觸珠蛋白、α1酸性糖蛋白在乙型病毒性肝炎患者中的表達及與進展為肝癌的關系

覃聰 黃巧玲

乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒感染引起的一種肝臟病變,部分患者可慢性化進展成為肝硬化或肝癌。肝癌早期癥狀不典型,多數患者就診時已處于疾病中晚期,錯失最佳治療時機,預后不良風險大大增加[1]。因此,盡早監測乙型病毒性肝炎患者病情進展程度,對降低肝癌發病率具有重要意義。血清學指標取材方便,操作簡單,是監測乙型病毒性肝炎進展程度較為理想的指標。以往,臨床多通過血清甲胎蛋白評估乙型病毒性肝炎患者病情進展情況,但臨床上約有1/3的肝癌患者甲胎蛋白表達正常,故仍需探尋其他更為靈敏的指標來監測乙型病毒性肝炎患者病情進展程度[2]。血清觸珠蛋白是肝臟合成的一種α2球蛋白,當機體處于應激狀態下,血液中觸珠蛋白明顯增多。α1酸性糖蛋白是一種急性時相反應物,也是血清中含糖量較高的物質,其水平變化與腫瘤疾病存在密切關聯。相關研究指出,觸珠蛋白、α1酸性糖蛋白在腎透明細胞癌、結直腸癌等疾病中異常表達,且能夠對上述疾病的發生、發展過程產生一定影響,因此推測觸可能與乙型病毒性肝炎患者進展為肝癌有關[3-5]。本研究將重點探討觸珠蛋白、α1酸性糖蛋白在乙型病毒性肝炎患者中的表達及其與進展為肝癌的關系,報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 采用回顧性研究方法,根據是否進展為肝癌進行分組,將來賓市中醫醫院2021年1月至2022年12月130例治療的65例慢性乙型肝炎患者作為乙型肝炎組,另將醫院同期收治的65例乙型肝炎進展為肝癌患者作為肝癌組。

1.2 納入與排除標準 (1)納入標準：①符合《慢性乙型肝炎基層診療指南(2020年)》[6]和《原發性肝癌診療規范(2017年版)》[7]中診斷標準,且經病理學檢查確診。②認知狀況良好,可配合本研究;③既往未接受過抗腫瘤治療;④臨床資料完整。(2)排除標準：①合并丙型肝炎、酒精性肝炎等其他類型肝炎;②合并其他部位惡性腫瘤;③既往肝臟手術史;④合并類風濕性關節型、系統性紅斑狼瘡等自身免疫性疾病;⑤精神功能障礙。

1.3 方法

1.3.1 觸珠蛋白、α1酸性樣蛋白檢測方法：入組時采集2組患者清晨空腹外周肘靜脈血10 ml,置于離心機內進行離心處理(離心速率2 500 r/min,離心半徑15 cm,離心時間10 min),取上層血清,采用免疫比濁法檢測血清觸珠蛋白和α1酸性樣蛋白水平,試劑盒均購自湖南辰納生物科技有限公司。操作流程嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.3.2 基線資料：查閱2組患者電子病例檔案,采集相關資料：①基線資料：性別、年齡、乙型肝炎病程、肝纖維化或肝硬化、體重指數、合并癥、吸煙飲酒史、營養不良等。其中肝纖維化及肝硬化通過肝臟瞬時彈性硬度檢查進行評估,肝臟瞬時彈性硬度檢查結果可分為以下幾個階段：FOF1期：肝臟硬度值<7.3 kPa,F2期：7.3 kPa≤肝臟硬度值≤9.7 kPa,F2F3期：9.7 kPa≤肝臟硬度值≤12.4 kPa,F3F4期：12.4 kPa≤肝臟硬度值<17.5 kPa,F4期：肝臟硬度值≥17.5 kPa;F0F1期為無肝纖維化,F2、F2F3期為輕中度肝纖維化,F3F4期為重度肝纖維化,F4期為肝硬化。營養不良應用微型營養評估量表(short-form mini nutritional assessment,MNA-SF)[8]進行評估,該量表滿分為14分,<8分即可定義為營養不良。②實驗室資料：主要為患者入組后首次進行實驗室檢查時測得的血常規指標(白細胞計數、紅細胞計數、中性粒細胞計數、血紅蛋白)、凝血功能指標[凝血酶原時間(prothrombin time,PT)、凝血酶時間(thrombin time,TT)、活化部分凝血活酶時間(activated partial thromboplastin time,APTT)、纖維蛋白原]、肝功能指標(丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基轉移酶、直接膽紅素、間接膽紅素)、腎功能指標(尿素氮、肌酐)、白蛋白、甲胎蛋白、HBV-DNA載量、乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen,HBsAg)。資料血常規指標通過血細胞分析儀(邁瑞醫療器械有限公司,型號：BC5390)檢測,凝血功能指標采用凝血分析儀(日本希森美康株式會社,型號：CS-5100)檢測,肝腎功能指標、白蛋白、甲胎蛋白采用全自動生化分析儀(日立分析儀器(上海)有限公司,型號：7600-020)檢測,HBV-DNA載量采用熒光探針法檢測(試劑盒購自湖南圣湘生物科技有限公司),HBsAg采用化學發光法檢測(試劑盒購自科美博陽診斷技術有限公司)。

2 結果

2.1 基線資料及實驗室資料比較 肝癌組肝纖維化或肝硬化占比高于乙型肝炎組,HBsAg陽性占比低于乙型肝炎組,(P<0.05);肝癌組甲胎蛋白、觸珠蛋白、α1酸性糖蛋白水平高于乙型肝炎組,丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基轉移酶、HBV-DNA載量低于乙型肝炎組(P<0.05);組間其他基線資料及實驗室指標對比,差異無統計學意義(P>0.05)。見表1、2。

