量隨溫度的升高呈上升—下降—上升的變化趨勢，在處理的最高溫度組（25 ℃/35 ℃）積累量最高[36]。對于茶樹而言，一定范圍內，溫度的升高有利于黃酮類物質的積累。適當低溫能誘導大部分植物花青素的合成，在一定范圍內隨著溫度的升高，花青苷含量先上升后下降，高溫則會起到抑制作用，但高溫也能促進一些植物花青素的合成[36，50，56]。此外，溫度的升高會導致花青苷合成速率降低，降解速率增加[50]。

2.3" 干旱

一些研究結果表明，干旱脅迫會增加次生代謝產物的濃度，許多次生代謝產物可作為滲透壓阻止水分流失，或作為抗氧化劑降低氧化應激反應[51]。土壤含水量以田間持水量的70%～90%最為適宜茶樹生長[52]，干旱脅迫下，茶樹生長會受到抑制，也伴隨著光合作用減弱、活性氧代謝系統發生變化、內源激素代謝失調等現象[53]。

兒茶素總量與土壤含水量、水分脅迫指數顯著相關，當茶樹遭受干旱脅迫時，兒茶素含量顯著降低[54-56]。其中EGC和EC的變化與土壤水分顯著相關，但EGCG和ECG對土壤水分的變化沒有明顯的反應，不同品種茶樹各類兒茶素及同一品種茶樹不同兒茶素對干旱的響應，與土壤含水量和水分脅迫指數的關系呈現不同的結果[54]。

茶樹遭受不同程度的干旱脅迫時，黃酮類物質和花青苷的變化有所不同：輕度干旱條件下，山奈苷和花青素3-O-蕓香苷含量升高，而花青素3，5-O-二葡萄糖苷和飛燕草素3-O-葡萄糖苷含量下降；重度干旱下，山奈苷、花青素3-O-蕓香苷、花青素3，5-O-二葡萄糖苷和飛燕草素3-O-葡萄糖苷含量均下降[56]。干旱脅迫還能誘導ABA、脯氨酸以及可溶性糖的積累，這在誘導花青苷的生物合成中發揮了重要作用[57]。

3" 環境因子對茶樹類黃酮合成相關結構基因的影響

3.1" 光照

如前所述，大部分研究結果表明，遮陰不利于茶樹類黃酮物質的積累，而化合物的含量又與結構基因的表達量密切相關。

遮陰處理后，茶樹類黃酮合成的上游基因PAL、CHS、F3H、F3'H、ANS、LAR的表達下降，導致兒茶素總量下降[25，58]，DFR1和DFR2基因在C和GC的合成中存在調控作用，又與ANR1、ANR2共同調節EC、ECG及EGC、EGCG的合成，并且ANR1、ANR2在調控作用上互補，這可能就導致了酯型兒茶素（EGCG、ECG）和非酯型兒茶素（EGC、EC）變化趨勢存在差異[59]。

遮陰處理導致黃酮醇苷的生物合成在很大程度上減弱，可能歸因于上游基因PAL、CHS、F3H和F3'H、F3'5'H的下調表達[26]。遮光后茶樹芽葉花青苷代謝途徑中CHS、CHI、F3H、DFR、ANS關鍵酶基因的表達量均降低，這與花青苷的合成量減少相對應，而強光則能同時誘導多個結構基因表達上調，使花青苷的積累量增加，調控花青素合成的相關基因之間表達強度存在一定的協同效應[36]。

3.2" 光質

不同光質處理下，兒茶素合成相關基因的響應也不同，單色光處理下一般只有個別基因的表達會受到顯著的激發或者抑制，比如一芽二葉期時，紅膜處理促進F3'H的表達量增加，紫膜、黃膜和藍膜處理促進F3H和F3'H的表達增加[26]。

光強和光質都能影響花青苷合成酶基因的表達模式，并且光強度的改變還會影響合成酶基因對光質的響應模式。弱光環境下，CHI基因對紅橙光的響應敏感，紅橙光和藍紫光處理能促進茶樹CHI酶和ANR酶活性的升高；在強光環境下，F3H基因對藍紫光的響應敏感，進而F3H酶的活性顯著升高[36]。紫外光可誘導形成乙烯，乙烯可以誘導PAL酶生成和4CL酶蛋白的重新組合，也可誘導CHS酶，從而促進類黃酮物質的積累[33， 60]。類黃酮合成途徑相關基因大多受UV-B誘導，缺乏類黃酮的植物對UV-B脅迫非常敏感，同時植物對UV-B的脅迫響應表現為類黃酮合成相關基因的表達增強[61]。紫外光可通過正調控CHS、CHI、F3H、DFR、ANS的表達，從而調控茶樹芽葉中花青苷的積累，基因表達水平還會隨著紫外光透射比例的下降呈現下調的趨勢[36]。在UV-A處理下，F3H、F3'5'H、DFR和ANS結構基因的表達量上調，LAR和ANR的表達則被抑制，代謝通量也向花青素生物合成轉移[43]。

