ApoE基因多態性與高水平Hcy的協同作用對妊娠高血壓的影響

龔麗娜,石海珩,隋 霜,黃 鶯

(新疆維吾爾自治區人民醫院產科,新疆 烏魯木齊 830001)

妊娠期高血壓疾病多發生于妊娠20周后,常伴有蛋白尿和多器官受損[1]。妊娠期高血壓疾病的發生機制尚未完全明確,通常認為與孕期血管內皮功能異常、免疫系統異常、血管內皮細胞損傷、血管活性物質異常分泌等因素有關[2]。妊娠期高血壓疾病不僅對孕婦和胎兒的健康造成了嚴重威脅,還給家庭和社會帶來了負擔[3]。因此,及早診斷、有效預防和科學管理對于妊娠期高血壓疾病至關重要[4]。研究表明載脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)基因多態性和同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平的異常與妊娠期高血壓疾病的發病相關[5]。ApoE基因位于人類19號染色體,主要包括ε2、ε3和ε4三種等位基因,三種等位基因形成了六種基因型:ε2ε2、ε2ε3、ε2ε4、ε3ε3、ε3ε4、ε4ε4,每種基因型對應著不同的ApoE蛋白結構和功能[6]。孕婦ε4等位基因異?？赡苊媾R血管內皮功能異常、血壓升高和炎癥反應增強的風險,然而,在妊娠期高血壓疾病中的具體作用機制尚不清楚[7]。Hcy是一種氨基酸代謝產物,正常情況下由體內酶系統轉化為其他氨基酸[8]。Hcy在生物體內具有多種生物學功能,高水平的同型半胱氨酸與心血管疾病、阿爾茨海默病、腦卒中、妊娠期高血壓疾病等多種疾病發生相關。研究表明Hcy升高可能對血管內皮功能造成損傷,引發炎癥反應和血小板聚集,從而導致血管收縮和損傷,增加妊娠期高血壓疾病發病的風險[9],但Hcy在妊娠期高血壓疾病中的具體機制尚不明確。因此,本研究旨在探究ApoE基因多態性與Hcy水平在妊娠期高血壓疾病發病中的作用,為其早期診斷和個體化治療提供科學依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取新疆維吾爾自治區人民醫院2021年1月至2021年12月收治的妊娠期高血壓孕婦200例作為研究組,年齡20～39歲,平均(33.19±10.22)歲,并且隨機納入同時期200例非妊娠期高血壓孕婦作為對照組,年齡22～38歲,平均(32.77±10.36)歲,兩組患者年齡無顯著性差異(P>0.05)。研究組納入標準:①年齡>18歲;②確診為妊娠期高血壓疾病(妊娠期高血壓或子癇前期);③孕周≥20周;④參與者了解研究并簽署知情同意書。對照組納入標準:①年齡、分娩孕周與病例組相匹配;②無妊娠期高血壓疾病。排除標準:①合并糖尿病或其他慢性病;②人工授精者;③雙胎或多胎妊娠;④依從性差不配合調查者;⑤意識不清、聽力障礙不能完成調查者。本研究經本院醫學倫理委員會批準通過。

1.2 方法

1.2.1 血液標本收集

調查當天采集研究對象空腹(隔夜空腹10小時以上)靜脈血10mL,所有血液樣本在收集后兩小時內進行離心、分裝,-20℃冰箱保存,24小時內轉移至-80℃冰箱保存。另取靜脈血4mL置于肝素抗凝管中,4小時內2 500r/min離心10min,取血清用于生化指標的檢測。

1.2.2 ApoE基因多態性檢測

抽取3 mL外周血,乙二胺四乙酸(EDTA-K2)抗凝,用TIANGEN血液基因組DNA提取試劑盒提取DNA,使用PCR-RFLP方法檢測ApoE基因型及基因頻率情況。

表1 ApoE表型與基因型

1.2.3 Hcy水平檢測

使用Siemens Dimension系列全自動生化免疫分析儀對所收集的患者樣本中的Hcy濃度進行分析,根據《中國高血壓防治指南》2018版將Hcy≥15μmol/L定為高Hcy(high homocysteine,HHcy)。

1.3 統計學分析

2 結果

2.1 兩組孕婦臨床特征比較

兩組孕婦年齡無顯著性差異(P>0.05)。研究組孕婦高血壓、蛋白尿、水腫、胎兒生長受限、羊水過少的發生率均顯著高于對照組(P<0.01),且血中Hcy水平顯著高于對照組(P<0.05),見表2。

表2 兩組孕婦臨床特征比較

2.2 兩組孕婦AopE基因多態性的差異性

兩組孕婦中ε3ε3基因型最常見。研究組中孕婦ε2ε3、ε3ε3基因型頻率以及ε2、ε3等位基因頻率均顯著低于對照組,ε3ε4、ε4ε4基因型頻率以及ε4等位基因頻率均顯著高于對照組(P<0.05),ε2ε2、ε2ε4基因型頻率略高于對照組但無顯著性差異(P>0.05),見表3。

表3 兩組孕婦AopE基因多態性的差異性比較 [n(%)]

