益母草注射液水溶性總生物堿對產后子宮復舊中子宮收縮活動的影響＊

武柳君，代良萍，謝曉芳＊＊，彭 成＊＊

（1.成都中醫藥大學藥學院西南特色中藥資源國家重點實驗室 成都 611137；2.西南醫科大學附屬醫院 瀘州 646000）

產后出血（Postpartum haemorrhage，PPH）是指經陰道分娩胎兒后24 h 內出血量超過500 mL 或者剖宮產胎兒娩出后24 h 內出血量超過1000 mL[1]。PPH 是產科常見危重并發癥，也是全世界范圍內導致孕產婦死亡的首位原因，占比高達27%[1-2]；在我國，這一占比同樣達到了25%[3]。子宮肌層收縮對大血管的機械性緊縮阻塞是防止子宮出血的主要機制[4]。故子宮收縮乏力是引發PPH 的四大原因之首，具有出血量大、發病急、預后差等特點[5]。在大型國際WOMAN’s 實驗中，由子宮收縮乏力造成的PPH占到了63.7%[6]。宮縮藥物是治療PPH 的基石，能夠有效降低PPH 的發生率，WHO 建議所有孕產婦在第三產程期間使用有效的宮縮藥物以預防PPH[7]。在所有宮縮藥物中，縮宮素是預防和治療PPH 的首選藥物，因其副作用最小且效益最高而在世界范圍內受到廣泛的認可和使用。縮宮素類似物卡貝縮宮素以及米索前列醇、麥角新堿等二線藥物因具有更高的潛在風險，通常僅在無法使用縮宮素的情況下建議使用[8]。盡管是目前最為安全有效的宮縮藥物，催產素的使用依然存在許多限制。催產素的血漿半衰期范圍為3-20 min[9]，需要連續小劑量靜脈滴注才能達到持續的宮縮活性。此外，縮宮素還具有受體飽和現象[1]，并可造成母體催產素受體的下調[10]。大劑量或快速推注催產素以及其余潛在因素可能引發諸多不良反應[11]。

益母草（Leonurus japonicusHoutt.）具有活血調經、利尿消腫、清熱解毒功效，用于月經不調、經閉痛經、惡露不盡、水腫尿少、瘡瘍腫痛[12]，《本草綱目》稱之為“血家圣藥”[13]。有關實驗顯示，益母草對子宮平滑肌（Uterine smooth muscle，USM）具有雙向調節作用[14]，其中的生物堿類成分能夠顯著促進子宮收縮[15]，是一種良好的天然宮縮藥物。益母草注射液（Yimucao Injection，YI）是益母草的單方制劑[16]，是用于產后出血和產后子宮復舊的專家推薦用藥。大量臨床研究文獻報道，YI 單獨應用或與其他宮縮藥物聯合應用于PPH，可明顯減少產后出血量，促進產后子宮復舊，縮宮效果持久，且藥物安全性良好[17-22]。相關文獻引用證實，YI 是目前婦產科臨床常用的中藥注射劑，但有關YI的有效物質及其促進子宮復舊的基礎研究不足。水溶性生物堿是益母草發揮藥效的主要物質基礎。而YI由益母草單味藥材經水煎、醇沉、活性炭脫色、精濾等加工制得，除水溶性生物堿外，還含有其他成分及輔料。前期研究表明，YI水溶性生物堿部位是興奮子宮的活性部位，可明顯增強正常大鼠離體子宮收縮活動[23-25]，同時也是發揮止血作用的活性部位[26]。據此，為明確益母草注射液水溶性總生物堿（YITA）與縮宮功效的關系及其促進產后復舊的藥效作用，并為團隊后期對益母草藥材的研究提供參考。故本研究團隊在前期研究基礎上，制備YITA 作為研究對象，采用豚鼠流產模型，觀察YITA 對產后出血量、子宮重量、性激素水平和相關指標的影響；為進一步明確其對子宮收縮活動的影響，采用豚鼠離體和在體USM 模型，觀察對子宮收縮活動力、收縮頻率，收縮強度等的影響，從而系統探討YITA 對產后子宮復舊中子宮收縮活動的影響，通過研究，為YI 的臨床應用和二次開發提供依據。

1 材料

1.1 藥物

益母草注射液（Yimucao Injection，YI），批號：Y140801，由成都第一制藥有限公司提供。為排除非水溶性生物堿部位及輔料的干擾，采用陽離子交換樹脂純化法從益母草注射液中制備益母草注射液水溶性總生物堿，含水蘇堿34.49%、葫蘆巴堿0.14%。因研究對象為水溶性總生物堿部位，故采用去離子水配制相應濃度應用液。