3.3" 溫度

在許多植物中，低溫通過調節結構基因的表達來促進花青素的積累[62]，茶樹在低溫處理條件下，芽葉中CHS、CHI、F3H、DFR、ANS、ANR顯著上調，花青苷合成關鍵酶基因CHS、ANS、ANR表達趨勢與對應的酶活性變化規律一致，這些結構基因對于茶樹芽葉花青苷的積累起正調控作用，共同作用誘導茶樹芽葉中花青苷的合成[36]，PAL、C4H、4CL、F3'5'H、FLS、UFGT等基因也上調，其中FLS上調最顯著，LAR則被低溫脅迫抑制，推測低溫脅迫可促進茶樹花青素的積累，但對兒茶素和沒食子酸的生物合成產生了負面影響[45]。

3.4" 干旱

嚴重干旱脅迫下，CsPAL、CsC4H、Cs4CL、CsANS上調，CsCHS、CsF3H、CsF3'5'H、CsFLS、CsDFR下調[56]，其中CsPAL、CsC4H、CsDFR在干旱條件下的變化趨勢與Zheng等[45]研究結果一致。而Jeyaramraja等[63]的研究結果略有不同，結果顯示在土壤水分脅迫下，所有茶樹品種中PAL酶的活性均降低，且土壤水分虧缺的增強與PAL酶活性降低之間存在很強的正相關性，較低的PAL酶活性與EGCG和ECG合成顯著相關，EGCG和ECG合成的改變也可能是由于干旱期間葉片溫度升高時其分子重排所致。PAL家族基因的啟動子中分布了與干旱相關順式作用元件，但不同茶樹品種間存在差異，所以可能導致基因對逆境脅迫的響應存在差異 [64]。

4" 環境因子對茶樹類黃酮合成相關轉錄因子的影響

4.1" 茶樹類黃酮合成相關轉錄因子

轉錄因子能夠通過抑制或者激活結構基因的表達來調節類黃酮化合物的合成，在植物細胞中，轉錄因子對生物合成相關基因進行調控發揮了重要作用[65-66]。目前研究表明，參與調節茶樹類黃酮合成的主要轉錄因子是MYB、bHLH和WD40，某些基因的表達可以由這3種轉錄因子單獨調控，也有一些基因的表達需要3種轉錄因子以MBW復合體的形式共同調控[66-67]。茶樹類黃酮的合成也受到其他多種轉錄因子的調控：CsHY5轉錄因子能夠與CsMYB12轉錄因子相互作用，形成復合體并調控關鍵類黃酮合成相關基因[41]；WRKY轉錄因子能夠抑制CsLAR、CsDFR啟動子的活性，從而調控類黃酮的生物合成[68]。

4.1.1" MYB家族

因結構域不同，MYB家族可分類為R2R3-MYB、R1R2R3-MYB和MYB相關蛋白。通過鑒定分析，在茶樹基因組中共找到221個MYB成員，包括155個R2R3-MYB，7個R1R2R3-MYB和59個MYB相關蛋白，其中至少有31個MYB轉錄因子可以參與調節類黃酮生物合成，與C、EC、ECG和EGCG以及合成基因（如：ANS、ANR、LAR、UGT）的表達高度相關[69]。Wang等[70]研究發現了2個R2R3-MYB轉錄因子（CsMYB2、CsMYB26）參與類黃酮生物合成途徑，且CsF3'H的表達水平可能由CsMYB2調節，與CsLAR表達水平呈正相關，與EGC的含量呈負相關。Li等[71]分離了1個茶樹R2R3-MYB轉錄因子（CsMYB4a），能抑制CsC4H、Cs4CL、CsCHS、CsLAR以及CsANR的啟動子活性，在茶樹中的表達模式與兒茶素含量呈負相關。

對紫化品種金茗早的研究結果表明，45條MYB轉錄因子與類黃酮化合物呈高度相關，R2R3-MYB中的鋅指A20、GPI錨定蛋白和F-box/LRR重復蛋白是類黃酮生物合成的關鍵主導因子[72]。研究發現，CsAN1的表達量與紫娟品種花青素的含量呈極顯著相關性，CsPAP1/MYB75/CsAN1組成的復合體在紫化茶品種中特別表達，在調控花青素生物合成中發揮了重要作用，可能是導致紫葉茶品種花青素積累的主要原因[30，73]。

