HLA-DRB1,DQB1多態(tài)性聯(lián)合CA-199檢驗(yàn)大腸癌對血清AST,ALT水平變化的影響

朱秀梅,魏 鋒,2*

(1.吉林大學(xué)校醫(yī)院,吉林 長春130012;2.吉林大學(xué)第一醫(yī)院,吉林 長春130021)

大腸癌屬于惡性腫瘤,在臨床較為常見,現(xiàn)階段仍未明確其發(fā)病原因,主要發(fā)病部位在直腸、結(jié)腸及盲腸,會(huì)嚴(yán)重威脅患者生命安全,且呈老齡化的發(fā)病趨勢[1]。給予大腸癌早期診斷并實(shí)行針對性治療,可保證患者生命安全,有效提升患者生存質(zhì)量[2]。HLA系統(tǒng)有介于功能的共顯性及多基因座的等位基因,參與和介導(dǎo)機(jī)體的外來抗原靶細(xì)胞破壞、免疫應(yīng)答與調(diào)控及抗原識(shí)別與提呈等過程,還關(guān)聯(lián)腫瘤消長及疾病易感性[3]。糖類抗原19-9(Carbohydrate antigen 19-9,CA-199)在進(jìn)行大腸癌診斷及臨床治療方面發(fā)揮著重要作用,但單項(xiàng)檢查的陽性率較低,需探析更加完善的檢測方法[4]。天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(amine aminotransferase,ALT)是給予疾病診斷的重要指標(biāo)[5]。因此,本次研究選取100例大腸癌患者作為觀察對象,分析HLA-DRB1,DQB1多態(tài)性聯(lián)合CA-199檢驗(yàn)對血清AST,ALT水平變化的影響,現(xiàn)匯報(bào)如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

回顧性分析我院2020年6月-2022年6月收治的100例大腸癌患者作為研究組,其中男性57例,女性47例,年齡34～69歲,平均(52.35±2.48)歲,體重57～76 kg,平均(66.24±2.14)kg;另選同期收治的100名健康體檢者作為對照組,其中男性58例,女性42例,年齡35-68歲,平均(52.61±2.53)歲,體重57～75 kg,平均(65.83±2.25)kg。運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對比兩組患者一般資料,因素存在可比性,但均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

上述納入對象均符合以下納入標(biāo)準(zhǔn):(1)所有患者經(jīng)病理檢查均符合直腸癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[6];(2)年齡≥18歲;(3)具備清晰認(rèn)知及良好理解能力者;(4)患者與家屬自愿參與本次調(diào)查研究;(5)此研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)合并全身感染性疾病及自身免疫系統(tǒng)疾病者[7];(2)合并心、肝、腎等嚴(yán)重臟器病變者;(3)合并嚴(yán)重精神疾病者;(4)不具備完整臨床資料者;(5)孕婦或哺乳期;(6)中途因各種原因退出比賽者。

1.2 方法

HLA基因測定:以用聚合酶鏈反應(yīng)-序列特異性引物(Polymerase chain reaction sequence specific primer,PCR-SSP)方法進(jìn)行HLA基因檢測。選用試劑:DNA快速提取試劑盒,北京普信瑞生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的PCR-SSP反應(yīng)板,美國Promega公司提供的Taq酶、蛋白酶K。PCR產(chǎn)物檢測試劑:北京海強(qiáng)生物技術(shù)公司生產(chǎn)的2%瓊脂糖,溴化乙錠(EB)。選用儀器:PCR擴(kuò)增儀、ECP3000電泳儀、小型高速離心機(jī)及旋渦混合器。

于兩組患者入院空腹24 h內(nèi)抽取6 mL靜脈血,快速離心取上清液,采用上海斯歐醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)的全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其配套試劑進(jìn)行CA199水平檢測。

血清AST、ALT水平變化情況:按照說明書使用ACE自動(dòng)生化儀、RANDOX試劑對兩組患者血清AST、ALT水平進(jìn)行檢測。

1.3 觀察指標(biāo)

①選用玻璃奶試劑盒純化PCR-SSP增加產(chǎn)物,選用ABI Prism 310檢測HLA關(guān)聯(lián)基因。②采用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其配套試劑進(jìn)行CA199水平檢測。③血清AST、ALT水平變化情況:使用ACE自動(dòng)生化儀、RANDOX試劑對兩組患者血清AST、ALT水平進(jìn)行檢測。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩組HLA-DRB1等位基因分布情況比較