1.2 動物

Hartley豚鼠，雌性，性成熟而未生育，體質量400-450 g；雄性16 只，性成熟，體質量400-450 g，SPF 級，均由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供，動物生產合格證號：SCXK（京）2012-0001。飼養于成都中醫藥大學藥學院實驗動物房，溫度22-28℃，相對濕度50%，通風良好，進食、飲水自由。動物實驗經成都中醫藥大學實驗動物倫理委員會批準（TCM-2016-312）。

1.3 試劑

戊酸雌二醇片（DELPHARM Lille S.A.S，批號：151A）；NaCl（成都市科龍化工試劑公司，批號：20130613）；KC1（成都市科龍化工試劑公司，批號：20120427）；CaCl2（成都市科龍化工試劑公司，批號：20130724）；NaHCO3（成都市科龍化工試劑公司，批號：20130409）；無水葡萄糖（成都市科龍化工試劑公司，批號：20110331），采用去離子水配置洛氏液（1000 mL含NaCl 9.2 g、KC1 0.42 g、CaCl20.24 g、NaHCO30.15 g、葡萄糖1.0 g）；水合氯醛（成都市科龍化工試劑廠，批號：20111123 用生理鹽水配成10%）；氯化鈉注射液（四川科倫藥業股份有限公司，批號：T16090101-2）。米非司酮（華潤紫竹藥業有限公司，批號：43150510 臨用前以蒸餾水溶解配置成懸液3.0 mg·mL-1），米索前列醇片（華潤紫竹藥業有限公司，產品批號：4315041臨用前以蒸餾水溶解配置成懸液0.04 mg·mL-1），豚鼠內皮素1（ET-1）試劑盒（武漢伊萊瑞特有限公司，批號：AK0016JU26001）；Ca 試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號：C004-2）；雌激素/雌二醇（E2）試劑盒（武漢伊萊瑞特有限公司，批號：AK0016AUG19001）；孕激素/孕酮（P）試劑盒（武漢伊萊瑞特有限公司，批號：AK0016AUG26011）；考馬斯亮蛋白試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號：A045-2）；NO 試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號：A012）。

1.4 儀器

電子分析天平（德國sartorius公司，型號：11D）；高效液相色譜儀（Agilent 公司，型號：1260）；十六通道生理記錄系統（澳大利亞Powerlab 公司，型號：P13516）；離體組織灌流系統（澳大利亞Powerlab 公司，型號：ML0186）；生物機能系統（成都泰盟科技有限公司公司，型號：BL-420E）；張力換能器（成都泰盟科技有限公司公司，型號：JH-2）；全波長多功能讀數儀（美國Thermo 公司，型號：VARIOSKAN FLASH 2.4.3）；二氧化碳培養箱（美國Thermo公司，型號：3111）。

2 方法

2.1 豚鼠流產實驗

取處于動情期的豚鼠于每日20∶00 時雌雄按2∶1比例合籠，次日晨觀察陰道栓及進行陰道涂片檢查，以發現陰道栓子或游動精子為受孕成功，記為妊娠第1 天。于第7 天分別按體質量灌胃（i.g.）米非司酮8.3 mg·kg-1（8∶00）和米索前列醇100 μg·kg-1（18∶00），引起不完全流產[27]。將造模成功后豚鼠隨機分為模型對照組（n=8）和YITA 組（n=10）。造模成功后，次日（第8天）模型組分別i.g.10 mL·kg-1的蒸餾水，YITA 組（0.17 g·kg-1）均等體積i.g.給藥，每天1 次，連續7 天。在給予米索前列醇的同時，于豚鼠陰道內置入定量棉球1個（棉球重85-90 mg），用塑料薄膜包裹半側，以防血液漏出和尿液返流。次日分別于8∶00 和20∶00 將棉球取出，放入塑料袋中密閉冷藏保存，同時置換一個新棉球于陰道內，觀察記錄陰道出血情況，連續至第14 天，將收集的每鼠陰道棉球進行出血量測定[27]。采集豚鼠眼眶靜脈血20 μL，加入4 mL 5% NaOH（V1）中，混勻備用。并將收集的每只豚鼠的子宮出血棉球置于燒杯中，根據出血量的情況加適量5% NaOH（V2），浸漬提取一段時間后浸泡擠壓搓洗棉球血漬，至血液完全浸出，過濾即得子宮浸提液。以50 g·L-1NaOH 為空白對照，用紫外-可見分光光度計在546 nm波長下測定浸提液以及豚鼠靜脈血的吸光度值（A2、A1）。最后，根據公式計算子宮出血量[28]。子宮出血量（mL）=靜脈血量×（A2×V2）/（A1×V1），其中V1、V2分別為稀釋靜脈血及浸提子宮血所用NaOH的體積。