2.3 兩組孕婦Hcy水平比較

兩組孕婦組內不同表型之間Hcy水平比較有顯著性差異(P<0.05),進一步每兩組間比較結果顯示研究組E3、E4 AopE表型孕婦的Hcy水平均顯著高于對照組(P<0.05),且E4表型孕婦的Hcy水平顯著高于E2、E3(P<0.05),說明E4表型與Hcy水平之間存在一定的關聯,見表4。

表4 兩組孕婦Hcy水平

表5 兩組孕婦Hcy分層分布的比較 [n(%)]

2.4 AopE基因型和Hcy的協同作用對妊娠期高血壓疾病發病的影響

兩組孕婦Hcy分層分布的比較發現E4表型中研究組孕婦的HHcy比例顯著高于對照組(P<0.05),而E2、E3表型中兩組孕婦HHcy比例均無顯著性差異(P>0.05),說明E2、E3表型對高Hcy效應不顯著,進一步說明E4表型和Hcy對妊娠期高血壓疾病的發病存在協同作用。

3 討論

WHO統計結果顯示全球每年約有8%～10%的孕婦患有妊娠期高血壓疾病,若未及時治療或控制,可進一步發展為子癇前期或子癇[10],對孕婦及胎兒造成嚴重的不良影響[11]。目前,研究顯示妊娠期高血壓疾病的發生與孕期血管內皮功能異常、免疫系統異常、血管活性物質異常分泌等因素有關[12]。因此,及早診斷對有效預防妊娠期高血壓疾病進展至關重要。

3.1 ApoE基因多態性與妊娠高血壓的關系

ApoE是體內重要的脂質運載蛋白,在調節脂質代謝、膽固醇轉運和清除、細胞修復和炎癥反應等方面具有重要作用[13]。研究發現ApoE基因多態性可能通過影響血脂代謝、細胞凋亡、血管內皮功能和炎癥反應等途徑誘發妊娠高血壓疾病。ApoEε4等位基因突變型可增加妊娠高血壓疾病的患病風險,而ApoEε2等位基因突變型可降低妊娠高血壓疾病的患病風險[14]。研究組中孕婦ε2ε3、ε3ε3基因型頻率以及ε2、ε3等位基因頻率均顯著低于對照組,ε3ε4、ε4ε4基因型頻率以及ε4等位基因頻率均顯著高于對照組,此結果說明ε4等位基因可能與妊娠期高血壓發生有關。此前有文獻指出ApoE的不同異構體與脂蛋白受體的親和力不同,其中E4具有升膽固醇的作用,且ApoE等位基因ε2和ε4頻率在部分子癇患者中顯著升高,這與本研究所得出的結果相一致。正常妊娠過程中,孕婦體內血脂代謝活躍,有利于胎兒生長發育的生理機制,但當孕婦發生妊娠期高血壓疾病時,ApoE等位基因ε2和ε4頻率升高,血脂代謝發生紊亂,主要表現為甘油三脂、膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇水平明顯升高,而高密度脂蛋白膽固醇水平明顯下降,導致高密度脂蛋白膽固醇對血管壁的保護作用急劇下降,血脂在血管壁和組織中沉積,誘發高血壓或子癇[15]。

3.2 Hcy水平與妊娠高血壓的關系

Hcy是一種由蛋氨酸代謝產生的非蛋白質氨基酸,高水平的Hcy與血管內皮功能受損、血管炎癥反應和血栓形成等過程密切相關[16]。本研究結果顯示,與對照組相比,研究組患者血清Hcy水平明顯升高,這提示高水平Hcy與妊娠高血壓疾病密切相關,另有研究顯示妊娠中期血清Hcy水平升高者發生妊娠期高血壓的風險增加3.2倍[17]。在機制方面,Hcy可能通過損害血管內皮功能、促進血小板活化和凝血功能紊亂等機制引發血管病變和器官的損傷,因此降低Hcy的表達有可能成為治療妊娠期高血壓疾病的一個靶點。

3.3 ApoE基因多態性與Hcy水平的協同作用

本研究發現在妊娠期高血壓疾病患者中,E3、E4 AopE表型孕婦的Hcy水平均顯著升高,且E4表型孕婦的Hcy水平顯著高于E2、E3,這說明E4表型與Hcy水平之間存在一定的關聯。此外,本研究結果還發現E4表型中研究組孕婦的HHcy水平均顯著高于對照組,而E2、E3表型中,兩組孕婦HHcy水平均無顯著性差異,說明E2、E3表型對高Hcy效應不顯著,進一步說明E4表型和高水平Hcy對妊娠期高血壓疾病發病存在協同作用。

綜上所述,ApoE基因多態性和高水平Hcy與妊娠期高血壓疾病的發病相關。ApoE基因ε4等位基因的存在與高Hcy水平之間的相互作用會增加妊娠期高血壓疾病發生的風險。本研究雖然對ApoE基因多態性與Hcy水平變化在妊娠期高血壓疾病患者發病的協同作用進行了研究,但仍存在一些不足之處。本研究的樣本量較小,可能限制研究結果的可靠性,此外,本研究主要關注ApoE基因多態性和Hcy的水平變化與妊娠期高血壓疾病之間的關聯,但未深入探究其潛在的分子機制。因此,未來的研究可以擴大樣本量,同時需要進一步探索ApoE基因和Hcy對妊娠期高血壓疾病發病的影響機制,從而加深對妊娠期高血壓疾病發病機制的理解,為其預防和治療提供更加有效的策略。