茶樹中許多MYB家族基因的表達模式具有組織器官特異性，花粉中很少檢測到MYB家族基因，與類黃酮合成相關的基因表達量也較低；花瓣中Unigene59930、Unigene52113的表達量較高，說明花瓣中類黃酮合成途徑可能主要受這2個MYB家族基因調控；休眠芽、萌發芽中gi|198400320表達量最高，說明該MYB家族基因可能是調控芽葉類黃酮合成途徑的關鍵基因[74]。

4.1.2" bHLH家族

擬南芥、楊樹、水稻、苔蘚和藻類物種中的638個bHLH可分為32個亞族，其中2、5和24亞族參與調節類黃酮代謝[75]。將茶樹中的49個bHLH與擬南芥bHLH一起進行分類和進化分析，可被分在9個亞族，其中2個第二亞族、5個第二十四亞族bHLH蛋白可能參與調控類黃酮合成途徑[67]。

茶樹中多個bHLH轉錄因子與類黃酮化合物呈高度相關[72]，構建類黃酮合成相關結構基因和調節基因之間的共表達調控網絡，CsbHLH與CsCHI、CsF3'5'H、CsDFR、CsANS和CsANR以及代謝物GC和CG呈負相關。3個CsbHLH在類黃酮生物合成基因調控中發揮了正向作用[76]。

bHLH家族基因在茶樹花花粉中幾乎不表達，在花瓣中的表達量低于休眠芽和萌發芽，Unigene14458、gi|338173762在休眠芽、萌發芽中表達量最高，說明這2個bHLH家族基因可能是芽葉中調控類黃酮合成途徑的關鍵基因[74]。

4.1.3" WD40家族

Sun等[30]、Zhao等[67]各自都找到了與擬南芥TTG1同源的CsWD40基因，推測其可能參與調控類黃酮的合成。Liu等[77]研究發現CsWD40與bHLH轉錄因子（CsGL3、CsTT8）和MYB轉錄因子（CsAN2、CsMYB5e）之間能夠體外互作，且CsWD40轉基因煙草中轉錄因子基因NtAN2、NtAN1b和結構基因NtCHS、NtF3'H、NtDFR、NtANS均顯著上調，花青素含量也顯著上升。

4.2" 環境因子對茶樹類黃酮合成相關轉錄因子的影響

4.2.1" 光照

光被證明可以誘導植物中R2R3-MYB轉錄因子的表達[78]，從茶樹DNA中分離得到CsMYB與EGCG合成密切相關，其5'側翼序列proMYB含有對光、厭氧脅迫、冷害、熱激脅迫和水分變化的響應元件，說明環境變化可以誘導茶樹CsMYB基因的轉錄活性發生變化[79]。經長光照處理，茶樹中CsAN1和CsTTG1（MYB家族），CsGL3和CsEGL3（bHLH家族）可被誘導表達，并且CsAN1以及與花青素合成相關基因的表達量顯著上調，茶樹花青素的積累也明顯增多[30]。

UV-A抑制了負調節性MYB4的表達，bHLH3被UV-B和UV-AB輻射上調，MYB110被UV-B下調[43]。基因共表達聚類分析表明，一些參與UV-B信號傳導的光感受器和潛在基因的表達模式與結構基因和潛在轉錄因子（MYB4、MYB12、MYB14和MYB111）一致[58]。CHS基因啟動子不僅含有光響應元件，還存在 MYB的特異性識別位點，UV輻射可誘導MYB基因的表達，進而調節花色苷生物合成相關基因的表達[80]。

4.2.2" 溫度

植物基因受低溫脅迫調節，會啟動從低溫信號感知到低溫脅迫響應基因表達的信號轉導通路，脅迫響應基因的表達時間又由啟動子中的順式作用元件和轉錄因子組合調節[81]。研究茶樹冷馴化過程中的全基因表達譜，共鑒定出1 770個差異表達轉錄本（1 168個上調，602個下調），還包含冷傳感器、冷誘導轉錄因子基因等[82]。而在高溫脅迫下，MYB家族轉錄因子表達幾乎均為下調[83]。

對茶樹而言，溫度可能是激活和調節轉錄因子表達的主要環境因素，在MYB和bHLH的啟動子中發現多個低溫響應元素，CsAN1、CsTTG1、CsGL3和CsEGL3都受到低溫誘導[30]，CsbHLH和CsMYB上調CsUGT的表達，來提高柚皮素-3-O-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-半乳糖苷以及山奈酚-3-O-（6''-O-香豆酰）-葡萄糖苷的含量，而CsbHLH很可能通過誘導特定的CsCHI、CsF3'5'H、CsDFR、CsANS和CsLAR的表達來加速CG和GC的積累[76]。低溫條件下，煙草中過表達茶樹CsMYB5e基因使NtANS顯著上調，花青素積累[84]。