用藥結束后（妊娠第15 天）每組取8 只，股動脈取血，收集血液，離心分離血清，按照ELISA 試劑盒說明書檢測血清雌二醇（Estradiol, E2）、孕酮（Progesterone,P）水平。股動脈采血后，將豚鼠仰臥固定于手術臺上，小心剖腹，觀察子宮形態變化，用鑷子夾住子宮角游離端時，剝離子宮周圍脂肪等結締組織。取出子宮稱重并計算子宮比重系數。子宮比重（g/g）=子宮質量（g）/動物體質量（g）。取子宮樣本適量，于冰浴條件下按質量（g）∶體積（ml）=1∶9的比例加入9倍體積的冰生理鹽水，制成10%的勻漿液，將勻漿液在2500 r·min-1條件下，離心15 min，取上清液進行測定。分別采用微板法、ELISA 法、硝酸還原酶法檢子宮勻漿組織Ca2+、ET-1、NO水平，嚴格按照試劑盒說明書操作。

2.2 豚鼠離體USM實驗

取健康、成年雌性未孕豚鼠，在實驗前2日灌胃戊酸雌二醇8 mg·kg-1，以造成動情期。于第3 天頸椎脫臼處死動物，迅速剖取子宮置于盛有洛氏液的玻璃皿中，輕輕剝離子宮上附有的結締組織和脂肪組織。取子宮中間段2-3 cm，即為離體USM 肌條，一端固定于盛有洛氏液20 mL的浴槽，另一端連接張力換能器，浴槽中營養液保持（37.0±0.5）℃，并通以（95% O2+5%CO2）的混合氣體，每秒1-2 個小氣泡，前負荷1 g。用十六通道生理記錄系統記錄離體USM 肌條收縮曲線[29-30]。待曲線穩定后，依次加入YITA0.05 mg·mL-1、0.1 mg·mL-1、0.2 mg·mL-1（20 μL、40 μL、80 μL），去離子水20 μL、40 μL、80 μL 每次給藥后，觀察記錄10 min內USM 收縮曲線，然后用洛氏液清洗USM3次，待USM 收縮穩定后，進行第2 次給藥。比較給藥前后USM 收縮活動力、頻率和張力、幅度的變化。計算方法如下：活動力=平均收縮張力×收縮頻率，幅度=收縮張力最大值-收縮張力最小值。上述指標均轉化為給藥前后變化百分率，再用歸一化法對數據進行去量綱處理，使得每個指標均轉化為0-1之間的“歸一值”，如下：變化率（Δt）=（給藥后—給藥前）/給藥前×100%，歸一值（Msample）=(Δtsample-Δtmin)/( Δtmax-Δtmin)

2.3 豚鼠在體USM實驗

取健康、成年雌性未孕豚鼠，實驗前2日每日灌胃戊酸雌二醇片8 mg·kg-1造成動情期，以提高USM 對藥物的敏感性。實驗前一晚禁食12 h，次日，各組動物按照肌注10%水合氯醛0.4 mL·100 g-1麻醉，仰位固定于手術臺，下腹部剪毛，作4-5 cm 長正中切口。打開腹腔，找出子宮，在其一側子宮角選取長3 cm 的一段，將子宮角的陰道端和卵巢端分別縫合在特制的塑料T型支架底部的兩端支點上。在已固定好的子宮兩支點中點縫一棉線，從塑料管中引出，與肌張力傳感器連接，然后將腹壁圍繞塑料筒底部四周縫合，靜止張力1 g[31-33]。待在體USM 收縮穩定后，經豚鼠左后肢腿部肌群肌內注射（im）給藥。空白組im 生理鹽水（0.5 mL·kg-1）、各給藥組分別imYITA 低、中、高劑量（10、20、40 mg·kg-1），記錄給藥后0-90 min 豚鼠USM活動曲線，并計算給藥后各組藥物對在體USM 收縮活動力、頻率和張力（最大值、最小值、平均值）的抑制率（Δt），計算方法如下：抑制率（Δt）=（給藥前—給藥后）/給藥前×100%。