表1 2組一般資料比較 n=65

表2 2組實驗室資料比較 n=65,

2.2 觸珠蛋白、α1酸性糖蛋白與乙型肝炎進展為肝癌的相關性 經Point-biserial相關性檢驗,結果顯示,觸珠蛋白、α1酸性糖蛋白與乙型病毒性肝炎進展為肝癌呈正相關(r>0,P<0.05)。見表3。

表3 觸珠蛋白、α1酸性糖蛋白與乙型肝炎進展為肝癌的相關性

2.3 觸珠蛋白、α1酸性糖蛋白對乙型肝炎進展為肝癌的影響 以乙型肝炎患者是否進展為肝癌作為因變量(肝癌賦值為“1”,乙型肝炎賦值為“0”),以觸珠蛋白、α1酸性糖蛋白作為自變量,進行Logistic回歸分析,結果顯示,觸珠蛋白、α1酸性糖蛋白水平升高是乙型病毒性肝炎進展為肝癌的危險因素(OR>1,P<0.05)。見表4。

表4 觸珠蛋白、α1酸性糖蛋白對乙型肝炎進展為肝癌的影響

3 討論

中國是乙型病毒性肝炎的高發國家,目前乙肝患者數已高達9 000萬,其中約2 000萬患者存在活動性肝炎,導致肝癌發病率居高不下[9]。因此,監測乙型病毒性肝炎進展程度,可能對降低肝癌發病率、改善患者預后有益。研究發現,氧化應激反應可損傷肝臟組織,促進肝癌的發生,炎性反應可導致乙型病毒性肝炎患者病情持續惡化,最終誘發肝癌[10,11]。觸珠蛋白是肝臟中的關鍵血液蛋白,當人體出現感染、創傷、炎癥、氧化應激等情況時可急劇升高。血清α1酸性糖蛋白是肝臟分泌的一種蛋白質,在急性炎癥期可快速升高,影響機體免疫防御功能。由此推測二者可能與乙型病毒性肝炎患者進展為肝癌有關。

本研究結果顯示,肝癌組血清觸珠蛋白、α1酸性糖蛋白水平明顯高于乙型肝炎組,進一步分析發現血清觸珠蛋白、α1酸性糖蛋白與乙型病毒性肝炎患者進展為肝硬化有關,且觸珠蛋白、α1酸性糖蛋白水平升高是導致乙型病毒性肝炎進展為肝癌的危險因素。觸珠蛋白可與血漿中的游離鐵蛋白結合,形成觸珠蛋白-血紅蛋白復合物,之后被網狀內皮系統所清除。觸珠蛋白水平升高可形成大量觸珠蛋白-血紅蛋白復合物,引起網狀內皮過度增生,從而誘發肝硬化及肝纖維化,最終演變成為肝癌[12]。且觸珠蛋白水平升高還可誘發氧化應激反應,對肝細胞造成直接損傷,進一步增加乙型病毒性肝炎進展為肝癌的可能性[13]。此外,觸珠蛋白可刺激血管內皮細胞分化和生長,誘導腫瘤血管生成,為腫瘤的生長、浸潤提供有利條件[14]。α1酸性糖蛋白水平升高往往提示機體存在不同程度的炎癥反應,可導致肝細胞大量受損、肝功能大幅下降,從而對肝癌的發生、發展過程產生影響。同時,持續性的炎癥反應還可誘導腫瘤血管生成,使基質成分重構并形成腫瘤特異性微環境,促進肝癌的發生與發展[15]。郭鴻雁等[16]報道,檢測α1酸性糖蛋白對HBV相關肝病的病情評估、發展及預后均具有重要的判斷價值。這也是本研究進一步開展的前提,本研究在此基礎上進一步證實了α1酸性糖蛋白水平升高可對乙型病毒性肝炎進展為肝癌產生影響。王利公等[17]分析血清α1酸性糖蛋白、觸珠蛋白變化在慢性乙型肝炎中的臨床意義,結果顯示,上述指標對肝纖維化具有較高的診斷價值,而肝纖維化正是乙型病毒性肝炎向肝癌進展的重要病理基礎。因此,觸珠蛋白、α1酸性糖蛋白與乙型病毒性肝炎進展為肝癌有關。

本研究還發現,2組肝纖維化或肝硬化占比、HBsAg陽性占比、丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基轉移酶、甲胎蛋白、HBV-DNA載量也存在一定差異,推測上述指標也可能與乙型病毒性肝炎進展為肝癌有關。肝纖維化或肝硬化是乙型病毒性肝炎進展為肝癌的關鍵步驟,可導致肝內門靜脈、肝靜脈和肝動脈3個血管間失去正常聯系,出現交通吻合支,引起肝細胞營養代謝障礙,增加肝癌發生風險[18]。丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基轉移酶是反映肝功能的重要指標,HBV-DNA載量與HBsAg陽性可反映HBV病毒復制活躍程度;肝癌患者上述指標降低表明乙型病毒性肝炎發展到肝癌階段,病毒的傳染性、復制能力逐漸下降,肝臟組織已出現不可逆性損傷,因此肝癌組丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基轉移酶、HBV-DNA載量與HBsAg陽性率低于乙型肝炎組[19]。甲胎蛋白是診斷肝癌的特異性指標之一,在肝細胞惡性轉化早期,肝細胞內的甲胎蛋白基因會被激活,在血液中異常升高,因此該指標與乙型病毒性肝炎進展為肝癌有關[20]。

綜上所述,觸珠蛋白、α1酸性糖蛋白在乙型病毒性肝炎進展為肝癌患者中呈高表達,且觸珠蛋白、α1酸性糖蛋白水平升高是乙型病毒性肝炎進展為肝癌的影響因素。