4.2.3" 干旱

對干旱脅迫下的茶樹進行分析，DAS等[85]共鑒定出123個可能的干旱響應基因，他們推斷轉錄因子是抵御茶樹干旱脅迫的主要因素。多個MYB家族轉錄因子基因參與了茶樹對干旱脅迫的響應過程，大量為上調表達，主要起正調控作用，耐性茶樹品種對干旱脅迫敏感，也可能是因為MYB轉錄因子增強了對干旱脅迫的信號轉導和基因調控[83，86]。

5" 結語

綜上所述，光強、光質、溫度、干旱都會對茶樹類黃酮合成結構基因、轉錄因子產生影響，進而調控類黃酮化合物的合成。光照強度降低，類黃酮合成的上游結構基因表達下降，總兒茶素、黃酮醇及其苷類物質含量也下降，并且非酯型兒茶素受到的影響大于酯型兒茶素，同時茶樹中一些MYB家族和bHLH家族基因受到長光照誘導，遮陰處理花青苷代謝途徑中的關鍵酶基因的表達也降低，導致花青苷含量下降；紫外輻射可誘導MYB基因的表達，進而調節相關結構基因的表達，從而誘導兒茶素、黃酮醇苷、花青素的積累，茶樹中兒茶素對UV-B的響應又與處理方式有關，低強度、短時間UV-B處理可促進積累，高強度、長時間UV-B處理則起到抑制作用。溫度也是調節茶樹轉錄因子表達的重要環境因子，茶樹中的MYB和bHLH基因可受到低溫誘導，上調結構基因的表達，從而提高兒茶素、黃酮醇苷和花青素的含量。多個MYB家族轉錄因子參與了茶樹對干旱脅迫的響應，茶樹遭受干旱脅迫，兒茶素含量顯著降低，但類黃酮化合物對于干旱脅迫的響應，因不同茶樹品種、干旱脅迫的嚴重程度存在較大差異。

目前，各類環境因子對茶樹類黃酮合成相關結構基因的影響、多種因素協同調控類黃酮合成等的研究較少，轉錄因子基因與結構基因的關聯性，結構基因的表達與不同類黃酮化合物含量之間的關聯性也尚未十分明確。

研究不同因素單獨（或協同）對茶樹類黃酮合成的影響機制，則可根據生產和研究需求，給予茶樹最適的生長條件，從資源化角度開展功能性茶樹的栽培和利用，定向調控某些類黃酮化合物的合成。

參考文獻

[1] 夏濤， 高麗萍. 類黃酮及茶兒茶素生物合成途徑及其調控研究進展[J]. 中國農業科學， 2009， 42（8）： 2899-2908.

[2] 宛曉春. 茶葉生物化學[M]. 北京： 中國農業出版社， 2003： 9.

[3] 譚和平， 鄒燕， 葉善蓉， 等. 茶葉中的多酚類物質及其分析方法綜述[J]. 中國測試技術， 2008， 34（4）： 4-11.

[4] 劉仲華. 黑茶化學物質組學與降脂減肥作用機理研究[D]. 北京： 清華大學， 2014.

[5] WESTERTERP-PLANTENGA M S. Green tea catechins， caffeine and body-weight regulation[J]. Physiology amp; Behavior， 2010， 100（1）： 42-46.

[6] ALMAJANO M P， CARBó R， JIMéNEZ J A L， et al. Antioxidant and antimicrobial activities of tea infusions[J]. Food Chemistry， 2008， 108（1）： 55-63.

[7] CRESPY V， WILLIAMSON G. A review of the health effects of green tea catechins in in vivo animal models[J]. The Journal of Nutrition， 2004， 134（12 Suppl）： 3431-3440.

[8] WILLIAMS R J， SPENCER J P E. Flavonoids， cognition， and dementia： Actions， mechanisms， and potential therapeutic utility for Alzheimer disease[J]. Free Radical Biology and Medicine， 2012， 52（1）： 35-45.

[9] ZHANG Q， HU L， CHEN L， et al. （-）-Epigallocatechin-3-gallate， the major green tea catechin， regulates the desensitization of β1 adrenoceptor via GRK2 in experimental heart failure[J]. Inflammopharmacology， 2018， 26（4）： 1081-1092.

[10] YAP S W， QIN C X， OWEN L W. Effects of resveratrol and flavonols on cardiovascular function： Physiological mechanisms[J]. BioFactors， 2010， 36（5）： 350-359.