2.4 統計學分析

實驗數據采用SPSS 19.0建立數據庫后進行分析，實驗結果以均值±標準差（±s）表示，以獨立樣本t檢驗、配對樣本t檢驗和單因素方差分析進行多組間差異的比較，P＜0.05認為具有統計學差異。

3 結果

3.1 對豚鼠流產的影響

3.1.1 對豚鼠流產子宮出血量和子宮濕重的影響

與模型組相比，YITA 組豚鼠子宮出血量降低，但差異不具有顯著性（P＞0.1）；其子宮臟器比重系數顯著降低（P＜0.001），結果見表1。

表1 YITA對豚鼠流產子宮出血量和子宮比重的影響（±s，n=8）

注：與模型組比較，***P＜0.001；子宮比重（g/g）=子宮質量（g）/動物體質量（g）。

子宮比重（g/g）0.039±0.0012 0.028±0.0004***組別模型YITA劑量（g·kg-1）-0.17子宮出血量（mL）0.024±0.010 0.020±0.008

3.1.2 對流產豚鼠血漿E2和P水平的影響

與模型組相比，YITA 組豚鼠血漿E2含量降低，但差異不具有顯著性（P＞0.1）；其血漿P含量則顯著降低（P＜0.01）。結果見表2。

表2 YITA對豚鼠流產子宮血漿E2和P含量的影響（±s，n=8）

表2 YITA對豚鼠流產子宮血漿E2和P含量的影響（±s，n=8）

注：模型組比較，**P＜0.01。

P（ng·mL-1）32.30±12.39 4.79±1.48**組別模型YITA劑量（g·kg-1）-0.17 E2（Pg·mL-1）157.39±54.94 114.69±46.72

3.1.3 對豚鼠流產子宮組織中NO、ET-1 和Ca2+含量的影響

與模型對照組相比，YITA 組豚鼠子宮組織勻漿Ca2+濃度有提高趨勢（P＞0.05）；ET-1含量降低，但差異不具有顯著性（P＞0.1）；NO 含量顯著降低（P＜0.01）；ET/NO 比值顯著提高（P＜0.001），具體結果見表3與圖1。

圖1 YITA對豚鼠流產子宮組織鈣、NO和ET-1含量的影響

表3 YITA對豚鼠流產子宮組織Ca2+、ET-1、NO含量和ET/NO比值的影響（±s，n=8）

表3 YITA對豚鼠流產子宮組織Ca2+、ET-1、NO含量和ET/NO比值的影響（±s，n=8）

注：與模型組比較，**P＜0.01，***P＜0.001。

ET/NO 1.74±0.41 3.72±0.91***組別模型YITA劑量（g·kg-1）-0.17鈣（mmol·gprot-1）0.23±0.049 0.30±0.053 ET（Pg·mL-1）34.59±12.20 42.15±8.44 NO（μmol·gprot-1）20.96±8.22 12.21±4.89**

3.2 YITA對豚鼠離體USM活動的影響

經歸一化處理后，各項指標“歸一值”均在0-1 區間。給予去離子水20、40 μL 后，豚鼠USM 收縮活動力、平均值和最大值均表現為抑制，給予去離子水20、80 μL 后豚鼠USM 收縮頻率表現為抑制。而經YITA給藥后，除收縮平均值在終濃度200 mg·L-1處表現為抑制外，各濃度下豚鼠USM 收縮活動力、頻率、平均值、最大值和幅度均表現為促進。其中，與對應空白組（給予等量去離子水）相比，50、100 mg·L-1的YITA能夠顯著提高豚鼠USM 收縮活動力（P＜0.05）；50 mg·L-1的YITA 對收縮頻率、平均值和幅度有提高趨勢（P分別為0.0895、0.0654、0.0863，＜0.1）；100 mg·L-1的YITA 對收縮平均值和最大值有提高趨勢（P分別為0.0569、0.0734，＜0.1）；200 mg·L-1的YITA 對收縮頻率有提高趨勢（P=0.0745＜0.1）。給予去離子水或YITA 后，豚鼠USM 收縮最小值均表現為抑制；與對應空白相比，200 mg·L-1的YITA 能夠顯著降低豚鼠USM 收縮最小值（P＜0.05）。具體結果見圖2。相關收縮曲線見圖3。

