黑鯛自體受精家系的建立及養殖試驗

孟 乾，郭亞東，賈超峰，祝 斐，王文權，徐大鳳，陳淑吟

(1.江蘇省海洋水產研究所，江蘇 南通 226001；2.如東縣漁政監督大隊，江蘇 如東 226400)

黑鯛隸屬于鱸形目、鯛科、棘鯛屬，主要分布在我國東南沿海一帶以及日本、東南亞等地區。黑鯛既是我國增殖放流品種之一，同時也是我國沿海地區海水養殖的名貴經濟魚。黑鯛肉質細膩、鮮美，營養豐富，深受市場歡迎以及消費者喜愛。但黑鯛生長需要經歷兩次越冬，嚴重制約黑鯛養殖業的發展，亟須通過品種改良提高生長速度。

海水魚育種中最經典、常用的方法為選擇育種，根據選擇育種的理論，使優良性狀基因純化并穩定遺傳，幾乎是每個良種培育的必經過程。目前良種基因純化的過程仍然是主要采用具有親緣關系的個體多代近交的方法。但是該方法往往需要很長時間，多代近交純化選育的方法費時費力，而自交相當于2～3 代近交，通過構建自交家系可極大地加快基因純化的速度和不良基因淘汰的進程。

如何獲得同一尾黑鯛的精子和卵子成為構建自交系的關鍵之一。黑鯛具天然性逆轉習性，屬雄性先熟型雌雄同體，前2年為雄性，之后部分轉雌，因此，采用先獲得精子進行長期保存、性逆轉后再獲得卵子的方式可以獲得同一尾魚的精子和卵子，使得黑鯛自交系的建立成為可能。

一、材料與方法

1.試驗材料

試驗用魚為江蘇省海洋水產研究所繁育的黑鯛。

2.試驗過程

2022 年在黑鯛繁殖期挑選體質健壯、性腺發育良好的2齡黑鯛取精液并保存在液氮中，統計生物學數據并打上動物芯片。

2023年4月在黑鯛繁殖期挑選出有動物芯片且轉雌的魚，每尾各放1個塑料筐中(暫時存放)。根據轉雌魚的芯片編號找到其對應的冷凍精子，鏡檢精子活力，用活力好的精子進行人工授精。將受精卵放入孵化桶中進行孵化。

3.養殖試驗

受精1小時后，利用分卵裝置將建立的黑鯛自交家系進行分卵，去除死卵及污物。受精12 小時后，取樣、觀察受精卵發育情況，計數每組自交家系的數量以及成活受精卵量，然后根據每組成活受精卵的數量，將數量少的組布卵在50～100升白桶中進行孵化和養殖，數量多的組直接布卵在室內水泥池中，孵化水溫在20～22℃。布卵前水位在30～40 厘米，布卵后每天加注10～20 厘米水，注意控制水溫差在2℃以內。孵化期間采用氣石進行微充氣。

在初孵仔魚開口前開始少量投喂輪蟲，輪蟲密度為5～10 個/毫升，并向養殖水體中加入小球藻，保持良好水色。待仔魚開口后，根據輪蟲消耗量逐步增加輪蟲投喂量。大約第5天開始少量換水，換水量約為20%。換水時，前期魚苗體形較小，需要緩慢排水，避免魚苗損傷，并用40～60 目網片阻隔，以防止逃魚。前期進水時也要注意緩慢進水，避免水流沖擊過大，進水經200目以上網袋過濾后入池。隨著投喂量增加以及溫度的上升，換水量逐步增加，日換水1～2次。

經過15 天左右的養殖，由于部分白桶中魚苗數量過多，要將其進行分苗處理。此時魚苗較小，操作需要格外小心，盡量減少對魚苗的傷害。養殖30 天左右，將白桶內的自交家系根據數量情況，數量較多者轉移至水泥池進行養殖，數量較少者放置在室內的網箱中進行養殖。操作過程全程帶水，避免傷苗。此后加大各個水泥池換水量，每天2次。

養殖45 天左右開始馴化魚苗攝食顆粒飼料，減少輪蟲投喂量。經過5～7 天馴化，完全停止輪蟲投喂，顆粒料投喂每天3次，每次投喂結束及時將未吃完的顆粒料撈出，以減少對水體的污染。

在室內養殖至7月后，將數量較多的4個家系放入室外網箱，每個網箱1 000尾，進行養殖。將此4 個家系中剩余的魚放至室外1～4 號土池中進行養殖。室外土池中安裝增氧機，投喂顆粒飼料，根據水質情況及時加水、換水。

二、結果

經過一段時間的養殖，共獲得15 個黑鯛自交家系，數量在100～10 000 尾。黑鯛自交家系長勢良好，部分黑鯛家系7 月(3 月齡)生物學數據見表1。

表1 黑鯛自交家系3月齡生物學數據

三、分析與討論

自交對養殖遺傳群體改良具有明顯的積極作用，主要包括兩個方面：一是通過改變基因組合的頻率，選擇理想的基因型，或加快不理想基因型魚的淘汰速度；二是使群體分化，從而得以培育出不同的純系，為經濟品種雜交提供最大化的雜交種優勢。

目前，黑鯛自交家系魚長勢良好。黑鯛自交家系的突破不僅為其他先雄后雌經濟魚遺傳改良研究提供新的技術參考，也使采用自交培育黑鯛新品種成為可能。黑鯛自交家系的建立有助于黑鯛種質資源保護，縮短育種進程，為其種質改良、培育新品種提供理論依據，同時也可為性狀遺傳分析和構建遺傳圖譜提供材料。