[11] MOSAWY S， JACKSON D E， WOODMAN O L， et al. The flavonols quercetin and 3′，4′-dihydroxyflavonol reduce platelet function and delay thrombus formation in a model of type 1 diabetes[J]. Diabetes and Vascular Disease Research， 2014， 11（3）： 174-181.

[12] ABDEL N B S， YOUSSEF D T A， NOAMAN E， et al. Hepatoprotective effect of flavonol glycosides rich fraction from egyptian Vicia calcarata desf. against CCl4-induced liver damage in rats[J]. Archives of Pharmacal Research， 2005， 28（7）： 791-798.

[13] WANG H， CAO G， PRIOR R L. Oxygen radical absorbing capacity of anthocyanins[J]. American Chemical Society， 1997， 45（2）： 304-309.

[14] KANG S Y， SEERAM N P， NAIR M G， et al. Tart cherry anthocyanins inhibit tumor development in Apc（Min） mice and reduce proliferation of human colon cancer cells[J]. Cancer Letters， 2003， 194（1）： 13-19.

[15] JANG H H， KIM H W， KIM S Y， et al. In vitro and in vivo hypoglycemic effects of cyanidin 3-caffeoyl-p-hydroxybenzoylsophoroside-5-glucoside， an anthocyanin isolated from purple-fleshed sweet potato[J]. Food Chemistry， 2019， 272： 688-693.

[16] CHEN J， ZHAO Y， TAO X Y， et al. Protective effect of blueberry anthocyanins in a CCl4-induced liver cell model[J]. LWT-Food Science amp; Technology， 2015， 60（2）： 1105-1112.

[17] 曹冰冰， 王秋霜， 秦丹丹， 等. 紅紫芽茶花青素合成關鍵酶活性與重要酚類物質相關性研究[J]. 茶葉科學， 2020， 40（6）： 724-738.

[18] YE J H， YE Y， YIN J F， et al. Bitterness and astringency of tea leaves and products： Formation mechanism and reducing strategies[J]. Trends in Food Science amp; Technology， 2022， 123： 130-143.

[19] 夏濤， 高麗萍， 劉亞軍， 等. 茶樹酯型兒茶素生物合成及水解途徑研究進展[J]. 中國農業科學， 2013， 46（11）： 2307-2320.

[20] 劉亞軍， 王培強， 蔣曉嵐， 等. 茶樹單體和聚合態兒茶素生物合成的研究進展[J]. 茶葉科學， 2022， 42（1）： 1-17.

[21] JUN J H， LU N， DOCAMPO-PALACIOS M， et al. Dual activity of anthocyanidin reductase supports the dominant plant proanthocyanidin extension unit pathway[J/OL]. Science Advances， 2021， 7（20）： eabg4682. https：//doi.org/10.1126/sciadv.abg4682.

[22] 江涵. 與茶樹中類黃酮化合物轉運相關的谷胱甘肽巰基轉移酶（GSTs）基因的功能驗證[D]. 合肥： 安徽農業大學， 2018.

[23] HONG G J， WANG J， ZHANG Y， et al. Biosynthesis of catechin components is differentially regulated in dark-treated tea （Camellia sinensis L.）[J]. Plant Physiology and Biochemistry， 2014， 78： 49-52.

[24] WEI K， WANG L Y， ZHANG C C， et al. Transcriptome analysis reveals key flavonoid 3'-hydroxylase and flavonoid 3'，5'-hydroxylase genes in affecting the ratio of dihydroxylated to trihydroxylatedcatechins in Camellia sinensis[J/OL]. PloS One， 2015， 10（9）： e0137925. https：//doi.org/10.1371/journal.pone.0137925.

[25] WANG Y S， GAO L P， SHAN Y， et al. Influence of shade on flavonoid biosynthesis in tea （Camellia sinensis （L.） O. Kuntze）[J]. Scientia Horticulturae， 2012， 141： 7-16.

[26] YE J H， LV Y Q， LIU S R， et al. Effects of light intensity and spectral composition on the transcriptome profiles of leaves in shade grown tea plants （Camellia sinensis L.） and regulatory network of flavonoid biosynthesis[J/OL]. Molecules， 2021， 26（19）： 5836. https：//doi.org/10.3390/molecules26195836.

[27] 李麗田. 光對茶樹兒茶素合成的影響[D]. 北京： 中國農業科學院， 2015.

[28] WANG Y S， GAO L P， WANG Z R， et al. Light-induced expression of genes involved in phenylpropanoid biosynthetic pathways in callus of tea （Camellia sinensis （L.） O. Kuntze）[J]. Scientia Horticulturae， 2011， 133： 72-83.