圖2 YITA對豚鼠離體USM活動的影響（n=11）

圖3 YITA作用豚鼠離體USM的活動曲線圖

3.3 YITA對豚鼠在體USM活動的影響

3.3.1 對收縮活動力的影響

與給藥前相比空白組的豚鼠子宮收縮活動力在實驗90 min 內總體表現為抑制；im YITA 后，豚鼠子宮收縮活動力總體表現為促進。與空白組相比，在20-40 min 時段40 mg·kg-1組豚鼠USM 收縮活動力有提高 趨 勢（P分別為0.0635、0.0606，＜0.1）；在80-90 min 時段，40 mg·kg-1組活動力顯著提高（P＜0.05），10 mg/kg 組活動力有提高趨勢（P=0.0569＜0.1）。結果見圖4A。

圖4 YITA對豚鼠在體USM活動的影響

3.3.2 對收縮頻率的影響

與給藥前相比，空白組豚鼠子宮收縮頻率在90 min 內總體表現為抑制；im YITA 后，豚鼠子宮收縮頻率總體表現為促進。與空白組相比，在20-40 min、70-80 min 時段40 mg·kg-1組豚鼠USM 收縮頻率有提高趨勢（P分別為0.0933、0.0879、0.0775，＜0.1）；在60-70 min、80-90 min 時段20 mg·kg-1組頻率有提高趨勢（P分別為0.0898、0.0699，＜0.1）；在80-90 min 時段，10、40 mg·kg-1組頻率顯著提高（P＜0.05）。結果見圖4B。

3.3.3 對收縮張力的影響

與給藥前相比，空白組豚鼠子宮收縮張力平均值在90 min 內總體表現為抑制；im YITA 后，20 mg·kg-1組豚鼠USM 收縮張力平均值總體表現為抑制；10、40 mg·kg-1組平均值總體表現為促進。各給藥組豚鼠USM 收縮張力平均值與空白組相比，不具有顯著性差異（P＞0.1）。與給藥前相比，空白組豚鼠子宮收縮張力平均值和最大值在90 min 內總體表現為抑制；im YITA 后，20 mg·kg-1組豚鼠USM 收縮張力平均值和最大值總體表現為抑制；10、40 mg·kg-1組平均值和最大值總體表現為促進。各給藥組豚鼠USM 收縮張力平均值和最大值與空白組相比，不具有顯著性差異（P＞0.1）。與給藥前相比，空白組與各給藥組豚鼠子宮收縮張力最小值在90 min 內均表現為抑制；各給藥組與空白組間不具有顯著性差異（P＞0.1）。對于豚鼠子宮收縮幅度，空白組與YITA 20 mg·kg-1組無明顯作用趨向；10、40 mg·kg-1組對幅度的作用總體表現為促進，各給藥組與空白組間不具有顯著性差異（P＞0.1）。結果見圖4C、D、E、F。各組的豚鼠在體子宮收縮活動曲線見圖5。

圖5 YITA作用豚鼠在體USM活動曲線圖

4 討論

藥物流產通過米非司酮使子宮蛻膜變性壞死、宮頸軟化，聯用米索前列醇興奮收縮子宮從而促使胚胎排出，是臨床廣泛應用的人工流產方式，其模擬了自然流產的過程，是研究產后出血的理想模型[27]。藥物流產模型下的產后出血與絨毛蛻膜殘留、子宮內膜修復障礙、子宮收縮不良等因素有關[34]。本研究根據文獻報道建立了豚鼠藥物流產模型，研究顯示，給予YITA 能夠顯著降低子宮臟器比重系數（P＜0.001），提示YITA 可能具有促進殘留絨毛蛻膜排出或子宮收縮從而減少產后出血。

米非司酮是P 的競爭性拮抗劑，同時也是E2受體的有效“非競爭性”抑制劑[35-36]，因此在藥流后，機體的E2和P 水平會出現明顯的降低。E2通過促進子宮內膜和血管增生修復子宮內膜創面；并通過上調催產素相關基因與受體的表達，增強USM 對催產素的敏感性從而增強子宮收縮活動，在子宮復舊中起到重要作用[37]。P 在E2作用的基礎上，使增生期的子宮內膜迅速轉化為分泌期，促進子宮內膜的修復[38]。此外，P 通過與USM 細胞結合，增加細胞膜電位，提高興奮閾值，同時降低子宮肌對催產素的敏感性，從而減弱子宮收縮活動，引起子宮出血時間延長[39]。在本研究中，給予YITA 后，E2含量的降低不具有顯著性差異（P＞0.1），而P 含量則顯著降低（P＜0.01），提示在子宮復舊的過程中，YITA 對于子宮內膜修復障礙療效甚微，其縮宮止血的主要機制應該在于對宮縮乏力的改善。