研究組較對照組明顯增高HLA-DRB1*0901等位基因分布頻率(P<0.05),見表1。

表1 兩組患者HLA-DRB1等位基因分布情況比較

2.2 兩組HLA-DQB1等位基因分布情況比較

研究組較對照組明顯降低HLA-DQB1*080X等位基因分布頻率(P<0.05),見表2。

表2 兩組患者HLA-DQB1等位基因分布情況比較

2.3 兩組CA19-9水平比較

研究組較對照組明顯升高CA19-9水平,組間差異明顯(P<0.05),見表3。

表3 兩組患者CA19-9水平比較

2.4 兩組血清AST、ALT水平變化情況比較

研究組較對照組明顯降低血清AST、ALT水平,組間差異明顯(P<0.05),見表4。

表4 兩組患者血清AST、ALT水平變化情況比較

3 討論

大腸癌屬于一類惡性腫瘤,發(fā)病率位居第三位,僅比肺癌及胃癌發(fā)生率低,早期癥狀不明顯,在確診后已發(fā)展至中晚期,情況嚴(yán)重下還可能發(fā)生轉(zhuǎn)移,導(dǎo)致最佳治療時(shí)機(jī)延誤[8-9]。伴隨我國逐年升高大腸癌發(fā)病率,需盡早診斷疾病,探尋安全、便捷及可靠的檢測方法,盡早發(fā)現(xiàn)疾病,確保患者治愈率[10]。現(xiàn)階段,大腸癌遺傳易感性關(guān)聯(lián)HLA等位基因的報(bào)道較少。相關(guān)研究[11]表明,HLA-DRB1、DQB1等位基因未關(guān)聯(lián)高加索人大腸癌。新陳代謝過度活躍會(huì)在體細(xì)胞癌變過程中導(dǎo)致改變細(xì)胞表明糖蛋白,伴有升高腫瘤細(xì)胞表面糖類抗原,CA19-9為常見腫瘤標(biāo)志物,該腫瘤標(biāo)志物對單一腫瘤特異性不足,會(huì)伴有多種腫瘤標(biāo)志物異常表達(dá)[12-13]。相關(guān)研究[14]表明,大腸癌中CA19-9是一種糖蛋白混合物,屬于較高的腫瘤標(biāo)志物表達(dá),存在著較高的分子量,由正常人胰腺、胃、子宮內(nèi)膜、結(jié)腸、膽管細(xì)胞及唾液腺上皮合成,在血清中的存在形式為黏蛋白,可經(jīng)肝臟代謝低表達(dá)于組織中。CA19-9可聯(lián)合其他檢測方法,提升臨床診斷敏感性,用于早期診斷[15-16]。血清AST、ALT水平是給予大腸癌疾病診斷的關(guān)鍵指標(biāo),可將肝臟疾病的具體表現(xiàn)反映出,ALT是于機(jī)體組織細(xì)胞中存在,特別是居中于腎臟、心肌及腦組織中,AST是于心肌組織中存在,特別位于骨骼肌、腎臟及肝臟等組織中,AST、ALT均屬于非特異性細(xì)胞內(nèi)功能酶,保持高水平狀態(tài)時(shí)代表機(jī)體損傷肝細(xì)胞[17-18]。

本研究結(jié)果顯示,研究組較對照組增高HLA-DRB1*0901等位基因分布頻率,降低HLA-DQB1*080X等位基因分布頻率(P<0.05),可見,HLA-DRB1*0901正關(guān)聯(lián)大腸癌,HLA-DQB1*080X負(fù)關(guān)聯(lián)大腸癌。HLA-DRB1、DQB1等位基因分別吻合基因庫相應(yīng)等位基因第2外顯子堿基順序[19-20]。本研究選用的介入陽性內(nèi)參照的PCR/SSP,可預(yù)防以往無質(zhì)控時(shí)給予HLA等位基因純合子的檢測不準(zhǔn)確性,RCR產(chǎn)物不需酶切,可電泳判定結(jié)果,保證便捷操作。本研究結(jié)果顯示,研究組較對照組明顯升高CA19-9水平,降低血清AST、ALT水平(P<0.05)。可見,大腸癌患者血清CA-199表達(dá)高于健康體檢者,血清AST、ALT表達(dá)低于健康體檢者,可用于早期篩查直腸癌,且篩查方法便捷,無創(chuàng),可在大腸癌篩查中獲得廣泛應(yīng)用。

綜上所述,HLA-DRB1*0901正關(guān)聯(lián)大腸癌,HLA-DQB1*080X負(fù)關(guān)聯(lián)大腸癌,聯(lián)合CA-199檢驗(yàn)的診斷價(jià)值較高,可準(zhǔn)確判斷血清AST、ALT水平,具有臨床推廣意義。