[29] ZHANG Q F， SHI Y Z， MA L F， et al. Metabolomic analysis using ultra-performance liquid chromatography-quadrupole-time of flight mass spectrometry （UPLC-Q-TOF MS） uncovers the effects of light intensity and temperature under shading treatments on the metabolites in tea[J/OL]. PloS One， 2014， 9（11）： e112572. https：//doi.org/10.1371/journal.pone.0112572.

[30] SUN B M， ZHU Z S， CAO P R， Purple foliage coloration in tea （Camellia sinensis L.） arises from activation of the R2R3-MYB transcription factor CsAN1[J/OL]. Scientific Reports， 2016， 6： 32534. https：//doi.org/10.1038/srep32534.

[31] 郝亞利. 基于代謝譜分析的不同光質處理對茶鮮葉品質形成的影響研究[D]. 合肥： 安徽農業大學， 2010.

[32] ZHANG X Y， WANG J Z， ZHENG J N， et al. Design of artificial climate chamber for screening tea seedlings optimal light formulations[J/OL]. Computers and Electronics in Agriculture， 2020， 174： 105451. https：//doi.org/10.1016/j.compag.2020.105451.

[33] 張澤岑， 王能彬. 光質對茶樹花青素含量的影響[J]. 四川農業大學學報， 2002（4）： 337-339.

[34] GERM M， SSPAHI? I， GABER??IK A. Morphological， biochemical and physiological responses of Indian cress （Tropaeolum majus） to elevated UV-B radiation[J]. Periodicum Biologorum， 2015， 117（3）： 357-364.

[35] FU B， JI X M， ZHAO M Q， et al. The influence of light quality on the accumulation of flavonoids in tobacco （Nicotiana tabacum L.） leaves[J]. Journal of Photochemistry and Photobiology B： Biology， 2016， 162： 544-549.

[36] 李智. 不同環境因子調控茶樹紫色芽葉形成的分子機制研究[D]. 泰安： 山東農業大學， 2014.

[37] WINKEL S. Flavonoid biosynthesis. A colorful model for genetics， biochemistry， cell biology， and biotechnology[J]. Plant Physiology， 2001， 126（2）： 485-493.

[38] 劉一諾， 敖曼， 李波， 等. UV-B輻射對植物生長發育的影響及其應用價值[J]. 土壤與作物， 2020， 9（2）： 191-202.

[39] 范方媛. 紫外輻射對茶樹生理代謝的影響及防控策略[J]. 中國茶葉， 2020， 42（6）： 1-4.

[40] 吳穎. 茶樹主要品質性狀關鍵基因的反義基因遺傳轉化及表達研究[D]. 杭州： 浙江大學， 2005.

[41] LIN N， LIU X Y， ZHU W F， et al. Ambient ultraviolet b signal modulates tea flavor characteristics via shifting a metabolic flux in flavonoid biosynthesis[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry， 2021， 69（11）： 3401-3414.

[42] ZHAO X C， ZENG X S， LIN N， et al. CsbZIP1-CsMYB12 mediates the production of bitter-tasting flavonols in tea plants （Camellia sinensis） through a coordinated activator-repressor network[J/OL]. Horticulture Research， 2021， 8（1）： 110. https：//doi.org/10.1038/s41438-021-00545-8.

[43] LI W， TAN L， ZOU Y， et al. The effects of ultraviolet A/B treatments on anthocyanin accumulation and gene expression in dark-purple tea cultivar 'Ziyan' （Camellia sinensis） [J/OL]. Molecules， 2020， 25（2）： 354. https：//doi.org/10.3390/molecules25020354.

[44] HAN W Y， LI X， AHAMMED G J. Stress physiology of tea in the face of climate change[M]. Singapore： Springer， 2018： 54.

[45] ZHENG C， WANG Y， DING Z T， et al. Global transcriptional analysis reveals the complex relationship between tea quality， leaf senescence and the responses to cold-drought combined stress in Camellia sinensis[J/OL]. Frontiers in Plant Science， 2016， 7： 1858. https：//doi.org/10.3389/fpls.2016.01858.

[46] WEI K， WANG L Y， ZHOU J， et al. Catechin contents in tea （Camellia sinensis） as affected by cultivar and environment and their relation to chlorophyll contents[J]. Food Chemistry， 2011， 125（1）： 44-48.

[47] DING C Q， LEI L， YAO L N， et al. The involvements of calcium-dependent protein kinases and catechins in tea plant [Camellia sinensis （L.） O. Kuntze] cold responses[J]. Plant Physiology and Biochemistry， 2019， 143： 190-202.

[48] CHENG H， WEI K， WANG L Y. The impact of variety， environment and agricultural practices on catechins and caffeine in plucked tea leaves[J]. Processing amp; Impact on Active Components in Food， 2015， 597-603.