ET/NO 平衡對于維持子宮正常收縮活動具有重要意義。NO是作用極強的子宮血管擴張劑[40]，與USM活動密切相關，尤其對妊娠子宮。NO 通過旁分泌作用于鄰近的平滑肌細胞，激活其細胞膜上鳥苷酸環化酶（GC），使胞漿中cGMP 水平增加，引起平滑肌舒張，使妊娠子宮處于靜息狀態，在維持子宮靜息和妊娠狀態中起重要作用[41]。內皮素（Endothelin，ET）是迄今為止已知最強的收縮血管物質[42]，并且參與調控蛻膜細胞合成和釋放前列腺素的過程[43]，ET 的升高直接或間接地影響著子宮的收縮。本研究結果顯示，給予YITA后，子宮組織的NO含量顯著降低（P＜0.01），ET含量無顯著提高（P＞0.1），ET/NO 比值顯著提高（P＜0.001），ET/NO 平衡偏向增強子宮收縮。提示YITA 縮宮止血作用機制可能與其較強的血管收縮和USM 收縮活性有關，改變ET/NO 平衡可能是其調節子宮收縮的關鍵。

Ca2+濃度在平滑肌收縮過程中起到了關鍵性的調控作用，在外界條件刺激下，USM 細胞內Ca2+濃度升高，Ca2+與鈣調蛋白CaM 結合，激活肌球蛋白輕鏈激酶（MLCK）。之后在MLCK 的催化下，MLC20調控輕鏈的N-端19 位發生磷酸化[44]，構象改變，提高ATP 酶的活性，增加供能，并促進肌動蛋白與肌球蛋白的相互作用，導致平滑肌收縮[45]。在本研究中，給予YITA 后，豚鼠流產子宮組織內Ca2+濃度有提高趨勢（P＜0.1），提示YITA USM 收縮的促進可能與對Ca2+的調節存在潛在關系，但其相關性有待進一步驗證。

上述研究結果提示，YITA對流產豚鼠有縮宮止血作用，其主要機制是促進子宮平滑肌收縮和血管收縮，從而促進子宮復舊。為進一步明確其對子宮平滑肌活動的調節作用，建立了豚鼠離體和在體USM 模型，觀察比較了在不同給藥劑量下的YITA 活性。在豚鼠離體USM 模型中，正常狀態下，隨著時間推移，離體USM的收縮活動逐漸減弱，故給予去離子水后，收縮活動各項指標表現為抑制。與空白組相比，給予YITA后，豚鼠離體USM 的收縮活動增強，50、100 mg·L-1的YITA 能夠顯著提高豚鼠USM 收縮活動力（P＜0.05）。在體USM模型較之離體USM模型整體性更強，在直觀展示USM 收縮活動的同時，更好地還原了藥物吸收分布代謝的過程。然而，受到開腹手術的影響，在體USM 模型中USM 的收縮活動依然會隨著時間推移而減弱，同時還會在不同程度上受到呼吸心跳等其他正常生理活動的干擾；故空白組豚鼠在體USM 收縮活動總體表現為抑制。與空白組比較，給予YITA 后，抑制作用減弱，豚鼠在體USM 收縮活動總體表現為促進。40 mg·kg-1的YITA 能夠顯著提高豚鼠USM 收縮活動力和頻率（P＜0.05）；10 mg·kg-1的YITA 能夠顯著提高豚鼠USM 收縮頻率（P＜0.05），對活動力有提高趨勢（P=0.0569＜0.1）；20 mg·kg-1的YITA 對頻率有提高趨勢（P分別為0.0898、0.0699，＜0.1）。提示YITA 可增強豚鼠的離體與在體子宮收縮活動。此外，YITA對子宮收縮活動的作用與劑量相關，但并非典型的劑量依賴關系，可能與益母草對USM的雙向調節作用有關。

綜上，YITA 能興奮正常豚鼠離體子宮和在體子宮，具有縮宮作用，是YI 發揮縮宮作用的藥效物質基礎，其縮宮止血的作用機制可能與促進興奮信號傳遞、促進子宮組織血管收縮、激活Ca2+-MLCK 信號通路有關。本研究為YI 臨床用于治療宮縮乏力所導致的產后出血提供了一定的藥效學依據，初步探索了縮宮止血的作用機制，更深層次的機制還有待進一步研究。