[49] HAN W Y， HUANG J G， LI X， et al. Altitudinal effects on the quality of green tea in east China： A climate change perspective[J]. European Food Research and Technology， 2017， 243（2）： 323-330.

[50] 胡可， 韓科廳， 戴思蘭. 環境因子調控植物花青素苷合成及呈色的機理[J]. 植物學報， 2010， 45（3）： 307-317.

[51] SCOTT E R， LI X， KFOURY N， et al. Interactive effects of drought severity and simulated herbivory on tea （Camellia sinensis） volatile and non-volatile metabolites[J]. Environmental and Experimental Botany， 2019， 157： 283-292.

[52] 伍炳華， 韓文炎， 姚國坤. 茶樹對土壤干旱的生理反應[J]. 中國茶葉， 1991， 13（6）： 2-3.

[53] 林鄭和， 張方舟. 茶樹逆境生理研究進展[J]. 茶葉科學技術， 2008（4）： 1-5.

[54] CHERUIYOT E K， MUMERA L M， NG’ETICH W K， et al. Shoot epicatechin and epigallocatechin contents respond to water stress in tea [Camellia sinensis （L.） O. Kuntze][J]. Bioscience Biotechnology and Biochemistry， 2008， 72（5）： 1219-1226.

[55] 劉聲傳， 陳亮. 茶樹耐旱機理及抗旱節水研究進展[J]. 茶葉科學， 2014， 34（2）： 111-121.

[56] GAI Z S， WANG Y， DING Y Q， et al. Exogenous abscisic acid induces the lipid and flavonoid metabolism of tea plants under drought stress[J/OL]. Scientific Reports， 2020， 10（1）： 12275. https：//doi.org/10.1038/s41598-020-69080-1.

[57] AN J P， ZHANG X W， BI S Q， et al. The ERF transcription factor MdERF38 promotes drought stress-induced anthocyanin biosynthesis in apple[J]. The Plant Journal， 2020， 101（3）： 573-589.

[58] LIU L L， LI Y Y， SHE G B， et al. Metabolite profiling and transcriptomic analyses reveal an essential role of UVR8-mediated signal transduction pathway in regulating flavonoid biosynthesis in tea plants （Camellia sinensis） in response to shading[J/OL]. BMC Plant Biology， 2018， 18（1）： 233. https：//doi.org/10.1186/s12870-018-1440-0.

[59] 顧辰辰， 王榮秀， 江麗娜， 等. 短期遮陰對茶樹嘌呤堿、氨基酸和兒茶素生物合成的影響[J]. 安徽農業大學學報， 2017， 44（1）： 1-6.

[60] ZHANG W J， BJ?RN L O. The effect of ultraviolet radiation on the accumulation of medicinal compounds in plants[J]. Fitoterapia， 2009， 80（4）： 207-218.

[61] SCHENKE D， UTAMI H P， ZHOU Z， et al. Suppression of UV-B stress induced flavonoids by biotic stress： Is there reciprocal crosstalk？[J]. Plant Physiology and Biochemistry， 2019， 134（SI）： 53-63.

[62] MORI K， GOTO-YAMAMOTO N， KITAYAMA M， et al. Loss of anthocyanins in red-wine grape under high temperature[J]. Journal of Experimental Botany， 2007， 58（8）： 1935-1945.

[63] JEYARAMRAJA P R， PIUS P K， KUMAR R R， et al. Soil moisture stress-induced alterations in bioconstituents determining tea quality[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture， 2003， 83（12）： 1187-1191.

[64] 熊飛， 盧秦華， 房婉萍， 等. 基于全基因組的茶樹PAL家族基因鑒定及其在生物與非生物脅迫下的表達分析[J]. 園藝學報， 2020， 47（3）： 517-528.

[65] 喬小燕， 馬春雷， 陳亮. 植物類黃酮生物合成途徑及重要基因的調控[J]. 天然產物研究與開發， 2009， 21（2）： 354-360.

[66] 賈趙東， 馬佩勇， 邊小峰， 等. 植物花青素合成代謝途徑及其分子調控[J]. 西北植物學報， 2014， 34（7）： 1496-1506.

[67] ZHAO L， GAO L， WANG H， et al. The R2R3-MYB， bHLH， WD40， and related transcription factors in flavonoid biosynthesis[J]. Functional amp; Integrative Genomics， 2013， 13（1）： 75-98.

[68] 羅勇. WRKY轉錄因子調控茶樹甲基化EGCG生物合成的機制研究[D]. 長沙： 湖南農業大學， 2019.

[69] LI P H， XIA E H， FU J M， et al. Diverse roles of MYB transcription factors in regulating secondary metabolite biosynthesis， shoot development， andstress responses in tea plants （Camellia sinensis）[J]. The Plant Journal， 2022， 110（4）： 1144-1165.

[70] WANG W L， WANG X Y， LI H， et al. Two MYB transcription factors （CsMYB2 and CsMYB26） are involved in flavonoid biosynthesis in tea plant [Camellia sinensis （L.） O. Kuntze][J/OL]. BMC Plant Biology， 2018， 18（1）： 288. https：//doi.org/10.1186/s12870-018-1502-3.

[71] LI M Z， LI Y Z， GUO L L， et al. Functional characterization of tea （Camellia sinensis） MYB4a transcription factor using an integrative approach[J/OL]. Frontiers in Plant Science， 2017， 8： 943. https：//doi.org/10.3389/fpls.2017.00943.

[72] CHEN X J， WANG P J， ZHENG Y C， et al. Comparison of metabolome and transcriptome of flavonoid biosynthesis pathway in a purple-leaf tea Germplasm Jinmingzao and a green-leaf tea germplasm Huangdan reveals their relationship with genetic mechanisms of color formation[J/OL]. International Journal of Molecular Sciences， 2020， 21（11）： 4167. https：//doi.org/10.3390/ijms21114167.

[73] WEI K， WANG L Y， ZHANG Y S. et al. A coupledrole for CsMYB75 and CsGSTF1 in anthocyanin hyperaccumulation inpurple tea[J]. The Plant Journal， 2019， 97（5）： 825-840.

[74] 韋康， 王麗鴛， 成浩， 等. 基于數字表達譜對茶樹類黃酮合成、調控相關基因表達的研究[J]. 茶葉科學， 2014， 34（2）： 195-203.

[75] CARRETERO-PAULET L， GALSTYAN A， ROIG-VILLANOVA I， et al. Genome-wide classification and evolutionary analysis of the bHLH family of transcription factors in arabidopsis， poplar， rice， moss， and algae[J]. Plant Physiology， 2010， 153（3）： 1398-1412.

[76] ZHU J Y， XU Q S， ZHAO S Q， et al. Comprehensive co-expression analysis provides novel insights into temporal variation of flavonoids in fresh leaves of the tea plant （Camellia sinensis）[J/OL]. Plant Science， 2020， 290. https：//doi.org/10.1016/j.plantsci.2019.110306.

[77] LIU Y J， HOU H， JIANG X L， et al. A WD40 repeat protein from Camellia sinensis regulates anthocyanin and proanthocyanidin accumulation through the formation of MYB-bHLH-WD40 ternary complexes[J/OL]. International Journal of Molecular Sciences， 2018， 19（6）： 1686. https：//doi.org/10.3390/ijms19061686.

[78] ZORATTII L， KARPPINEN K， ESCOBAR A L， et al. Light-controlled flavonoid biosynthesis in fruits[J/OL]. Frontiers in Plant Science， 2014， 5： 534. https：//doi.org/10.3389/fpls.2014.00534.

[79] 鄭世仲， 江勝滔， 劉偉， 等. 茶樹CsMYB基因啟動子的克隆與功能分析[J]. 茶葉科學， 2018， 38（6）： 580-588.

[80] 李雪， 潘學軍， 張文娥. UV輻射對植物多酚代謝的影響[J]. 山地農業生物學報， 2016， 35（6）： 54-60.

[81] YAMAGUCHI-SHINOZAKI K， SHINOZAKI K. Transcriptional regulatory networks in cellular responses and tolerance to dehydration and cold stresses[J]. Annual Review of Plant Biology， 2006， 57： 781-803.

[82] 林海燕， 曾超珍， 譚斌， 等. 轉錄組學技術在茶樹抗逆性的研究進展[J]. 分子植物育種， 2019， 17（3）： 803-810.

[83] 王偉東. 高溫和干旱脅迫下茶樹轉錄組分析及Histone H1基因的功能鑒定[D]. 南京： 南京農業大學， 2016.

[84] 龐丹丹， 張芬， 張亞真， 等. 茶葉花青素合成、調控及功能的研究進展[J]. 茶葉科學， 2018， 38（6）： 606-614.

[85] DAS A， DAS S， MONDAL T K. Identification of differentially expressed gene profiles in young roots of tea [Camellia sinensis （L.） O. Kuntze] subjected to drought stress using suppression subtractive hybridization[J]. Plant Molecular Biology Reporter， 2012， 30（5）： 1088-1101.

[86] GUPTA S， BHARALEE R， BHORALI P， et al. Molecular analysis of drought tolerance in tea by cDNA-AFLP based transcript profiling[J]. Molecular Biotechnology， 2013， 53（3）： 237-248.